導語：如何才能寫好一篇那就是愛，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

五年六班

杜曉琦

7月8日下午，我從書店出來，只見傾盆大雨是下個不停??！就連書店門口都淹成了一條小河。這時已經6點半了，在書店門口的我焦急萬分，正巧有沒帶任何雨具，還騎了車來，心想：這下糟了，什么都沒帶，還帶了這么一大包的作業來，有什么用啊！反而拖我后腿嘛。

后來，我還是挽起褲管，光著腳丫穿過馬路去學校牽車。當我走到馬路邊時，道路兩旁的水長得非常快，又很急，瞞過了半個小腿兒，險些兒把我沖倒。

我騎著車，從學校后門冒雨直沖回家，在路上，雨不斷地襲擊我的全身，又像一個又一個的導彈向我襲來。一到新村小學那一條路段，積水就足已淹沒一個一歲小孩。雨不停的下著，我坐在自行車上，就好似坐在一葉方舟上漂泊，又好像耍雜技一般，一會兒歪到這邊；一會兒倒向那頭；一會兒又向前傾。

路多難行呀！每前進一步都很艱難！但是，越是艱難險越要前進，騎著自行車往前沖，“沖啊??”我大聲喊道。當時，我還發明了一個蛙泳式騎車法，因為是腳都是完全浸在水中的，所以就讓腳以蛙泳式使車更快的前進。一轉眼就被沖道廣平倉的一家米店旁。雨越下越大，水越長越高，根本無法回家，只好停車去找公用電話。我淌在水中，漫步前行，看到水面上漂浮著一些很惡心的東西，比如：死蟑螂，，死老鼠，木塊等垃圾。一不小心，腳拌到了一塊大石頭上，絆倒在湍急的黃泥水中，就要被水沖走。在這千鈞一發的時刻，幸巧米店老板救了我，把我拉了上來。被拉上來時，我的衣服濕漉漉的，渾身發抖，牙齒“咯咯咯”地在打仗，我多么想回家換上干衣服，溫暖溫暖我這瘦弱的身軀。哎，這真是老天爺在捉弄我，被困在米店，想回家又回不了家，大人來家又來不了，真是‘恨鐵不成鋼’啊！

正巧，遠處來了幾個巡邏的民警，米店老板看到了，放聲大喊：“嗨，前面的民警，這里有個小孩，先把她送回家吧！”又對我說“快回家吧！別著涼了，這是要感冒的！”這句話，使我的心頓時暖了些。聞訊趕來的民警攙扶這我往回家的路走去??走到半路上，突然停電了，那時天很黑，雨又下得很大，我邊走邊打著哈欠。因為水太急了，所以我差不多是高抬腿式走路的。只見一張方桌隨誰飄來，重重地撞了我的大腿和腳趾一下，我忍這痛繼續前進，民警似乎看出了什么，把他的風衣披在我肩頭，說“再忍忍，就快到了！”這時我感受到了 民警無私的愛，這愛使我溫暖。不一會兒，我終于到了，到了小山新村的大門前，我興奮地向民警敬了個禮，奔回了家！

篇2

與己尾隨 去承載背影

有沒有一種深凝的眼神

會劃破天空

讓她辛酸

有沒有一種深刻的情感

劃過記憶

又仿佛成了生活

愛 離去了

卻 感覺還在

那是 因為內心不停顫動

永恒吧！ 你走去的遠方……

那將會是靈魂空間的生還

已習慣 心里掛念著你

已習慣 無時無刻心疼著你

已習慣撫摸著你的頭 叫你小乖乖……

曾經 每一次用力的牽你

都是對你深深的愛

今夕

每一次想你的時候

心都 依然 那么用力

憂傷?。。。?/p>

要丟棄 一個熟悉的世界

永恒吧

顫動的靈魂在深深的思索

走入另一個世界

就如愛你一般

去撫摸

那些貧窮和需要關愛的人們

篇3

具體分別為：

1、百變歌姬：濱崎步；

2、傳奇歌姬：安室奈美惠；

3、性感歌姬：幸田來未；

4、國民歌姬：島谷瞳；

5、魅惑歌姬：鈴木亞美；

6、全才歌姬：大冢愛；

7、治愈歌姬：持田香織；

8、清新歌姬：奧村初音；

篇4

我狠狠地瞪了他一眼，可這家伙視而不見，依然坐在那看電視模特大賽。這個節目已經重播3遍了，可他還是盯著電視里的模特。

上個月，我的女上司因為老公長期不回家而離婚了，而女朋友的老公幾天前也被發現有外遇，難道做老婆的都是這么命苦，抵不過時間的摧殘？男人婚前婚后怎么差距這么大呢？看著花園里泛黃的枯草，我有一種悲涼的感覺。突然，兩只貓跑了過來，它們在草地上嬉戲，互相追趕親昵，其中一只貓還伸著懶腰，打個滾。它們在夕陽下的幸福、快樂的神情，讓人覺得十分溫暖。而我，跟老公有多久都沒有像這兩只貓一樣快活地擁抱了？即使功課，也是例行公事。對，我現在必須把老公漠視的念頭消滅在萌芽之中，我的家庭絕不能發生情感悲劇。

老公覺得我一定會跟往常一樣，只要一生氣睡覺時就會給他一個冰冷的后背。他倒樂得我不去“騷擾”他，然后酣然大睡，讓我的火氣自消自滅。但那天，他一打開臥室門就發現自己錯了！出現在他面前的是一只妖嬈的“貓”，頭頂皮紋雙耳發帶，豹花低胸緊身內衣，半露白頸細胸，高臀低腰輕俯在床，充滿誘惑的眼神，一臉的嫵媚中還帶著絲絲嬌柔的鼻息。老公立刻驚呆了，瞬間眼神發亮，仿佛變成了一只饑渴的野貓。他弓身上床，有力量的身軀半擁半抱，給我一個體貼的依靠。他溫柔的手臂在我的蠻腰與嬌胸間游移，彈性的身體輕彈慢跳、前騰后躍、左閃右扭與我的美臀共同譜寫交響曲，仿佛夕陽下一只貓與另一只貓的親密糾纏。我們互相擁抱、按壓、輕咬，互相交付、給予融合……溫暖的被褥、彈性的大床和我貓一樣柔軟的身軀，與老公的激情和努力相得益彰。他貓咪一樣的輕喚更如漫天花香，讓我迷醉勢不可擋，最終一切在巔峰中落下帷幕。而我這只呢喃的小貓，也安靜地趴在老公的肩頭美美睡去。

第二天清晨，當我睜開眼睛，老公已經做好了早餐。他說，為了獎勵我這只“饞貓”，以后早餐都由他來做。其實，男人就這么簡單，回報總是來的現世及時，他滿心歡喜就會陽光燦爛。從這以后的日子，我時而用黑筆給熟睡的老公畫出貓一樣的胡子，時而偷偷在廚房里走著貓步吸附他的身體，時而如貓咪一樣蜷縮在沙發上用誘惑的眼神向老公索吻，當他焚身，然后我再如貓一樣地逃開……幾番逃離，最終被這只“公貓”勝利俘虜，抱在懷里，大戰盡酣。如果以前我跟老公的只是一種填飽肚子的喂養，而現在我們經常享用情調十足的盛宴。夜晚沒有陽光，燦爛的星星是引爆兩只貓激情最理想的武器。

又一個周末，電視里又在播放模特大賽的比賽實況。那些美女們高挑美貌，讓我看得都直流口水，我便喊正在廚房做飯的老公來看。他說，我正給自己家的“貓”備食，哪有時間看那些電視里的模特走貓步！我偷偷笑了，不懂救贖自己已褪色愛情的女人是傻子，有方法救贖暗淡時光的女人才是天使。女人一定要像花一樣努力綻放，即使老公的腳步已經挪移，但彌留的香氣總會讓他停下腳步更珍愛自己。

篇5

1

第一次看到她，她正在一個房間里舞蹈，舒緩的輕音樂，有些頹廢，有些孤單，還有些曖昧。房間里沒其他人，就她自己。干凈的木質地板，她穿著粉色的薄紗吊帶裙，光著腳，慢慢地搖擺著。她伸展著雙手，好像懷里抱著一個英俊的情人。房間里的風扇吹著她短短的裙擺，露出白色的底褲，撩撥得我渾身是汗。后來，她慢慢褪去了身上的薄紗，滑潤的肌膚，曼妙的身姿，在我的瞳孔里漸漸放大，仿佛自己也身置其中，與她一同起舞。我的手不由自主地觸碰到自己的身體，欲望正一點點從各個部位襲來。

而她，仿佛應和著我的節奏，停止了舞動，躺在白色的床單上開始扭動自己的身體。濃密的黑發鋪在偌大的床上，如一朵黑色的玫瑰，慢慢地盛開。她開始撫摩著自己的身體，就如我的手，帶著電，火辣辣地在皮膚上滾出花來。她的動作越來越大，伴隨著音樂的部分她的聲音也宛如一首婉轉千尋的歌，低落上揚著，直到身上有亮晶晶的汗珠滾下，然后緊繃扭動的雙腿終于伸展開來。這時，音樂終止，而我，也大汗淋漓，仿佛完成了一段奇妙的旅程。

躺在汗濕的地板上，她的影子鋪天蓋地而來。我昏昏沉沉睡著，一覺醒來，房間里已漆黑一片，夜，不知不覺中來臨。

我打開燈，懶散地找些方便面煮來吃?？粗爸?，由細微的一點到沸騰的一片，我又忍不住想到她。就在這時，我又聽到聲響，那種動靜應該不是一人，我顧不得面，又湊過去看。此時，她赤條條的身上正壓著一個肥壯的男人，男人的臀部在燈光下擺動，白得直晃眼，她的臉埋在白色的床單里，看不出任何表情。偌大的床仿佛大海里的一帆小舟，在男人的使勁顛簸里如遇到狂風暴雨般快要支離破碎的樣子。男人不顧她的感受，雙手亂抓，只顧著沖刺，她粉嫩的背上頓時出現紅紅的抓痕。很快，男人就坍塌在她的背上，如一條死魚滑下來。她下床，無事一般坐在電扇前，海藻般的長發揚起，而我這邊海浪又撲面而來。

這就是我的見聞，在我搬到這間房子的第三天，無意發現的一個小洞讓我看到了隔壁的一切。后來，我知道她叫嵐，那個男人在床上這樣叫她。

2

她不工作，整天呆在家里，幾乎足不出戶。吃的用的，男人差不多隔兩天就會買一些過來。男人一般都是傍晚的時候來，開著車，而車總是停在弄堂外。他也從不帶她出去，來了就鉆進門，直接爬上她的床。她從不看他，而他也仿佛特別熱衷于突然襲擊的方式。有時，他進來的時候，她正在睡覺，他也不說話，三下五去二，就直奔主題。她仿佛習慣了這樣的對待，木然地應對，被動地接受。

他們很少說話，他的聲音也大部分來源于床上，而她，在他離去后，洗手間里的水就嘩嘩響起。

我想，她一定不愛他，或者她只是他包的女人，或者她只是貪圖他的錢吧。

她的衣柜里有很多漂亮的衣服，只是他走后，她才穿在身上，然后在舒緩的音樂翩翩起舞。舞蹈很優美，仿佛她只在一個人的時候，腳步才如此輕快。在音樂里，她會再一次把自己舒展來，一個人陶醉在自我的世界。

我不上班， 把觀察她作為我生活的一部分。我有時感覺自己有些下作，曾試圖堵上耳朵，把那個洞緊緊地粘住，但她的影子仿佛被敲進了腦海，隔壁有一點聲響，我就迫不及待把耳朵貼上去，然后把那個洞重新撬開。

夏天的日子，悶熱。我的心開始浮躁，心情一天比一天糟糕。每當看到那個男人壓在她的身上，我就有沖進去把他拉起來狠扁一頓的沖動。而她，也多次出現在我的夢里，琴瑟合鳴。醒來，悶熱的空氣席卷而來，心里莫名升騰起怒火，灼燒著我的身體。

我被她莫名的吸引，那種感覺是從未有過的。我想，她需要拯救，不論是身體還是心靈。突然某一天，我覺得自己有了一種使命感，不知是欲望作祟還是男人的英雄主義，讓我蠢蠢欲動。

3

就在那天晚上，天氣尤其悶熱，仿佛要下大雨似的。那個男人已經一個星期沒來了，我躺在床上翻來覆去睡不著。

我又撬開那個洞，她的房間還是那樣的音樂，她趴在床上睡著，風扇吹起她細薄的裙子，讓我在房間里走來走去。最終，理智開了小差，我跑出門去。外面很黑，沒什么人。我推下她房間的門，竟然開了。我小心翼翼地走進去，輕輕關上門。站在她床邊的時候，她還沒反應?？粗瓭L的裙子下面她光潔的皮膚，我不顧一切地爬上了床。她依然趴著，面掩在床單里。我把男人的行為熟稔于心，學著男人的樣子，不敢面對真實的臉。匆匆完事后，我又學著男人的樣子離開。

回到隔壁，我覺得自己很不男人，說是拯救，而我最終做了竊玉偷香的人。透過那個洞，我看到她抱著雙膝在流淚，眼淚順著潔白的面頰往下滑，流在白色的床單上，如外面下起的雨。這讓我更加感到自己的可恥。

我不知道她是否感覺到是另外一個人走進了她的房間，我不能面對她。我把那個洞重新填了起來，我想自己應該找個工作，或者我應該離開這個地方。

隔了天，隔壁的動靜又來了。這次，和往常不一樣，我忍不住看去，男人正在打她，打過之后又抱著她說愛她，她沒什么表情，依然淡淡的樣子。我突然想到自己，自己不是也做著同樣欺凌的行為？

男人走后的那天晚上，我又走進了她的房間。親吻她的時候，她突然扭過頭來。我忙亂不知所以，而她淡淡地問我，上次是你吧。我不知道該如何回答，我撫摩著她被打青的眼角，說，為什么不反抗呢？她湊上來，吻住了我。

我想，她是渴望愛的，她抱著我的時候，我第一次感覺到她的無助和需要。她不問我從哪里來，也不問我為什么來，只是狠狠地抱緊我。

后來，我告訴她那個洞，她沒說話。我叫她嵐，她說還是我叫樂吧，音樂的樂。

我說，我喜歡看你跳舞，舞姿特別美。她說，好多年不跳，生疏了。

我抱著她旋轉，隨著音樂，我仿佛跳進了天堂。她第一次笑了，很美，也很憂傷。

自此，只要男人不在，就是我們約會的時間。一次，我說，跟我走吧。她點點頭，又搖搖頭，沒有說話。

4

還沒等我弄明白她點頭搖頭的意思，小婭就挺著大肚子尋來了。

小婭說，劉天明，孩子是你的，你要負責。

我不知道該如何對小婭解釋，不是我不負責，而是我過不了她需要的日子。我只是她爸爸手下的一個小職員，她的喜歡讓我感覺到負擔，我覺得我們不是同類人。

面對她的示好，我只能逃避，并裝出一付玩世不恭的模樣來。我說，玩玩可以，但不要試圖改變我。我以為她會對我失望，然后落荒而逃，沒想到，她說，好啊，我們玩玩吧。

只一次，就玩出了火，小婭說她懷孕了。而我，只能悄然離開公司，選擇蒸發。沒想到，還是被逮個正著。

和小婭在門口糾纏的時候，樂開了門。看到我們，又關上門。

我對小婭說，讓我想想吧。小婭走了，回頭的時候狠狠地說，劉天明，孩子是你的，你逃到哪里我都能把你找出來。

我把自己鎖在房間里整整一天。再見樂的時候，她說，其實愛一個人要用很低很低的姿態，別因為自己的自卑傷害了愛你的人。

我說，樂，我們走吧，我們才是同類人。

她大笑著說，其實我只是和你玩玩，為了打發寂寞。你倒認真了？

你愛他嗎？他打你，連在床上都不看你的臉，你覺得他愛你嗎？我問。

愛。她堅定地說。不管他怎么對我，我都愛他。他不看我，叫我另外的名字，那是他走不出對妻子的愧疚，他妻子叫嵐。我愛他，所以寧愿做他的替補。另外，他能給我豐衣足食的生活，你能嗎？

我看著她，仿佛看到了不認識的人，我想，我是看錯她了，她只不過找我做他身體的替補，而我卻荒唐地認為我能拯救她。說到底，我們只不過是彼此逃避現實的結果，欲望的補充罷了。

三天后，我隨小婭離開了那個地方。我想，至少，小婭是愛我的，更何況，我需要對孩子負責。

那天，她的門一直沒開。

5

我和小婭隆重舉行了婚禮。幾個月后，孩子出生，我想我的生活也就這樣平穩安逸地過下去了。

不久，一個偶然的機會，讓我知道小婭懷的孩子并不是我的，那所謂的親近和喜歡只是為了她的肚子和名譽，而我莫名其妙做了頂缸爸爸。

我沒有聲張，時間教會了我隱忍，我也不再相信什么愛情。我更加努力地工作，出色的表現，我成了小婭爸爸公司最年輕的經理。

三年后，我和小婭平靜分手，并開了新公司。

一次偶然的機會，在一個洽談會后的晚宴上，我碰到了那個男人。他的臂彎里，挽著一個精致的女孩，不是她。

篇6

其實很久以來，很多的網球迷已經習慣甚至愛上了李娜這種直爽、有一說一的性格，然而這樣一番話還是在中國大陸網絡上激起了一番爭吵。但細細想來，李娜的話并沒有什么問題，因為她正在以個人身份參加職業巡回賽，而不是在代表國家隊參加奧運會或者聯合會杯的時候來說這些。就事論事，一個職業球員在參加一場商業運作賽事的時候這么說沒錯。而從網管中心單飛后李娜的身份就是一名職業球員，她這么說并不代表她不愛自己的國家。

近年來，越來越多的人提出“讓體育回歸體育本質”的呼聲，有意無意問把“為國家比賽”和“為個人比賽”而對立了起來，其實毫無必要。以李娜法網折桂來說，李娜站在了羅蘭加洛斯的球場上，一方面她為奪取第一個大滿貫，另一方面她中國人的身份也吸引了大量中國觀眾，李娜的奪冠也讓他們感到高興和自豪?！白岓w育的歸體育”，的確是個美好的愿望，因為它確實能做到的更多，撫平戰爭的創傷、團結國家精神……

體育雖然不能回歸到純粹的體育，但也不應該承受更多的體育以外的東西。中國體育長期以來就代表國家、代表人民，無形中給了運動員莫名的壓力。1997年金州“十強賽”，為了國家、為了人民沖擊世界杯，限制隊員日常外出，最終場上隊員心理壓力過大，技術動作變形。最近的例子就是2010年冬奧會，周洋奪冠后沒有“感謝國家”就遭到了體育總局領導的批評。當場上的運動員想的不僅僅是比賽，還有其他雜七雜八的東西，自然很難保證為了國家、為了人民爭取些什么榮譽?

篇7

四口人三個姓，“天后”之家幸福滿懷

記者（以下簡稱記）：日前你在《中國好聲音》錄制現場接受央視采訪，首度開腔感謝老公：“孟桐是個可愛的男人，很有責任和擔當……”能否多透露一些孟桐的情況？

那英（以下簡稱那）：他是土生土長的北京人，父母都是高級知識分子。他16歲赴德國留學，1995年取得德國慕尼黑大學MBA學位后回國創業，現在北京朝陽區工人體育館附近經營酒吧。孟桐身高1.85米，是京城企業家網球俱樂部的主力隊員。因常年健身，他身材結實勻稱，有款有型，是公認的帥哥。我的好姐妹王菲、趙薇經常跟我開玩笑：“你得將孟桐看緊點，別被年輕美女搶走了?！蔽艺f孟桐是拒腐防變的免檢產品，我信得過。

記：你是享譽海內外的歌壇天后，事業、收入都遠非孟桐所能比，他是怎么將你套牢的？

英：認識他時，我已不是花季女孩，而是一個拖著兒子的女人，再組建家庭，更注重對方性格如何，是不是能真正接受孩子。2005年秋，我與孟桐確定戀愛關系，他鄭重地與我兒子高興談了一次話：“你愛媽媽，我也愛你媽媽。咱們一起生活后，就又多了一個愛你媽媽的人。叔叔不敢說別的大話，但可以承諾，咱們成為一家人后，我會像對親生兒子一樣對待你。你和媽媽就是我的兩只眼睛?！苯又?，孟桐領著我們母子參觀他準備的婚房。細心的他專門騰出一間房子，為高興布置了一個兒童樂園。里面有旋轉木馬、搖搖車、帶滑梯的兒童床……高興爬上旋轉木馬就不肯下來。還有什么比一個男人接受我的兒子更讓我放心的？孟桐的父愛魔法徹底降服了我。2006年11月，我毫不猶豫地與他舉行了婚禮。

2007年1月，我和孟桐有了自己的女兒蘋果。很長一段時間，我心生顧慮：孟桐現在有了自己的女兒，他還會像從前一樣愛高興嗎？隨著一雙兒女一天天長大，我的顧慮也打消了，孟桐依然視高興如己出：高興黏我，晚上他讓高興枕著他的胳膊睡覺；高興不愛吃水果蔬菜，孟桐就將西瓜、獼猴桃、西紅柿、黃瓜等榨成水果蔬菜汁，結果高興喝得津津有味。有時我們一家四口出門，他會親手給高興洗頭發、擦小皮鞋。要是高峰忙，一個月沒過來看兒子，孟桐就會開車將高興送到那邊，讓他們父子團聚。我覺得很少有男人能做到這種地步，用我們沈陽的話說，孟桐是百分百“純爺們兒”！

記：你是漂亮媽媽，又是快樂妻子，這些年是不是一路從幸福中走過來的？

那：坦白地講，是這樣。女兒出生后，我退隱歌壇回歸家庭，安逸地做家庭主婦，干家務，帶孩子，很多朋友對我說：“老那，你家四口人三個姓，關系比較復雜，你能這么幸福，讓人羨慕。”這話我愛聽。不瞞你說，我喜歡這種平凡的居家生活。只是這種幸福后來被孟桐打破了。

自卑催生富豪夢，恩愛夫妻摩擦頻起

記：他怎么會打破你的幸福？

那：一次，我與幾位圈內朋友聚會，我們都各自帶著伴侶。孫悅、王艷、趙薇等女星的丈夫都是商人，一個個都是億萬富豪級別的風云人物，有的資產甚至達到數十億。孟桐的身價根本沒法和他們比，充其量只是個普通商人。大家圍坐在一起品紅酒，這些商界精英驕傲地講述收購煤礦、競標地皮、開發海島等話題，孟桐一句話也插不上。女人在一起比妝容，男人聚在一起比財富。無形中，孟桐覺得矮人一截，有了自卑。人一旦心態出問題，就會引起連鎖反應，孟桐此后再也不愿跟我一起出現在公共場合，內心深處覺得與我不對等。我大大咧咧，哪里猜得透他的心思？每次從外面回來，我都會嘰嘰喳喳說起誰家在美國投資了別墅，誰家購買了豪華游艇，誰家又添置了房車……絲毫沒有意識到對孟桐的刺激。

不久，我簽約的公司為我推出一張新專輯，需要我投資200萬元。因為我的絕大部分資產都在房產、股票上，投資朋友公司的錢又不到回籠的時候，便向孟桐求援。孟桐為難地告訴我：“酒吧剛交了一年租金，又重新裝修了一遍，賬面上資金斷流?！闭煞蚴莻€講游戲規則的商人，別的酒吧每瓶啤酒賣到100元，他只賣20元，因此酒吧利潤一直很薄，要讓他拿出這筆錢確實勉為其難。我不想讓他有壓力，笑著安慰他：“反正我已經推出了24張專輯，也不在乎這一張，那就往后推一推?！闭l知這竟成了孟桐的心結。

此后，孟桐決心改變現狀，不僅增開了三家酒吧，還想方設法跨領域發展，爭取早日跨入億萬富豪行列。原本淡定內斂的他成了一個不折不扣的外交家，頻頻與同學、朋友、同學的同學、朋友的朋友聚會，與對方談項目、談合作，尋求商機。他每天早上8點出門，常常要到夜里11點才回家。他手機里儲存了1000多個電話號碼，哪怕與對方只有一面之緣，只要有可能達成合作意向，他也會主動聯系對方。為了表示誠意，酒量不大的他常常喝醉……他心事越來越重，臉上的笑容越來越少，家庭氛圍變得壓抑沉重。漸漸地，我感覺幸福離我越來越遠。

記：那你是怎么做的，跟他有溝通嗎？

那：我清楚他的心事，經常有意無意地對他說：“衡量一個男人成功與否的標準，不是光看他名下擁有多少財富，還有其他許多指標。在我和一雙兒女心目中，你就是100分?！泵贤╋@然不同意我的觀點，說：“男人身上背負的東西太多，沒有財富，何談成功？”溝通不暢，我很糾結。2011年5月，蘋果上幼兒園了，我開始復出歌壇。

這本是很正常的事，沒想到外界輿論頓起，說我復出有內因，說孟桐是個開夜店的小老板，無力養家，只得將40多歲的老婆推出來掙銀子。我在娛樂圈闖蕩了20多年，見慣了空穴來風的炒作，孟桐卻無法放下。在“開礦熱”的影響下，他幾乎走火入魔：頻繁拜訪山西、內蒙古的煤老板，跋山涉水尋找礦源；他吃飯、睡覺、走路時，腦袋里想的都是如何晉級億萬富豪。他這種狀態很不正常，我心直口快，一不順心就數落他，因此我們經常有摩擦。

記：他想拓展事業，向你靠攏，心情可以理解，但做起來肯定不易，他的投資有收獲嗎？

那：隔行如隔山，跨領域發展哪有那么容易？孟桐瞞著我從銀行貸款600萬元，與朋友合伙在內蒙古鄂爾多斯投資一處煤礦。他這樣設計未來：當年收回全部投資，過兩年利潤會超過1個億。由于心情迫切，他和朋友來不及請權威專家評估論證，項目匆忙上馬。他在內蒙古足足待了一個多月，親自督促煤礦開采。然而，工人在地下掘進了400米后，發現不僅煤層薄，而且煤質差。再開采下去只能越陷越深，甚至血本無歸。在虧損400多萬元后，孟桐痛苦地返回了北京。

我卻蒙在鼓里。孟桐回家后，蘋果抱著布娃娃跑到他身邊，奶聲奶氣地說：“爸爸，你看一個布娃娃多孤單，你再給我買一個給她做伴吧！”孟桐不耐煩地擺擺手：“一邊玩去，讓爸爸安靜一會兒。”以前孟桐不是這樣的，幾天不見女兒，再見面時就親得不行，他這是怎么了？難道開礦不順利？我的氣瞬間上來了，說：“你心情不好，別拿女兒撒氣呀！”孟桐長嘆一聲，拎著包去了酒吧。

晚上孟桐洗澡時，朋友打來電話，孟桐讓我幫他接，我這才從對方嘴里套出他們投資失敗的實情。我的火爆脾氣上來了，把衛生間的門擂得山響，對孟桐嚷嚷：“貸款這么大的事，為什么不和我商量？日子還過不過？你心里還有沒有這個家？”衛生間里嘩嘩的水聲突然停止了，他推開門出來的那一刻，我看見他眼里滿是淚水。剎那間我氣消了，心軟了，心里別有一番滋味。

甘做丈夫小女人，新門當戶對收獲幸福婚姻

記：看得出來孟桐也很痛苦，400萬元銀行貸款最終是怎么還上的？

那：我沒想到男人也有脆弱的一面，孟桐難過地講述了自己娶了個“天后”妻子，外界輿論給他帶來的壓力和煩惱。不少媒體經常拿他和我做比較，拿他和別的女明星的丈夫做比較，說我和他結婚是“下嫁”，說他有“吃軟飯”之嫌。孟桐是個自尊心很強的人，越來越覺得配不上我，所以他迫切想改變命運，成為令人景仰的億萬富豪。說到動情處，他幾度落淚。隨著他的傾訴，我心頭的糾結一點點變成了疼惜和理解，沒想到丈夫背負著那么大的壓力。以前我經常在他面前說，誰誰誰的丈夫事業如何成功，誰家的物質生活如何豐裕，每一句話都是對丈夫自尊的刺激與傷害??！是我忽視了他的感受。

我推心置腹與孟桐交心：“我不是貪圖享受的女人，當初與你走到一起，看中的就是你這個人。夫妻一方比另一方的事業優秀，不應該成為對方的包袱，而應該是他（她）的榮耀。倆人過日子，不是作秀表演，不是過給別人看的。這些年我覺得自己還算個幸福女人，希望你好好想想我的話，天大的事，我都愿意和你一起面對?！?/p>

半個月后，我將名下股票“割肉”賣出，又向公司預支了一部分演出費，湊了400萬元，與孟桐一起還清了銀行貸款。孟桐黯然對我說：“這可真應了外界的輿論，孟桐靠老婆養活，不像個男人。”我擂了他一拳，笑道：“老孟，我覺得你有些敏感了，夫妻是世界上最親近的人。你遇到了困難，我要是袖手旁觀，那還叫什么夫妻？別人說我是‘天后’，那只是在舞臺上，在這個家里我就是你老婆，是孩子的媽?！泵贤┠樕嫌辛诵θ?，我知道他的心結解開了。

記：你們患難與共的這份夫妻情，令人感動。接下來你們相處的方式是否也有所改變？

那：是的?；橐鍪欠蚱揠p方不斷成熟成長的過程，也是彼此修行的過程。多年的婚姻生活讓我懂得，女人最大的美麗是溫柔體貼，是適度示弱。我覺得，像我與孟桐這種夫妻組合，我應該做的是還他男人的尊嚴，提升他的自信和勇氣。2012年5月，我將自己名下的股票、基金、別墅、轎車全變更到了孟桐名下。辦完一切手續，我和他開玩笑：“現在我可是個窮光蛋了，你不能拋棄我?！泵贤┥瞪狄恍?，算是回答。

朋友們得知后卻紛紛勸我：“你把身家性命都交出去，太傻了。你得替自己留一手呀！”我手一擺：“我了解孟桐，他善良樸實，不是貪財重利的人。我們會相守一輩子，財產放在誰名下都一樣。”在家里我也甘做丈夫背后的小女人。為增加夫妻間的親昵程度，我辭退了一個保姆，將那份家務獨攬過來。我親自給丈夫熨衣服、擦皮鞋，手拿抹布跪在地上擦地板；每頓飯，我都要燒一個丈夫最愛吃的菜。每天早晨孟桐出門時，我牽著女兒，跟在丈夫后面問這問那：“車鑰匙帶了嗎？錢包、手機都在包里嗎？中午要是沒有應酬，就回來吃飯好嗎？”

每次在外面碰到熟人朋友，別人不叫孟桐的名字，而是稱他“那英的老公”，我會糾正：“他的名字叫孟桐，我是他老婆。”接著便挽著他的胳膊賣萌：“我們家老孟不僅長得帥，而且動手能力強，上帝對我太優待了，讓我撈了一個這么好的老公。”遇到孟桐安排酒吧全體員工聚餐，我會抽時間趕過去為丈夫捧場。點點滴滴，重塑了孟桐的自信和勇氣，那個堅強、陽剛的孟桐又回來了。他恍然大悟般對我說：“老婆，我現在終于明白了，夫妻本來就是不可分割的整體。丈夫或妻子無論誰更優秀，都是另一方的驕傲。擁有你，是我這輩子獲得的最大財富。”那一刻我潸然落淚……

記：以你的經歷，應該對婚姻中“門當戶對”有另一番理解吧？

那：2012年7月，浙江衛視的《中國好聲音》欄目邀請我擔任導師。這是一個全新的音樂挑戰欄目，好多歌手不敢接受，我骨子里的好強被激發出來了。錄制完兩期節目后，我漸漸愛上了這個欄目，經常半個月不能回家。說實話，一個女人在外地挺想家的，孟桐經常帶著一雙兒女趕過來與我團聚。他們三人也成了我的親友團，拿著熒光棒在臺下為我喝彩。錄制完畢，孟桐牽著一雙兒女走上臺，一一與我擁抱，并向我獻花。一雙兒女則搶著向我匯報，蘋果奶聲奶氣地說：“媽媽，哥哥愛吃冰糖葫蘆，他吃完了，我就將自己那一串分給他?！备吲d爭著說：“媽媽，我照顧妹妹了，爸爸帶我們出去吃飯，我為妹妹開車門，把她從車里牽出來?！币郧斑@對小冤家打打鬧鬧，經?？薇亲?，是孟桐教會了他們兄妹相愛。我看了孟桐一眼說：“其實你也是孩子們的導師。真心真意謝謝你！”丈夫冷不丁在我額頭上親了一下?；馃嵊H情與事業的快樂在我胸中飛舞，我覺得自己真是個幸福的女人。

篇8

關鍵詞：乙酰肝素酶；小片段干擾RNA；亞砷酸；胰腺癌，侵襲力

中圖分類號：R285.5文獻標識碼：A文章編號：1673-7717(2011)12-2657-05

Research on Heparanase siRNA Combined with Arsenous Acid

Inhibiting Invasion of Pancreatic Cancer Cells in Vitro

ZHENG Jiaping1,2,YANG JianMin3,Ru QingJing1

(1.Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine,Hanghzou 310053,Zhejiang,China;

2.Zhejiang Tumor Hospital,Hangzhou 310022,Zhejiang,China;

3.Zhejiang People's Hospital,Hangzhou 310014,Zhejiang,China)

Abstract:Objective：To observe invasion inhibiting effect of Hpa small-interfering RNA (siRNA) combined with arsenous acid on pancreatic cancer cells, so as to provide the theoretical foundation for further clinical use in the cancer treatment. Methods：Target gene (Hpa1-siRNA，Hpa2-siRNA，Hpa3-siRNA) fragments were diluted, annealed and connected with linear plasmid expression vector pGenesil-1.1, then pGenesil1.1/Hpa1-siRNA, pGenesil1.1/Hpa2-siRNA and pGenesil1. 1/Hpa3-siRNA were reconstructed. The Hpa-siRNA was transfected into SW1990 pancreatic cancer cell by DOTAP Liposomes meanwhile the empty control and negative control group were designed. Those target genes were respectively transfected into Hpa-mRNA and Hpa protein expression was detected by RT-PCR and Western blot respectively. Transwell cab model was employed to test the ability of SW1990 cell. Results： Expression of Hpa-mRNA and Hpa-protein in SW1990 were obviously suppressed by Hpa1-siRNA, Hpa2-siRNA, and Hpa3-siRNA, and efficacy in Hpa2-siRNA better than in Hpa1-siRNA and Hpa3-siRNA（P

Key words:Hparinase; small interfering RNA; arsenous acid; pancreatic cancer；invasive ability

________________________________________

收稿日期：2011-07-19

基金項目：浙江省研究生創新科研資助項目(YK2008071)

作者簡介：鄭家平（1972-），男，浙江杭州人，博士研究生，研究方向：中西醫結合防治腫瘤。胰腺癌的發病率占惡性腫瘤的1%~5%，近年來在世界范圍內有明顯增多的趨勢，傳統的治療手段是手術切除為主，聯合放療和化學藥物治療。其五年生存率低于5%，超過90%患者在確診后1年內死亡，平均存活期少于6月\[1\]。胰腺癌高度侵襲、轉移的生物學特性是其預后不良的關鍵。因此，積極探索和闡明胰腺癌侵襲轉移的分子機制，尋求有效抗侵襲、抗轉移的治療措施對改善預后具有重要意義。最近研究表明，Hpa高表達可促進胰腺癌的增殖、侵襲和轉移，直接影響胰腺癌患者預后和生存時間\[2-6\]。

因此，Hpa基因有望成為胰腺癌生物治療的新靶點。另外，一些研究發現\[7-12\]，亞砷酸對多種惡性腫瘤的侵襲和轉移性尚具有明顯抑制作用。因此我們觀察Hpa-siRNA聯合亞砷酸對胰腺癌侵襲聯合抑制效果。從而為將來亞砷酸聯合Hpa-siRNA治療胰腺癌患者提供理論基礎和實驗依據。

1 材料和方法

1.1 材料

pGenesil-1.1質粒和大腸桿菌DH5α菌株由武漢晶賽生物有限公司構建和制備。胰腺癌SW1990細胞株購自中國科學院上海細胞庫。亞砷酸凍干粉（10mg/支）由北京雙鷺藥業股份有限公司饋贈。Hpa基因序列自行設計，序列為：Hpa-F 5'- GAAAGACGGCTAAGATGC -3' Hpa-R5'- AAATGGTAGTTTCCTGCTC -3' 擴增片段大小為361bp。GAPDH452內參引物為：序列為GAPDH452-F 5'- ACCACAGTCCATGCCATCAC-3' GAPDH452-R 5'- TCCACCACCCTGTTGCTGTA-3' 擴增片段大小為452bp。紫外分光光度計（SHIMADZU），DNA Marker、Eco31I內切酶、SacI內切酶和T4DNA Ligase鏈接酶(TaKaRa)， 質粒小抽試劑盒（北京博大泰恒生物技術有限公司），水平電泳儀 DYY-III（北京六一儀器廠），膠回收試劑盒（北京博大泰恒生物技術有限公司），動物RNAout（天澤基因工程有限公司產品），ReverTra Ace-α-TM-RT-PCR Kit （東洋紡上海生物科技有限公司），PCR引物（武漢博潔公司），PCR system 2700(美國AB公司GenAmp)，Taq DNA 聚合酶（MBI 公司），HRP標記的羊抗兔IgG和 Rabbit anti-Hpa抗體（武漢三鷹），Rabbit anti-GAPDH多克隆抗體（武漢晶賽），PVDF膜（Life Science, USA），SuperSignal化學發光試劑（Pierce, USA），Transwell小室(CORNING)。

[WT5”FZ〗中華中醫藥 學刊

1.2 方法

1.2.1 目的基因設計、合成、與質粒連接、酶切 通過Pubmed網站搜索目的基因人肝素酶mRNA序列，并確定基因號為NM_001098540（1779 bp）或NM_006665（1810 bp）為本實驗的目的基因。委托武漢晶賽生物有限公司設計挑選3條靶序列和干擾序列dsDNA模板引物，分別命名為Hpa1、Hpa2、Hpa3，引物結構：CACC+Sense+Loop+Antisense+終止信號+SacI。用30μL annealing buffer 溶解上述合成1OD Hpa1/Hpa2/Hpa3單鏈目的基因片段。取2μL（即2μL Hpa1/Hpa2/Hpa3A +2μL Hpa1/Hpa2/Hpa3-B）+16μL annealing buffer混勻。94℃水浴退火自然冷卻至室溫。取1μL退火產物+99μL H2O做100倍稀釋。將稀釋退火片段分別與線性化載體pGenesil-1.1的連接，分別命名為pGenesil-1.1/Hpa1-siRNA、pGenesil-1.1/Hpa2-siRNA、pGenesil-1.1/Hpa3-siRNA。各取5μL過夜連接產物轉化感受態細胞DH5α，分別涂布于含卡那霉素抗性（終濃度為30μg/mL）的LB平板上，37℃恒溫箱培養過夜。從每個培養皿上各挑取單克隆菌落接種于3mL含卡那霉素抗性（終濃度為30μg/mL）的LB培養液中，37℃恒溫搖床（250r/min）培養過夜。用小提試劑盒小量提取質粒，并分別用SacI做酶切鑒定。

1.2.2 RT-PCR檢測Hpa-mRNA表達 將NC（空白質粒組）、Hpa1-siRNA、Hpa2-siRNA、Hpa3-siRNA質粒載體、HK（無特異性Hpa-siRNA質粒陰性對照組）采用DOTAP脂質體法轉染SW1990胰腺癌細胞48h。取轉染后繼續培養48 h的S W1990細胞，以TRIzol法提取總RNA，按逆轉錄試劑盒說明書步驟進行實驗。cDNA反應系統見表1～2，第一步反應條件：75℃ 5min，短暫離心后置于冰上。第二步反應條件：42℃ 60min, 95℃ 5min。將合成好的cDNA 第一鏈放置-20℃保存。取上述合成cDNA 第一鏈為模板，進行PCR擴增獲得361bp的Hpa基因片段，反應體系見表3。將上述反應體系置PCR擴增儀上 95℃變性5min，然后開始PCR循環：95℃ 25s50.0℃ 25s72℃ 22s，共35個循環，72℃延長3min，4℃保存。DNA電泳觀察鑒定：取200μL PCR產物在2%瓊脂糖凝膠中電泳，用DL2000 Marker作DNA分子量標準帶，溴乙錠染色，紫外透射儀上觀察并照相。如出現361bp 的電泳帶，則為Hpa

2.4 亞砷酸聯合Hpa-siRNA對SW1990胰腺癌細胞侵襲力的影響

見表5，見插頁Ⅴ圖6。

隨著亞砷酸濃度從0.5，1.0，2.0mg/mL的遞增，侵襲抑制率升高，分別為：7.78%、46.8%、76.8%，差異有統計學意義（χ2=71.633，P

胰腺癌高度侵襲、轉移的生物學特性是其預后不良的關鍵。因此，積極探索和闡明胰腺癌侵襲轉移的分子機制，尋求有效的抗侵襲、抗轉移治療措施對改善預后具有重要意義。最近研究表明，Hpa高表達可促進胰腺癌的增殖、侵襲和轉移，對胰腺癌患者預后和生存時間有重要的影響\[2-6\]。因此，Hpa基因有望成為胰腺癌生物治療的新靶點。我們的研究擬通過RNA干擾(RNA interference, RNAi)技術沉默Hpa基因，觀察對胰腺癌侵襲性的影響。

RNA干擾(RNA interference, RNAi)是指外源雙鏈RNA ( double-stranded RNA, dsRNA)導入細胞后，能特異性的誘導同源互補的mRNA降解，導致轉錄后水平基因表達沉默現象。RNAi作為一種沉默基因表達的新技術，能特異、有效的抑制靶基因的表達，已被廣泛的應用于基因功能研究、病毒感染和腫瘤的基因治療等領域。針對腫瘤發生發展過程中起關鍵作用的癌基因、抑癌基因、凋亡相關基因、生長因子、受體表達基因以及侵襲轉移相關基因等，利用RNAi沉默靶基因的表達，可以抑制腫瘤細胞的增殖、誘導凋亡、增加藥物敏感性、抑制血管生成、侵襲、轉移等作用，為腫瘤治療開辟了新的途徑。小干擾RNA ( small-interfering RNA, siRNA)作為RNAi效應分子，是RNAi作用的主要介質。它呈發夾狀結構，是一段長度約為21-23核苷酸的小雙鏈RNA，經核酸酶降解mRNA而阻斷其編碼蛋白質的表達，即通過RNAi實現基因沉默\[7\]。

到目前為止，尚不清楚利用RNAi技術是否靶向沉默Hpa表達進而抑制胰腺癌侵襲性。因此，我們進行探索性研究，首先我們自行設計合成Hp-siRNA，利用質粒pGenesil-1.1作為載體有效轉染SW1990胰腺癌細胞，進一步檢測轉染pGenesil-1.1-Hpa-siRNA質粒后SW1990胰腺癌細胞的Hpa蛋白和mRNA的表達，結果表明轉染pGenesil-1.1-Hpa-siRNA質粒表達載體（含Hpa1，Hpa2，Hpa3三條干擾序列）的SW1990胰腺癌細胞蛋白和mRNA表達明顯降低，其中Hpa2抑制效果優于Hpa1，Hpa3，具有統計學差異，P＜0.05。NC和HK組Hpa-mRNA和蛋白的表達無明顯變化。因此，我們研究認為，Hpa2可靶向沉默Hpa基因的表達，且是特異性最高的Hpa-siRNA。另外，我們的研究結果提示Hpa基因還沒有達到完全沉默，可能是由于Hpa-siRNA只能抑制Hpa基因表達，而不是敲除該基因。因此單純siRNA療效有限，需要聯合其他有效的治療手段。

三氧化二砷 ( Arsenic trioxide,As2O3 ) 俗稱砒霜，人類用它治療疾病已有 2400 年的歷史。我國著名血液學專家陳竺等將三氧化二砷用于急性早幼粒細胞白血病的治療,研究發現其通過誘導白血病細胞分化和凋亡從而發揮抗腫瘤作用\[8\],開創了惡性腫瘤治療的新紀元。

隨著人們對As2O3 的作用機理和適應證方面的衍生研究, 相繼發現其對多種實體瘤有抑制作用\[9\]，多項體外研究結果顯示可能的抑癌機制是通過多種途徑、多種機制如阻滯細胞周期、激活Caspase以及改變GA DD的表達，抑制 surviving、 bcl-2 基因表達，增加Fas、Fas-L表達抑制腫瘤細胞增殖促進腫瘤細胞凋亡，從而發揮其抗胰腺癌的作用\[10-15\]。

體內實驗進一步驗證三氧化二砷組移植瘤體積和質量均顯著低于模型組，三氧化二砷具有抑制人胰腺腫瘤形成和生長的作用，且具有劑量依賴性，聯合紫杉醇具有協同作用\[16-17\]。

近年來人們發現三氧化二砷有抑制軟組織肉瘤\[17\]、鼻咽癌\[18\]、膠質瘤\[19\]、宮頸癌\[20\]、肺癌\[21\]、胰腺癌\[22-23\]多種惡性腫瘤侵襲轉移作用，可能機制與抑制MAPK信號通路或者下調轉移相關基因如MMP-2、MMP-9、CD44、nm23的表達有關。另外人們還發現中藥三氧化二砷 ( Arsenic trioxide,As2O3 )通過多種機制、途徑抑制胰腺癌的侵襲力，因此我們嘗試將Hpa-siRNA技術結合三氧化二砷，探討兩者的協同作用。

我們通過不同濃度梯度的亞砷酸進行體外細胞試驗，結果表明，亞砷酸具有抑制胰腺癌侵襲力的作用，隨著亞砷酸濃度從0.5，1.0，2.0mg/mL的遞增，侵襲抑制率升高，分別為7.78%、46.8%及76.8%，差異有統計學意義（χ2=71.633，P

但是，上述實驗結果需要將來在體內實驗進一步驗證。另外尚有待于進一步研究揭示兩者協同放大作用的分子機制。

參考文獻

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篇9

關鍵詞 納洛酮 酒精中毒后意識障礙

doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2010.12.108

資料與方法

2006年1月～2008年12月收治急性酒精中毒后意識障礙患者20例,男17例,女3例;年齡20～46歲,平均33歲;血壓98～165/60～84mmHg,脈搏60～108次/分;飲白酒量0.1～1.5kg,病程1～8小時。20例患者均有不同程度意識障礙,輕度中毒19例,表現為嗜睡、煩躁、顏面潮紅、共濟失調;重度中毒1例,飲酒量約1.5kg,就診時表現為意識完全喪失、壓眶反射消失、腱反射消失、呼吸抑制、紫紺、血壓下降等。

治療方法:20例患者經臨床確診為急性酒精中毒后意識障礙,給予常規治療維生素B1,保護胃黏膜、保肝、維持水、電解質酸堿平衡,對癥等基礎上加用納洛酮治療。輕度中毒用納洛酮0.8～2mg,分2～3次,每次加入25%葡萄糖液20ml靜脈注射;重度中毒吸氧、氣管插管、用呋塞米、甘露醇基礎上加納洛酮2.8～5mg,分3～5次,每次加入25%葡萄糖液20ml靜脈注射。每2次間隔時間15～30分鐘。

結 果

20例患者神志完全恢復正常,用納洛酮至意識完全恢復時間為45分鐘～2小時,重者8小時內。20例患者住院治療1～5天,全部治愈出院,用藥過程中無1例出現不良反應。

討 論

急性酒精中毒是臨床常見的癥狀,主要成分是乙醇,飲用酒中含乙醇2%～60%。成年人飲用過量可致中毒,成人引起中毒的乙醇量個體差異大,一般為75～80ml。乙醇是中樞神經系統抑制劑,作用于大腦,抑制皮質功能,以后漸及延腦和脊髓,抑制血管運動中樞、麻痹呼吸中樞及心臟,使血管擴張,最后致呼吸和循環衰竭而死亡。所以短時間內使患者神志迅速恢復清醒很重要。

本組資料用納洛酮治療急性酒精中毒20例,患者神志均恢復正常,療效100%。納洛酮治療急性酒精中毒優于傳統常規治療,據文獻報道,腦內和外周組織中可產生內源性阿片樣物質,認為內源性阿片肽,特別是β-內啡肽的生理效應是導致休克、腦梗死、酒精中毒、安定中毒的病理生理環節。內啡肽還具有直接的細胞毒性作用,對感覺神經傳入通路及運動神經傳出通路均有抑制作用,并加重乙醇對網狀結構和大腦邊緣系統阻斷神經元之間的傳導,同時加重丘腦與大腦皮層之間沖動的交互傳導,導致病人意識障礙加深,所以盡快抑制阿片樣物質的作用是挽救患者生命的關鍵。納洛酮是內源性阿片樣物質的特意性拮抗劑,能逆轉β-內啡肽而起抑制作用并能解除β-內啡肽對中樞系統的抑制作用[1]。20例患者治療結果發現納洛酮在治療急性輕、重度酒精中毒過程中,能明顯縮短患者蘇醒時間快速降低血中毒物濃度水平,提示納洛酮是治療急性輕、重度酒精中毒的一種快速而可靠的良好藥物,而且不良反應少,20例病人未見有血壓升高及肺水腫等不良反應發生,并且治療劑量與高于治療劑量幾十倍的使用其發生不良反應的關系不明確。鑒于納洛酮半衰期短,血漿濃度衰減快,因此常需反復給藥,具體作用需根據其病情及其血漿半衰期(40～90分)決定以避免發生反跳現象[2]。

參考文獻

篇10

[關鍵詞]艾納香；廢渣；乙酸乙酯部位；佐劑型類風濕關節炎

類風濕性關節炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種慢性、進行性、以侵犯全身關節為主要特征的免疫性疾病，是一種常見的風濕性疾病。其發病率約為0.8%（0.3%～2.1%），女性發病率約是男性的3倍，家譜分析提示，患者具有遺傳素質，可能與HLAD和DW抗原等相關。 然而其病因尚不清楚[1]，其主要病理特點是：骨膜慢性炎癥、軟骨吸收、骨破壞和骨纖維化。多種炎癥因子和細胞因子與RA密切相關，迄今尚無療效確切的藥物。

艾納香是菊科植物艾納香Blumea balsamifera （L.） DC.新鮮或干燥地上部分[2]。全草含揮發油，主要成分為左旋龍腦[3]，現栽培于貴州、云南、廣西，是苗、壯族的重要藥物，具有祛風除濕、溫中止瀉、活血解毒、鎮痛發汗、祛痰止咳、通經止血等功效[4]。近年來國內外對艾納香的報道大多圍繞艾納香的溫中止血功效探討其婦科用藥的作用機制[5-6]，而艾納香祛風除濕功效對治療風濕關節炎方面的影響卻鮮有報道。但是民間驗方中卻屢次出現艾納香治療風濕關節炎的案例，且效果確切。

艾納香為制取艾片的重要原料，主產區通常采其鮮葉和嫩枝用傳統的土制水蒸氣蒸餾法提取“艾粉”（為艾納香制取冰片的粗級產品），再經提煉后可制得精制“艾片（天然左旋冰片）”。產地加工往往將提取“艾粉”后的葉子殘渣丟棄，影響了其資源的有效利用。相關試驗對艾納香葉制取揮發油后的廢渣進行了藥理活性研究，探討了其不同極性部位鎮痛抗炎止血活性的差異，試驗證明廢渣乙酸乙酯部位有較強的活性。本文根據之前的研究結果進一步闡明廢渣乙酸乙酯部位對類風濕關節炎的治療效果，并初步闡明其機制。

1 材料

1.1 藥物 艾納香干燥的葉，采自貴州羅甸。由南京中醫藥大學陳建偉教授鑒定為菊科植物艾納香B. balsamifera葉。經水蒸氣蒸餾法提取揮發油之后，收集葉的廢渣，烘干備用。

1.2 試劑 弗氏完全佐劑（FCA，美國Sigma公司）；吲哚美辛（美國Sigma公司）；50%，95%乙醇，乙酸乙酯均為分析純；ELISA試劑盒（南京建成生物工程研究所）。

1.3 動物 清潔級SD雄性大鼠，體重（180±5） g，揚州大學比較醫學中心，許可證號SUXR（蘇）2012-0004。

2 方法

2.1 供試液的制備 將1.1項下所收集的葉子廢渣以5倍量95%乙醇浸泡3 h，回流提取2 h，重復2次，再以50%乙醇回流提取1次；合并提取液濾液，以旋轉蒸發儀濃縮，依次以石油醚、乙酸乙酯萃取，濃縮干燥取其乙酸乙酯部位（BBE），得率為2.43%，以0.5%CMC-Na稀釋成濃度適宜的混懸液備用。

2.2 動物模型 適應性喂養7 d后，除空白組外大鼠用微量注射器于右后足跖皮內注射弗氏完全佐劑（FCA）0.1 mL，7 d后在尾根部皮下再次注射FCA 0.1 mL加強免疫。約14 d左右可誘發成功佐劑型關節炎模型[7]。

2.3 動物分組和給藥 36只大鼠適應性喂養7 d后，隨機分為6組，每組6只，根據成年人每日艾納香的用量（15～30 g）設計大鼠實驗用藥量，其中人使用的高劑量為大鼠實驗用量的中劑量，其中各劑量均未出現大鼠用藥死亡的現象?？瞻讓φ战M（0.5%CMC-Na 10 mL?kg-1）、模型對照組（0.5%CMC-Na 10 mL?kg-1）、陽性對照組（3 mg?kg-1吲哚美辛）及BBE高、中、低劑量（21.6，10.8，5.4 mg?kg-1）組，各組動物均于第2次注射FCA加強免疫后開始灌胃給藥，連續給藥28 d。

2.4 體重和足腫脹度 于第2次注射FCA加強免疫后開始，每7 d（即給藥當天，給藥后第7，14，21，28 天）對所有大鼠進行體重檢測，觀察其體重變化，同時以測量足周長法觀察其足腫脹情況。

2.5 關節炎指數 FCA所致多發性關節炎一般于注射FCA后10～14 d開始出現， 主要觀察各組大鼠4只足爪各關節的腫脹程度。于第2次注射FCA加強免疫后第3天開始，每4 d觀察并記錄各關節病變，按0～4分評分： 0分，正常；1分，關節稍紅腫；2分，關節輕度紅、腫、熱；3分，關節中度紅、腫、熱、輕度功能障礙；4分，關節重度紅、腫、熱、嚴重功能障礙，不能負重。每只大鼠4只足爪的最大積分為16分。

2.6 脾臟和胸腺指數 免疫28 d后，將各組大鼠都脫頸處死，取出脾臟和胸腺分別稱重。脾臟（胸腺）指數（mg?g-1）=脾臟（胸腺）質量/體重。

2.7 病理切片 將大鼠處死后剪下膝關節，置于10%甲醛（福爾馬林）中固定。經過2周的脫鈣，再進行包埋、切片、蘇木素和曙紅染色等一系列的處理后制成病理切片，顯微鏡下觀察其滑膜增生、炎癥、血翳形成、骨侵蝕等病理情況。

2.8 血液指標 免疫28 d，禁食一晚后對各組大鼠進行眼眶取血。血液樣本分為2組，一組取全血收集于含有EDTA的干凈試管中，進行血常規檢測；另一組去血清收集于不含有EDTA的試管中，用比色法測定血清中的超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）、一氧化氮（NO）、羥基自由基（OH?）、堿性磷酸酶（ALP）、谷草轉氨酶（AST）、谷丙轉氨酶（ALT）、β-氨基半乳糖（NAG）、唾液酸（SA）水平以及采用酶聯免疫吸附實驗（ELISA）測定血漿中白介素-1（IL-1）、白介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平。

2.9 數據分析 所有數據采用Excel 2013統計軟件進行統計分析，各組數據比較采用配對t檢驗，統計結果數據以±s表示，P

3 結果

3.1 體重和足腫脹度 空白組大鼠活潑，納食正常，體重穩步上漲。模型組大鼠納食減少，體重增長緩慢，致炎側足跖和踝關節腫脹明顯，在12 d前后出現腫脹高峰，部分大鼠在造模后期出現下肢活動受限。BBE治療組給藥后體型較模型組大，較活潑，未見明顯活動受限，但體重變化較模型組無顯著性差異，在治療第15天前后不同程度地明顯抑制了致炎足腫脹度，較模型組有顯著性差異。BBE高劑量組和吲哚美辛陽性藥組在12 d前后足腫脹度較模型組有顯著性差異，見圖1，2。

3.2 關節炎指數 造模的第12天之前，模型組、BBE組和吲哚美辛陽性藥組的關節炎指數之間差異無顯著性意義，且高于空白組。此后模型組的關節炎指數逐漸升高。BBE高、中劑量組藥后關節炎指數逐漸降低，與模型組比較差異有顯著性意義

4 討論

據報道炎癥介質像IL-1，IL-6，TNF-α等，在風濕病發病機制中扮演著很重要的角色，它們是由免疫細胞的浸潤和基質金屬蛋白酶（MMPs）的過度分泌所產生的。其中TNF-α尤為關鍵，它可以促進其他炎癥因子像IL-1，IL-6的分泌[8]。TNF-α和IL-1共同刺激纖維細胞過度表達IL-33，MMPs和趨化因子[9]，然而IL-1則表現出更多的對軟骨和骨關節侵蝕作用[10]，整個“超家族”中IL-1參與了整個破壞過程。這些過程又會導致組織基質的破壞和炎癥的浸潤。BBE對TNF-α和IL-1有顯著的抑制作用，從而緩解風濕關節炎的各種癥狀。這種免疫抑制作用可以通過抑制CD4+來下調促炎因子的過度分泌[11]。而TNF-α和IL-1的下調與NF-κB 和MAPKs通道有著密切關系，有待進一步研究。

活性氧（ROS）是由正常的細胞代謝所產生，在對抗感染的防御體系中起著重要的作用。但是在風濕病理條件下，激活的單核白細胞核巨噬細胞大量聚集從而導致活性氧在關節和臟器內過度表達，并對細胞膜產生直接損傷[12]。而這種細胞損傷又會引起相關酶的顯著增加，所釋放的溶酶體酶類對關節軟骨有著水解作用，水解產物，如SA的含量也會上調[13]。ROS還通過促進促炎細胞因子和MMPs的生產[14]對關節造成間接的損害。高濃度的NO阻礙了成骨細胞的生長和分化，這是由促炎因子對骨形成的抑制作用所引起的。BBE在體內呈現良好的抗氧化作用，表現在通過其治療后，下調了血清中NO，MDA，OH?的水平，同時通過上調SOD和GSH水平來修復體內抗氧化系統，從而保護滑膜不受侵蝕，關節及臟器細胞膜不被破壞。細胞酶，如ALP，AST和ALT的升高是器官指數和骨缺損的重要指標，受損傷細胞釋放的酶可以引起相關器官和骨的損傷。因此，BBE能夠下調這些酶的水平，表明它具有效的抗關節炎活性，并對內臟和骨有針對性的保護作用?？傊?，BBE組治療后可恢復體內緊張的氧化應激和過度增加的細胞酶，表明BBE具有抗氧化活性以及內臟和骨的保護作用。

通過上述試驗和相關的指標分析發現，艾納香葉廢渣的乙酸乙酯部位確實具有抗風濕的效果，這歸因于其乙酸乙酯部位具有免疫抑制、調節細胞因子和抗氧化等共同作用，為下面進一步研究其作用通道和有效成分奠定了基礎。

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Anti-arthritic and anti-oxidative effect of ethyl acetate fraction of Blumea

balsamlfera residues in rat adjuvant-induced arthritis

XIA Yan， ZUO Jian， LI Xiang， CHEN Jian-wei*

（Nanjing University of Chinese Medicine， Nanjing 210046， China）

[Abstract]Objective： To study the effect of ethyl acetate fraction of Blumea balsamifera（BBE） residue on treating rats of adjuvant arthritis （AA） and its mechanism. Method： The rats were immunized with the Freund′s complete adjuvant （FCA）. After modeling， 28 days′ treatment with BBE was performed. During the experimental process， rat mass， toe girth， arthritic index （AI）， proliferation of immune organs and pathological section were measured. After treatment， blood samples were collected through fossa orbitalis vein for detection of serum SOD， MDA， GSH， NO， OH?， ALP， AST， ALT， NAG and SA content using colorimetric method and IL-1， IL-6， TNF-α content using ELISA method. Result： Administration with BBE （high dose） could significantly ameliorate joint swelling and arthritis index， effectively inhibit synovial hyperplasia， down-regulate the levels of MDA， NO， OH?， ALP， AST， ALT， NAG， SA， IL-1， IL-6， TNF-α and up-regulate the SOD and GSH levels in serum. Conclusion： The results suggested BBE possesses substantial anti-arthritis and antioxidant activities.