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關鍵詞：突發公共衛生事件；病例定義；假說

1 突發公共衛生事件的分類

1.1重大傳染病疫情 短時間內發生，傳染范圍廣，出現大量的病死或死亡，其發病率超過往年水平。例如，青海市2004年發生的鼠疫疫情，上海1988年發生的大規模感染甲型肝炎。

1.2重大食物中毒和職業中毒事件 是指由于食物被污染或者職業危害的原因，導致人數眾多的傷亡中毒事件。2002年在保定市發生一起苯中毒事件，箱包生產的數名生產工人出現中毒癥狀，并有6例工人死亡，這就屬于職業中毒事件。2002年南京發生一起特大投毒事件，導致395例食物中毒，42例死亡。

1.3群體性不明原因疾病。是指在某一區域內連續出現相同的臨床表現，短時間內不能明確診斷該疾病，同時病例人數逐漸增多，范圍也在擴大。我國2003年爆發的非典，發病之初并不明確病原體，非典傳播速度很快，很多患者都出現相同的臨床癥狀，這起事件就屬于群體不明原因疾病。

1.4新發傳染性疾病 是指一個國家或地區新發生的、新變異的或新傳人的傳染病。世界上新發現的32種新傳染病中，有半數左右已經在我國出現，新出現的腸道傳染病和不明原因疾病對人類健康構成的潛在危險十分嚴重，處理的難度及復雜程度進一步加大[2-3]。

1.5群體性預防接種反應和群體性藥物反應 是指接種疫苗或者服用藥物以后出現異常反應，出現該事件可能是由于藥物疫苗存在質量問題，或者是人體自身生理過敏反應。

1.6重大環境污染事故 是指化學品在生產、運輸、使用、廢棄物處理等因管理不當，出現化學品污染環境造成人員的傷亡。

1.7自然災害 因為自然力引起的設施破壞、嚴重經濟損失、人員傷亡、人的健康狀況及社會衛生服務條件惡化超過了所發生地區的所能承受能力的狀況。

1.8核事故和放射事故。是指核泄露、放射物質泄露威脅到公眾的生命健康。

2 突發公共衛生事件的現場調查步驟

2.1初步調查 首先要進行核實診斷，有些突發事件的臨床癥狀是以前未曾出現過的，情況較為特殊。事故發生后要第一時間到現場了解患者的情況，主要了解患者的臨床癥狀、體征，還有現場的環境情況，本地的流行病史，患者的年齡、職業、人群預防接種情況，患者的各項檢查指標。不同類型的突發事件核實診斷的方法有差異，要根據具體情況做調整。同時對周圍居民、群眾進行調查，了解發病的情況，當地居民對環境比較熟悉有助于工作人員進一步了解事件發生的原因。登記在現場群眾的個人資料，如果該事件屬于傳染性疾病，可以盡早對可疑患者進行診斷治療。突發事件一般比較突然，現場群眾和附近居民心理會恐慌，相關工作人員要對群眾進行心理疏導，幫助有需要心理輔助的人員，同時在場有專業人士回答群眾的疑惑，避免群眾出現盲目的恐慌心理，群眾的積極配合有利于突發事件的控制。

2.2收集病例及相關資料 登記患者的基本資料，姓名、年齡、居住地、民族、聯系方式，重點了解患者的發病情況、臨床癥狀、發病時間。還包括當地地區單位靜態人口資料，人口總數，對于流動人口較大的區域要了解爆發前的人口數。比較發病者和不發病者相關因素有何不同，從中可以尋找發病的原因。

2.3建立病例定義 通過前面的調查了解，可以比較清楚發病患者有何臨床特征，建立準確的病例定義有利于發現疑似患者，有利于疾病的控制。病例定義主要包括兩個方面，一個是描述突發事件的信息，包括時間、人群、地區分布、具體的地理環境。另一個是描述患者的癥狀、體征、實驗室檢測指標。定義的語言盡可能的簡單、方便應用，對于不明原因的疾病要避免武斷的病例定義。建立病例定義是可以參考一下幾點：①臨床癥狀明顯和不明顯的比例是多少；②是否有比較明顯的臨床癥狀或體征，可以和其他疾病有區別的；③哪種診斷方法最簡單、實用，例如微生物學、化學分離鑒定、血清學方法等[3]。

2.4提出假說 根據事件資料的匯總，對患者的發病特征、現場的環境，再結合文獻回顧性分析，提出突發衛生事件的原因。例如該地區發生大規模的傳染性疾病，可以假設這一傳染病是由某種微生物所引起的。經過初步調查對事件的發生還不是很深入了解，提出假說可以為進一步研究指明方向。

2.5深入調查，驗證假說 觀察現場環境，對可以傳播的方式、傳播因素進行現場勘查，以了解疾病暴發的原因。分析患者的各項檢測指標如血清學、病原微生物。例如，假說提出本次突發衛生事件是由流感病毒傳染所引起的，研究員可以通過采集患者的呼吸道樣本，對采集樣本進行病毒學實驗鑒定，最后可以判斷患者是否是感染流感病毒。

2.6采取控制措施 特別是針對傳染性疾病，要控制傳染源、傳播途徑和易感人群[4]。對于化學污染等情況，要盡快的清楚污染物，保護水源，已經被污染的水源要實時監控禁止居民使用污染水，防治再次發生中毒事件。同時要加強群眾對突發公共衛生事件的認識。

3 完善現場調查檢驗方法

為了完整、準確評價流行爆發的流行特征，需要尋找更多的病例，更加準確的評價一個新的檢驗方法的檢出病例的技術，提高病例鑒別的敏感性和特異性。后續，研發診斷試劑盒、檢測儀器，可以更加高效的診斷。新發傳染性疾病可能是由于病毒變異所引起的，根據臨床癥狀不能很準確的診斷疾病，近年來興起分子生物學診斷試劑盒。其原理是根據病毒特異性抗體，生產能特異性檢測該抗體的試劑盒，還有一種方法是根據病毒的特異性核酸序列，研發檢測序列的試劑盒。傳染病的流行是和季節有關的，下次疫情再次發生的時候診斷試劑可以及時對疾病進行監控，對感染患者盡早治療，控制疾病大流行。分子生物學診斷和臨床癥狀診斷想比較，分子生物學診斷特異性更好，診斷時間快，準確性高。

參考文獻：

[1]郭存三.突發公共衛生事件的流行病學調查與應急處理[J].中國預防醫學雜志，2004，38（1）：65-67.

[2]谷亞紅，張智斌，李長紅.學校突發公共衛生事件研究綜述[J].疾病控制，2011，8（36）：129-131.

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[關鍵詞] 肺結核；PCR；抗酸染色法；診斷

[中圖分類號] R4 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2016）05（c）-0077-02

[Abstract] Objective To compare the accuracy of PCR technique and acid-fast staining in diagnosis of pulmonary tuberculosis pathology. Methods 60 cases of patients suspected with pulmonary tuberculosis treated from March 2014 to October 2015 were selected， and the lung alveolar fluid and lesion tissue strips were obtained by the ultrasonic fiber bronchoscope， and then sent for PCR technique and acid-fast staining. Results Of the 43 cases with pulmonary tuberculosis， the positive rate of PCR technique is superior to that of acid-fast staining （83.72% vs 41.86%）， and the difference had statistical significance， （χ2=16.125 0， P

[Key words] Pulmonary tuberculosis； PCR； Acid-fast staining； Diagnosis

肺結核病是有結核分枝桿菌引起的一種肺部感染性疾病，該病傳播性強，致殘率高，嚴重影響人民健康，是我國重點防治疾病之一[1]。在肺結核病的治療中，盡早治療可避免肺功能下降，而目前隨著結核桿菌對耐藥性的增強，在臨床上如何建立快速、準確的結核分支桿菌菌種的鑒別，根據檢測結果選擇敏感性藥物，是治療和控制結核病的必要前提[2]。PCR技術、抗酸染色是肺結核病常用診斷方法，該研究方便選擇2014年3月―2015年10月該院收治的60例疑似肺結核病患者，觀察和比較上述兩者優缺點，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選擇2014年3月―2015年10月該院收治的60例疑似肺結核病患者，其中男38例，女22例，年齡16～76歲，平均年齡（39.4±8.9）歲，經臨床病史、影像學分析及病理組織學檢測，最終確診為肺結核病43例，非肺結核病患者17例，包括彌漫性肺炎12例，肺癌4例，肺氣腫3例。該研究經該院倫理委員會批準，所有納入研究者均簽署知情同意書。執行操作時無一例退出。

1.2 方法

在超聲纖維支氣管鏡下，尋找病灶，用細針先注入10～20 mL生理鹽水，再回抽獲得肺泡灌洗液；用切割活檢針獲得條狀組織，將后者沖洗后石蠟包埋。抗酸染色法：將部分肺泡灌洗液離心處理，或將獲得的石蠟切片脫蠟處理，初染用石炭酸品紅，在70 ℃下孵育30 min，酒精脫色，復染用0.5%亞甲藍，水洗后用無水酒精脫水，二甲苯透明封固，放置于高倍鏡下觀察。于巨噬細胞周圍發現微細桿狀紅染現象則為陽性。PCR法檢測：選用7900實時熒光定量PCR基因擴增儀，由PCR熱循環儀、熒光檢測系統、溫度控制系統及反應板組成，由新加坡 LIFF THECHNOLOGIES HOLDINGS PTE LTD 生產，公司地址Block 33，Marsiling Industrial Estate Road3，#05-03，Singapore739256，英濰捷基（上海）貿易有限公司，國食藥監械（進）字2010第3401880號，先將獲得的肺泡灌洗液與2倍4%NaOH溶液混合，或將石蠟切片脫蠟、液化后再與2倍4%NaOH溶液混合。將上述混合液離心、沉淀，加入50 μL 的DNA提取液混勻，100 ℃煮沸10 min，1.2×104轉離心10 min，取2 μL上清液，用于基因擴增。預變性93 ℃2 min，變性93 ℃ 45sec，退火、延伸55 ℃120sec，上述過程共執行30個循環。CT值

1.3 統計方法

所有數據均采用SAS9.2統計學軟件處理。兩種檢測方法準確性比較采用%表示，組間比較采用χ2檢驗。P

2 結果

最終確診為肺結核病43例中，PCR法結果陽性為83.72%高于抗酸染色法結果陽性為41.86%，差異有統計學意義（P

3 討論

細菌培養法是結核分枝桿菌確診的金指標，但其耗時較長即便是快速培養，也需要7～10 d[3]。抗酸染色法具有簡便、廉價、對設備要求不高等特點，但該法檢出率較低。趙晶等[4]報道在88份痰標本中僅有20例顯示抗酸染色陽性，這表明抗酸染色敏感性較差。分子生物學檢查是近年來發展起來的快速、準確診斷技術，常見的檢測方法包括聚合酶鏈式反應-單鏈構象多態性分析、反向斑點雜交法、、聚合酶鏈式反應-限制性片段長度多態、環介導等溫擴增技術[5]等，但上述步驟繁瑣、容易產生污染，故不利于臨床廣泛應用[6]。熒光PCR技術是融合了核酸擴增技術、DNA雜交技術和光譜技術，首先將特異性目的基因片段在數小時內擴增數百萬倍[7]，然后利用特異性探針，對目的基因片段進行識別，這就大大提高了診斷的敏感性，在細菌培養困難較大的案例中其診斷價值更為突出。此外，該研究采用標本是通過超聲纖維支氣管鏡獲得的病灶組織條及肺泡灌洗液，因直接取材于病灶處及周圍支氣管肺泡，肺泡灌洗液中的細菌含量較高，污染幾率低，該標本檢測的優勢還包括適用于在痰培養結果為陰性但仍有證據懷疑為肺結核案例，肺結核與其他類肺部病變及無痰者[8]。

該研究結果顯示60例患者中PCR法診斷符合率88.33%優于抗酸染色法58.33%，43例肺結核患者匯總PCR的檢出率83.72%，略低于吳國蘭[8]報道的86.7%，但差別不到。該研究結果提示與抗酸染色法相比，PCR技術的檢出率較高，可在肺結核早期診斷與治療中發揮更大作用。另外，PCR法的診斷仍不能達到100%，對其漏診率的分析對PCR法的改進及輔助臨床診斷有重要意義，值得進一步研究。

[參考文獻]

[1] 中華醫學會結核病學分會.肺結核診斷和治療指南[J].中國實用鄉村醫生雜志，2013，20（2）：7-11.

[2] 阿米娜古麗?塔西鐵木爾，胡昕，王晶，等.傳統方法和PCR法在結核分枝桿菌復合群菌種鑒定中的對比研究[J].中國防癆雜志，2013，35（2）：103-107.

[3] 劉小文，歐陽冬英.實時熒光定量PCR檢測痰中結核分枝桿菌臨床評價[J].中國現代醫藥雜志，2014，16（1）：24-26.

[4] 趙晶，葛存興，王宏志，等.熒光定量基因擴增法與萋-尼抗酸染色法檢測結核分枝桿菌的比較[J].中國實用醫藥，2015，10（3）：74-75.

[5] 陳效友.肺結核診斷的研究進展[J].中國臨床醫生，2013，41（3）：11-14.

[6] 王冰冰，郭明日，肖紅俠，等.熒光 PCR 熔解曲線法在結核分枝桿菌耐藥檢測中的臨床應用[J].國際檢驗醫學雜志，2015，（5）：608-609，612.

[7] 黃澤亮，桂福.FQ-PCR檢查痰中結核桿菌對肺結核診斷的臨床價值[J].中南醫學科學雜志，2013，41（4）：389-391.