導語：如何才能寫好一篇思戀短信，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

世紀佳緣是個比較垂直化的服務商。目前世紀佳緣的主營收入來自世紀佳緣網和手機佳緣兩個方向，線下活動和51獵婚兩個品牌完全基于線下服務。線下活動是世紀佳緣最早獲得現金收入的產品和服務。隨著移動互聯網步伐的加大，世紀佳緣開始探索移動端的商業模式，力求商業模式的完美化。

婚戀網站的突破口

世紀佳緣成立的十年是典型的互聯網創業公司歷程。從2003年創立到后來吸收投資，再到商業模式從免費變成收費，再到依托電視媒體、傳統媒體和數據報刊的宣傳，通過多種途徑進行推廣和傳播。

世紀佳緣的大數據核心是9200萬左右的注冊用戶，其中會員占10%。有了這樣的數據，世紀佳緣在移動端的用戶量就得到了保障，所以世紀佳緣手機家園的重心就放在了LBS位置服務。

“說到位置，我們不得不提到國外的Foursquare和Color，這兩者不管是從之前的簽到服務，還是到現在的無線支付，國內很多團隊都在爭相模仿。不同的是，Color從媒體方面獲得報道，在產品沒上市之前就得到了投資人的親睞，獲得了大概幾千萬美元的投資。其實Color還是一個典型的技術流產品，兩年前的產品創新和概念都是獲得投資人親睞的關鍵點，這也是世紀佳緣移動端目前要努力的方向”，司說。

移動端的LBS即通過手機的傳感器獲得用戶環境，通過環境，無論是圖片、聲音還是輔助的GPS定位，都能獲得用戶在近場內的數據位移，由此產生近場定位的概念。司指出，到目前為止國內團隊很少能看到精準位置服務的產品。現在來看，國內很多產品經理在設計產品時一是區別借鑒，借鑒一些新的經驗，在原有的產品上做些優化。另外，根據用戶的數據做些微創新。

世紀佳緣在基于位置服務方面，把位置服務劃分成五個緯度：第一是低于坐標的點，就是每個GPS坐標點基于點行程的軌跡。基于這種散點行程面積的區域以及加上時間后，可以判斷用戶的行為；再加上空間的三維坐標和真實場景，就可以定位在某個緯度上。

司表示，很多基于位置的產品都是基于點坐標去擴展，而基于軌跡的目前有一些偶遇性的產品或者叫匹配產品。機遇軌跡交叉是說兩個用戶相遇時會有一個交叉點；基于區域是指雖然在真實場景里兩人沒有互相關注，但事實上兩人卻處于一個很近的位置。同一個位置在現實生活中可能無法達成見面的效果，但基于世紀佳緣的位置數據可以讓用戶實現這個效果。

移動端服務定位為重

基于位置的服務一般選擇多為列表，或者采用地圖模型呈現，但是這種模式的視覺沖擊力不夠。為了彌補產品在視覺上的缺陷，世紀佳緣采用了大幅的表現方式，即有思想上的溝通，又有視覺上的溝通。

基于位置的軌跡服務，目前技術能夠達到的程度離用戶的真實場景差別還很大。其實用戶的真實場景通過目前的技術手段只有加大獲取位置的頻次，或者拉長獲取位置的時間才可以盡量還原。但這種做法會帶來一些弊端。第一會影響用戶體驗，第二會加劇用戶的流量消耗。所以基于軌跡的位置服務目前來看還沒有達到真正理想的環境。

篇2

掛職鍛煉半年來，我對司法行政工作有了更新的認識、更深的了解。身處這樣一個開拓奮進的集體,我時刻面臨著壓力和挑戰,工作絲毫不敢懈怠。掛職鍛煉近半年來，在分管領導的直接帶領下，我和社矯科的同志一道創造性地開展工作，召開了公、檢、法、司分管領導及相關部門負責人參加的社區矯正工作聯席會議，營造了各方齊抓共管、注重實效的良好氛圍；加強與縣檢察院對接，實現了監外執行人員信息共享，落實監管安全責任；加大集中教育的力度，會同縣檢察院監所科在山陽鎮開展社區矯正對象集中法紀教育試點活動，并在全縣推廣，增強了社區矯正對象的法紀意識；成立縣社區矯正教育（心理矯正）中心，并從縣衛生局、職業技術學校聘請了兩名具有心理咨詢師資格的工作人員，為社區矯正對象提供心理咨詢與救助服務，提高了社區矯正教育、改造質量；利用省廳撥付社區矯正專項資金的契機,及時制定出臺了《社區矯正百分考核辦法》，將對社區矯正工作的考核與社區矯正專項經費掛起鉤來，強化了考核的力度；針對一些社區矯正對象不報到入矯、逃避矯正的現狀，積極撰寫了《社區矯正入矯工作漏洞及立法思考》的調研文章，建議盡快立法堵塞漏洞，以此來進一步指導實際工作；分別不同對象,先后去南通、鎮江監獄對寶應籍在押犯人開網展多形式的延伸幫教工作，幫教效果明顯，受到獄方的熱烈歡迎。以上工作在接受市局年終檢查時，得到了市局領導的充分肯定。

我對自己掛職鍛煉的要求是：首先，擺正位置。掛職鍛煉是一個難得的機遇，更是一次終生難忘的經歷。掛職不是鍍金，不是享受，而是學習，更是鍛煉。“掛職”是一種特殊身份，代表的不只是自己的形象，更是組織的形象。因此在實際開展工作時，我注意對自己進行準確定位。一方面,協助分管領導為開展好全縣的社區矯正和安置幫教工作而發揮積極的組織、協調、領導作用；另一方面，將自己看成社區矯正科的一員，主動參與社區矯正的各項具體工作，分解科長的工作責任和壓力。其次,轉變角色。掛職鍛煉是一種新的工作體驗，需要學習、思考與實踐的有機結合。隨著工作環境、工作對象的變化，我注意適時轉變自己的工作角色和工作方式,適應從強權部門向弱權部門工作的轉變。以前我一直從事反貪偵查工作，以查處經濟犯罪為主要工作內容，工作對象相對處于劣勢地位，讓別人適應自己的情形非常明顯；現在從事司法行政管理工作，特別是身處局機關，更多的是要考慮大局利益，為基層司法所正常開展工作搭建平臺、創造有利的外部環境和為地方經濟建設提供法律服務是現在的主要工作內容，工作對象彼此地位平等，要我主動去適應別人的情形相對比較突出。正因為我事先思想準備充分，因而實際開展工作時能夠得心應手。

掛職鍛煉半年來，我對司法行政工作有了更新的認識、更深的了解，既解放了思想，更新了觀念,開闊了眼界，豐富了經驗,增長了才干;同時也認識到自己還存在差距和不足。一年的掛職時間已經過半，在感嘆光陰易逝的同時，更感到了一種責任感和危機感。社區矯正、安置幫教工作關系到全縣的社會穩定，任重道遠，且社區矯正目前尚處于試點階段，無現成經驗可言。俗話說：“機遇與挑戰并存！”接下來，我必須始終保持奮發有為的精神狀態，始終保持蓬勃朝氣、昂揚銳氣和浩然正氣，圍繞局制定的“一條主線、四個重點”的工作思路,在社區矯正工作中不斷探索，積極思考，打造亮點特色,為全局爭創“全省優秀司法局”的目標作出自己應有的努力，為全縣經濟社會的和諧穩定奉獻自己綿薄的力量。

篇3

2.@重慶晚報：塔夫茨是跟哈佛和麻省理工齊名的新常春藤名校，號稱“對中國學生遴選最嚴苛的美國名校”。重慶女孩吉瑞琪SAT考試和托福的成績并非頂尖，然而在面試中，她以對小說《飄》的深度剖析打動了面試官，成為該校2015級新生。別人猛攻數理化的時候，她苦讀文學名著;別人喜歡看網絡小說，她卻沉淀下來看經典小說;別人看電影電視劇，她卻在關注歷史著作。正是這份對“讀書”的堅持和執著，才換來最終的一鳴驚人。

3.2011年日本福島核電站事故后，所有人都離開了，動物被遺棄在這里。55歲的松村直登曾跟著其他人一起撤離這里，但他不忍心讓動物們餓著，于是又折返回來。隔離區的食物不安全，松村就從外面帶食物喂養它們。4年來，他日日如此，沒有他，很多動物都將死去。人們于是稱他為“福島的動物守護神”。松村說：“我會守在這里，一直照顧它們。”他所做的這一切，就在于一個生命對于另一個生命的關愛與責任。

4.32歲的劉濤是合肥供水集團的抄表員，從2010年起，他在街頭拍攝照片，至今已拍出了兩千多張，有趣味、有溫情、有諧謔。因照片風格獨特，他被稱為“野生的攝影大師”。有人說他“用好奇心把整座城市變成了自己的作品”，劉濤則說自己“就是記錄平凡人故事的平凡人”。

1.@白洲正子：人對于物之美，總有著道不完的說辭，比如形態好、色彩佳，或是這處缺陷恰到好處之類。但是，真正的美物是能自我豐富、賦予沉默以力量的。無論你面對的是一幅畫還是一件陶瓷器，抑或是文學作品，都是如此。把沉默之物作為對象時，要不斷克制自己，在對方自然的向你開口之前學會忍耐，學會等待。

2.@柴靜：伯林是個有名的哲學家，有人問他：“您認為現代性的主要特征是什么？”老頭說：“根本沒這玩意，什么前現代性、現代性、后現代性，都是任意武斷的概念。”那人又問，哲學到底有什么用？他說了個故事，有個教哲學的老師給學生上第一課，說：“你們當中有人要當律師，有人當官員，有人當士兵，我說的東西，對于你們要訓練的技能，不管在哪方面都沒有絲毫用處。但有一點可以保證，上完這個課，你們能看清人們什么時候在胡說八道。”

3.@白巖松：別以為你是90后，就不會遇到跟我們60后一樣的問題，你用手機微信發求愛信，跟我們當初用圓珠筆寫求愛信，心跳是一樣的，但問題就在于，你們更不幸，被回絕的時間更短，我們那時候還有等待憧憬的一段時間。

篇4

【摘要】 目的 探討急性下壁心肌梗死心前導聯ST段壓低的意義。方法 對87例急性下壁心肌梗死中有冠脈造影的26例病人心前導聯ST段改變與冠脈血管病變的關系進行比較分析。結果 以CPK峰值、左室射血分數、多支血管病變數為指標進行了統計對照，差異有非常顯著性（P值分別為P<0.001、P<0.001、P=0.0077）。結論 急性下壁心肌梗死心電圖心前導聯ST段壓低可能成為預測病人有多支血管病變的一項指標。

關鍵詞 急性下壁心肌梗死 ST段壓低 心電圖

急性下壁心肌梗死早期心前導聯對應性ST段壓低的臨床意義和發生機制各文獻報道不一。本文從87例急性下壁心肌梗死中有冠脈造影的26例病人心前導聯ST段改變與冠脈血管病變的關系進行了比較分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2000～2001年收住冠心病監護室87例急性下壁心肌梗死病人，所有病人均符合WHO診斷標準。其中有心前導聯ST段壓低者68例（78%），無ST段壓低者19例（22%）。68例中有冠脈造影的18例（組Ⅰ）:15例為多支血管病變，3例單支血管病變;19例中有冠脈造影 的8例（組Ⅱ）:2例為多支血管病變，6例單支血管病變。組Ⅰ平均年齡（61±6.5）歲，組Ⅱ平均年齡（54.1±9.6）歲。

1.2 方法 （1）心電圖選擇:為入冠心病監護室即刻描記的一幀心電圖。（2）對應性ST段壓低的測量:V 1～6 導聯至少2個相鄰導聯QRS綜合波J點0.08秒ST段水平或斜行下移>1mm ［1］ 。（3）多支血管病變:冠脈造影有2支或2支以上血管腔徑狹窄≥70% ［2］ 。

2 結果

兩組間的年齡、CPK峰值、左室射血分數、多支血管病變例數的比較見表1。

表1 急性下壁心肌梗死心前對應導聯ST段壓低組與無ST段壓低組各因素比較表 （略）

3 討論

急性下壁心肌梗死病人心前導聯ST段壓低發生率71.9%～87.5% ［3，4］ 。本文87例中68例有ST段壓低（78%），與文獻一致。近年來關于急性下壁心肌梗死早期伴對應性ST段壓低的發生機制頗有爭議。Odemyiwa O ［5］ 等對51例下壁心肌梗死病人冠脈造影發現血管病變率及嚴重程度不因有無對應性ST段改變而有所不同。他們認為急性下壁心肌梗死早期對應性ST段壓低可能是梗死部位的電生理改變在心臟對側面的反映（鏡像反映），不能預測相應區域的冠狀動脈有嚴重病變。Croft ［6］ 等對47例下壁心肌梗死病人心電圖分析發現，心前導聯ST段壓低與下壁導聯ST段抬高數呈正相關，與上述觀點一致，而Shan ［7］ 等以平衡法放射核素心室造影對急性下壁心肌梗死研究發現，有對應性ST段壓低者比無ST段壓低者左室射血分數明顯降低。Katz ［4］ 等研究的結果是下壁心肌梗死伴對應性ST段壓低血清心肌酶水平顯著高于無ST段壓低者。本文組Ⅰ左室射血分數顯著低于組Ⅱ（P<0.001），組ⅠCPK峰值顯著高于組Ⅱ（P<0.001），與文獻報道相似。

Roubin GS ［2］ 等對84例下壁心肌梗死病人冠脈造影觀察到伴前間壁ST段壓低的多支血管病變率高（53%），左前降支狹窄發生率也高（36%）。他們認為下壁心肌梗死伴前間壁ST壓低者多為多支血管病變或供應梗死區的血管供應區域較大，而不伴有對應性ST段壓低者可排除多支血管病變。認為對應性ST段壓低是遠離梗死部位的心肌缺血。其發生機制可能是梗死部位血管閉塞后，經其側支流向對應部位的血流減少或通過“竊血現象”使相對應部位血流經側支流向梗死區增加。本文組Ⅰ15例為多支血管病變（83%），顯著高于組Ⅱ的2例多支血管病變（25%）（P=0.0077）。與文獻 ［2］ 相符。急性下壁心肌梗死伴心前導聯ST段壓低對于識別多支血管病變的敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值分別為88%、83%和75%。

另外，本文下壁心肌梗死伴對應性ST段壓低病人的平均年齡顯著高于無ST段壓低的病人（P<0.02）。提示ST段壓低和多支血管病變發生率可能在老年下壁心肌梗死時多見。總之，急性下壁心肌梗死伴對應性ST段壓低時不只是心電圖在遠隔導聯的“鏡像反映”，可能同時提示有廣泛心肌缺血和多支血管病變的存在。所以，急性下壁心肌梗死心電圖心前導聯ST段壓低可能成為預測病人有多支血管病變的一項指標。

參考文獻

1 Strasberg B.Important of reciprocal ST segment depression in Leads V 5 and V 6 as an indicator of disease of the left anterior descending coronary in acute inferior wall myocardial infarction.Br Heart J，1990，63:339.

2 Roubin GS.Anterolateral-ST segment depression in acute inferior myˉocardial infarction;angiographic and clinical implications.Am Heart J，1984，107:1177.

3 Tzironi D.Reciprocal electrocardiographic changes in acute myocardial infarctiom.Am J cardial，1985，56:23. 4 Katz R.The actiology and prognlstic plicution of reciprocal electrocarˉdiograp changes in acute myocardial infarction.Br Heart J，1986，55:423.

5 Odcmuyiwa O.Reciprocal ST deprssion in acute myocardial infarction.Br Heart J，1985，54:479.

篇5

關鍵詞：壟斷 濫用市場支配地位 價格歧視

一、引言

2011　年　11　月　9　日，中央電視臺新聞節目報道了國家發改委已針對中國電信和中國聯通在電信寬帶接入市場的價格歧視問題進行了相關反壟斷調查的新聞，可謂一石激起千層浪。進入21世紀以來，中國電信行業改革由于加入WTO以及社會主義建設的需要而顯露出許多新的問題。比如說，中國電信與聯通之間雖然存在著一定的競爭關系，但是由于二者之間存在著嚴重的分割市場的地區性壟斷，競爭的激烈性并不盡如人意。同時由于它們為了維護其現有地位，不斷地利用其牢牢占據著電信市場的上游的供貨商優勢，對于那些與其主營業務存在著一定競爭關系的中小企業設置障礙，通過拉高中小寬帶接入商經營成本等方式迫使這些中小企業最終退出寬帶接入市場。

二、　市場支配地位的判定

市場市場支配地位又稱控制市場地位或市場控制地位，我國的《反壟斷法》在第十七條對其作出了明確的解釋：“指經營者在相關市場內具有能夠控制商品價格、數量或者其他交易條件，或者能夠阻礙、影響其他經營者進入相關市場能力的市場地位。”該定義將構成市場支配地位的兩個條件作為選擇性條件：一是企業在市場中的地位，即能夠控制商品價格、數量或者其他交易條件；二是對競爭的影響，即能夠阻礙、影響其他經營者進入相關市場。　而我國《反壟斷法》對市場支配地位推定制度及其適用原則也作了規定。根據有關規定：只有一個經營者在相關市場的市場份額達到二分之一的；兩個經營者在相關市場的市場份額合計達到三分之二的；三個經營者在相關市場的市場份額合計達到四分之三的。而其中并沒有某個經營者市場份額不足十分之一的，則可以推定該經營者（們）具有市場支配地位。而根據國家發改委的調查統計，在寬帶接入領域中國電信和中國聯通所占的市場份額已經超過了三分之二，其中中國電信的市場份額為37%而中國聯通的市場份額則為29%。已經到了相關法律要求可以推定中國電信和中國聯通在互聯網寬帶接入領域是具有市場支配地位的。

三、濫用市場支配地位的判定

我國反壟斷法明確規定了7種濫用市場支配地位的情型，中國電信和中國聯通的行為主要涉及到反壟斷法第十七款第六條的規定：即無正當理由，對具有相同條件的交易相對人在交易產品或者服務價格等交易條件上實行了不公正待遇。作為電信行業的主要寬帶接入服務供應商，中國電信與中國聯通對企業和個人實行差別定價，兩大寡頭為了維持壟斷地位在賣給中小寬帶服務商和自家用戶相同流量時，卻給出了不同價格，前者是后者的2-3倍以上。據有關媒體報道，中國電信和中國聯通給予長城寬帶、鐵通等這些中小互聯網接入服務的提供商的價格十分高昂，最高達到了1000Mbit/月　100　萬的。與此同時，他們賣給自己的用戶的價格僅僅只有每個月30萬左右。眾所周知，在正常的市場交易中批發價是要低于零售價的，因為只有這樣零售商才能保證其利潤空間，也只有這樣整個市場才會更長遠健康的發展。而像中國電信、中國聯通這樣批發價幾倍于零售價，這樣的現象無論如何都是不科學的。兩大寡頭對這些中小寬帶服務商除了采取了價格歧視以外，它們還借助其處于寬帶接入市場的主要供應商地位，限制下游的中小寬帶服務提供商的競爭者的網絡速度。對此行為中國鐵通和長城寬帶也想出了一些辦法，比如：不直接向電信和中國聯通租用電信骨干網絡的寬帶，而是向兩大寡頭的大客戶進行轉租，以達到降低成本的目的。而中國電信察覺到這種行為后，認為隨著競爭對手的主營業務成本的下降其競爭能力日益增強，會威脅到自身的市場壟斷地位，就展開了針對鐵通、長城寬帶的穿透流量清理行動。此舉導致廣東省全省范圍內出現了大范圍斷網的現象，直接影響到了廣大普通寬帶接入用戶的利益，投訴者高達上萬人。據此我們推定中國電信與聯通二者在寬帶接入領域存在著濫用市場支配地位、價格歧視、限制競爭等壟斷行為。

四、壟斷的后果及治理

根據上述結論可以得出：中國電信和中國聯通二者在互聯網寬帶接入領域具有市場支配地位，且具有濫用其市場支配地位的行為，而這種濫用市場支配地位的行為是法律所不允許的。但是我們也要認識到，中國電信和中國聯通的這種壟斷地位，是由于中國電信體制改革而導致的，價格歧視行為則是兩家企業的市場行為，有關部門應當給予二者相應的行政處罰，維護正常的市場交易秩序。其次，為了消除電信和聯通濫用市場支配地位所帶來的不利影響本人認為還應采如下措施：首先，加強互聯網行業之間的互聯互通。當前互聯網行業之間壁壘嚴重，這主要是因為當年我國實行電信行業改革中使用的拆分切割方式形成的。其次，繼續增加電信行業中的經營者數量，進一步加強電信市場中的競爭氛圍，放寬電信行業的進入限制。最后，繼續深化電信行業的改革。當前中國的電信行業迅猛發展最大的源動力在于我國不斷深化改革所帶來的改革紅利，只有繼續深化改革才能從源頭上解決我國電信行業改革過程中所帶來的一系列問題，“革命尚未成功，同志仍需努力！”

參考文獻：

[1]初佳穎.政府規制下電信產業的技術效率分析[J].經濟縱橫，2006，（4）

[2]戚肇東等著.自然壟斷產業改革國際經驗與中國實踐[M].中國社會科學出版社　，2009.

篇6

[關鍵詞] 氯吡格雷；阿司匹林；非ST段抬高型心肌梗死；臨床觀察

[中圖分類號] R972 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2012）06（a）-0065-02

Clinical observation of clopidogrel and aspirin in the treatment of non ST segment elevation myocardial infarction

LI Mingyu

The People''s Hospital of Tumen City in Jilin Province, Tumen 133100, China

[Abstract] Objective To observe the clinical curative effect of clopidogrel combined with aspirin in the treatment of non ST segment elevation myocardial infarction. Methods Ninty six patients were randomly divided into the treatment group 50 cases and control group of 46 cases, based on the routine treatment, the treatment group were treated with clopidogrel 75 mg daily (the first dose of 300 mg), aspirin 100 mg daily, the control group was only given aspirin 100 mg, observed for 4 weeks, the clinical efficacy and adverse reaction of two groups patients were observed. Results After 4 weeks treatment, the total effective rate of the treatment group was 85.7%, the control group was 63.3%, the two groups had significant difference (P < 0.05). Conclusion The clopidogrel and aspirin in the treatment of non ST segment elevation acute myocardial infarction is effective in reducing cardiovascular events, has good curative effect, less adverse reaction, it is worthy of popularization and application.

[Key words] Clopidogrel; Aspirin; Non ST segment elevation myocardial infarction; Clinical observation

冠狀動脈粥樣硬化性心臟病指由于冠狀動脈粥樣硬化管腔狹窄、痙攣或阻塞導致心肌缺血、缺氧或壞死而引起的心臟病，它是動脈粥樣硬化導致器官病變的最常見類型[1]。急性心肌梗死由于冠狀動脈急性狹窄或閉塞，供血持續減少或終止，所產生的心肌嚴重缺血和壞死。分為ST段抬高型心肌梗死和非ST段抬高型心肌梗死，治療上在嚴格掌握適應證的情況下及早進行溶栓、介入治療與外科手術治療基礎上，積極抗凝、抗血小板治療尤為重要，并能明顯降低患者心血管事件、腦梗死、再發心肌梗死，提高遠期療效、生活質量。本文旨在觀察氯吡格雷與阿司匹林聯合治療非ST段抬高型急性心肌梗死的臨床療效。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院心內科2010年6月～2011年4月住院診治的非ST段抬高性心肌梗死患者96例，具有典型的胸痛，時間大于30 min，血清肌酸激酶（CK）增高；心肌壞死標志物升高；心電圖表現ST段明顯壓低0.4～0.6 mV，T波倒置。入選前均未服用氯吡格雷，將96例患者隨機分為治療組50例，其中，男35例，女15例，平均年齡（60±8）歲，吸煙3例、高血壓4例、糖尿病3例、血脂異常2例；對照組46例，男28例，女18例，平均年齡（65±7）歲，吸煙者4例、高血壓3例、糖尿病3例、血脂異常2例；兩組患者在吸煙、性別、高血壓、糖尿病、血脂異常、心功能等方面差異無統計學意義（P ＞ 0.05），具有可比性。

1.2 方法

兩組患者均接受常規治療，包括阿司匹林片、硝酸酯類、血管緊張素轉換酶抑制劑、β受體阻斷劑、他汀類以及注射低分子肝素5 000 U，每12小時1次，連用7 d。治療組在此基礎上給予氯吡格雷每日75 mg（首劑300 mg），對照組僅給予阿司匹林100 mg，觀察比較兩組在治療期間內心腦血管事件（包括心絞痛復發、ST段抬高型急性心肌梗死、心源性猝死、缺血性腦卒中）的情況，以及藥物不良反應。

1.3 臨床療效評定標準

顯效：癥狀消失或心絞痛發作次數減少85%，心電圖缺血或損傷性改變恢復正常；有效：心絞痛發作次數減少55%～85%，心電圖壓低的ST段回升0.5 mV以上；無效：心絞痛的發作次數減少55%，心電圖ST段下移較入院時改善。總有效為顯效加有效。

1.4 統計學處理

采用SPSS 11.5軟件進行統計學處理。計量資料以x±s表示，進行t檢驗，計數資料采用χ2檢驗。P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

住院治療4周后，治療組50例中，顯效35例，有效9例，無效6例，總有效率為88%；對照組46例中，顯效21例，有效8例，無效17例，總有效率為63%。兩組比較差異有統計學意義（P < 0.05）。

再發非致死性心肌梗死治療組2例，對照組5例；心律失常治療組2例，對照組4例；心力衰竭治療組1例，對照組5例；心血管性死亡治療組1例，對照組3例；兩組心泵功能治療組好于對照組。

4周內兩組均未出現嚴重出血、胃腸道反應，治療組較對照組發生率低，骨髓抑制、皮疹無顯著差異。

3 討論

心肌梗死是心肌缺血性壞死，在冠狀動脈病變的基礎上發生冠狀動脈血供急劇減少或中斷，使相應的心肌嚴重而持久地急性缺血所致[2]。冠狀動脈病變或粥樣硬化斑塊的慢性進程，即使可導致冠狀動脈嚴重狹窄甚至完全閉塞，由于側支循環的漸漸形成，通常不易產生心肌梗死，相反冠狀動脈的粥樣硬化病變在進展過程中即使狹窄程度不重，當側支循環尚未建立，狹窄的冠狀動脈管腔內有血栓形成，心肌血供急劇下降，中斷使心肌持久缺血達30 min以上，即可發生心肌梗死。急性心肌梗死起病急而兇險，死亡率高，預后差，是冠心病極其危重的表現類型，已成為危害健康的重大的衛生問題[3]。

目前治療急性心肌梗死主要是及早進行血運重建，盡早恢復冠狀動脈的血流和增加心肌的灌注，以挽救瀕死的心肌、防止梗死范圍擴大、縮小心肌缺血范圍，保護心臟功能。但基于血栓形成的病理生理，抗血栓形成也是AMI治療的重要環節之一[4]。

臨床上已將血小板聚集的藥物列為治療AMI的常規用藥。氯吡格雷與阿司匹林都有抗血小板聚集作用。氯吡格雷通過選擇性抑制ADP和血小板受體的結合，抑制ADP介導的血小板活性，抑制血小板聚集，也通過其代謝產物發生作用。氯吡格雷起效快，口服后代謝產物在2 h達到抗血小板的高峰[5]。阿司匹林又名乙酰水楊酸，作用機制主要通過抑制血小板環氧化酶，阻止活化四烯酸代謝合成血栓素，選擇性抑制通過血栓素A2（TXA2）途徑誘導的血小板聚集。阿司匹林的這種抑制作用持久不可逆，一次用藥抑制作用可持續近7 d，直到骨髓細胞產生新的血小板才能重新合成TXAt2。但由于更新10%的血小板即可使血小板功能低下的狀態恢復，故仍需每日服用才能維持療效。阿司匹林口服后吸收迅速，胃腸道吸收，血漿濃度在1～2 h達高峰，半衰期為18～20 min[6]。氯吡格雷耐受性好，無阿司匹林胃腸道反應。

本文中氯吡格雷與阿司匹林聯合治療非ST段抬高型急性心肌梗死有效降低治療期間心腦血管事件，再發非致死性心肌梗死、心律失常、心力衰竭、心血管性死亡和心肌梗死復發率減少36%，而嚴重并發癥未增加，值得臨床借鑒。

[參考文獻]

[1] 陳灝珠，何梅先，魏盟,等. 實用心臟病學[M]. 上海：上海科學技術出版社，2007：856.

[2] 趙水平，胡大一. 心血管病診療指南解讀[M]. 北京：人民衛生出版社，2008：210.

[3] 楊躍進，華偉，高潤霖，等. 阜外心血管內科手冊[M]. 北京：人民衛生出版社，2006：123.

[4] 金紅梅，張學林. 銀杏達莫聯合參麥注射液治療冠心病心絞痛50例[J]. 中國醫藥導報，2010，7（2）：30.

[5] 余樞，馬業新. 心血管病診療指南[M]. 北京：科學出版社，1999：88.

篇7

[關鍵詞] 非ST段抬高性心肌梗死 ；參麥 ；燈盞花

[中圖分類號]R544.2+2 [文獻標識碼] B[文章編號]1673-9701（2011） 27-66-02

Effects of Combination of Shenmai and Erigeron Breviscapus in Treatmentof Patients with non-ST Segment Elevation Acute Myocardium Infarction

ZHANGPing

Department of Cardiology, Zhangzhou City People’s Hospital in Fujian Province, Zhangzhou,363000,China

[Abstract] Objective To investigate the efficacy and safety of integrated chinese traditional and western medicine therapy innon-ST-segment elevation acute myocardial infarction（NSTEAMI）. Methods Fifty-six patients with NSTEAMI were randomly and equally divided into treatment group which received shenmai and Erigeron Breviscapus combined with low-molecula-weight heparin, aspirin and clopidogrel and other therapy, and the control group which received placebo combined with the same therapy. The changes of the main adverse cardiovascular events（MACE）were observed after 7 days, 1 month, and adverse drug effect were observed. ResultsCompared with those of the control group, the patients in treatmeant group showed the endpoint events and MACE incidence decreased （P ＜0.05）There were no serious adverse drug effects. Conclusion Shenmai and Erigeron Breviscapus combined with routine therapy is effective and safe in the treatment of NESTEAMI.

[Key words]Non-ST-segment elevation acute myocardial infarction；Shenmai；Erigeron breviscapus

急性心肌梗死是一種嚴重危害人類健康的疾病，致殘、致死率高。目前西醫采用急診介入治療，使該病的預后明顯改善，但因患者的個體差異、經濟條件和基層醫院的技術條件所限，不能得到相應的治療。本研究根據當地的實際情況，對NSTEAMI患者采用中西醫結合治療，取得較滿意療效，報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2004年3月～2009年12月我院內科住院急性NSTEAMI患者56例，符合NSTEAM I診斷[1]，排除藥物過敏及有抗凝治療禁忌證者。將患者按就診順序采用雙盲、隨機、平行對照試驗原則，分為對照組和受試組各28例。對照組男14例，女14例，年齡（63. 6±9.5）歲；受試組男15例，女13例，年齡(64.0±9.6)歲。所有患者能夠完成整個實驗，兩組性別、年齡、血壓、血脂、血糖、心功能、血清心肌標記物等各項指標均無明顯差異（P＞0.05）。見表1 。

表1兩組一般資料的比較

組別 n 梗死部位 入院情況

前壁 下壁 前壁+下壁其他 低危中危高危

對照組 2814 5 2 7 324 1

受試組 2813 6 3 6 2 25 1

1.2治療方法

對照組給予阿司匹林、低分子肝素、β受體阻滯劑、對無β受體阻滯劑反指征的患者加用美托洛爾[2]ACEI及調脂等西醫常規治療。受試組在對照組基礎上加用參麥注射液（四川雅安三九藥業有限公司生產，國藥準字Z51020665）40mL及燈盞花粉針（昆明龍津藥業有限公司生產，國藥準字Z20053907）50mg分別加入0.9%氯化鈉注射液250mL靜滴，每日1次，連用2周后改口服同類藥物4周。

1.3觀察指標

觀察兩組間的主要不良心臟事件發生情況。

1.4統計學處理

應用SPSS13.0統計軟件對數據進行分析。兩組之間差異的比較采用χ2檢驗， P＜0.05有統計學意義。

2結果

2.1兩組主要終點事件發生情況比較

見表2 。

表2兩組終點事件比較

組別 心力衰竭 心律失常 心源性休克病死例

對照組 15 15 4 3

受試組 7* 6* 2 0

注：與對照組比較具有統計學意義（*P＜0.05）

2. 2兩組主要不良心臟事件發生情況比較

見表3 。連續觀察1個月,受試組無1例死亡, 并發心力衰竭、心律失常及再發心絞痛發生率較對照組降低（P＜0.05），主要不良心臟事件聯合終點發生率較對照組顯著降低（P＜0.01）。兩組均無不良反應發生。

表3 兩組主要不良心臟事件發生情況

組別 n 再發心絞痛 再發心肌梗死死亡 聯合終點

對照組

1周288 2 2 10

1個月26 11 3 3 17

受試組

1周28 2* 1 0 2**

1個月28 3* 2 0 5**

注：與對照組比較具有統計學意義（*P＜0.05，**P＜0.01 ）

3討論

NSTEAMI在中醫學屬“胸痹”、“真心痛”范疇，系心之氣血陰陽不足導致氣滯、血瘀、痰濁、寒凝等阻遏胸陽，閉塞心絡，痹而作痛。治療上主張行氣通脈、活血化瘀。

本研究結果顯示，與單純用西醫治療的對照組比較，參麥和燈盞花聯合西醫治療NSTEAMI，可改善心功能、減少心律失常和心源性休克的發生，并降低心絞痛和心肌梗死再發率及死亡率，并未發現不良反應。機制如下：參麥由人參和麥冬兩味藥組成。現代醫學研究表明，人參減輕線粒體損傷、促進心肌細胞DNA合成，對缺血、缺氧時代謝和超微結構損傷均有保護作用，并促進心肌毛細血管內皮細胞釋放NO，擴張冠脈血管，使心肌收縮力增強，從而改善心肌收縮功能[3，4]。麥冬能改善心肌細胞的能量代謝，抑制缺血心肌氧自由基生成和清除氧自由基、保護心肌細胞膜，顯著提高動物的耐缺氧能力和增加冠脈流量，對心肌缺血有明顯保護作用，并能抗心律失常及改善心肌收縮力[5，6]。因此，參麥具有擴張冠脈、改善心肌代謝、增強機體耐缺氧能力。而燈盞花能降低心肌氧攝取率、外周阻力，增加心肌血液供應，改善缺血心肌代謝，抑制血小板聚集及血栓形成，對缺血損傷心肌具有保護作用[7]。參麥和燈盞花二者聯用，藥性相輔相成，起到改善心肌血供、抗心律失常及改善心功能之功效，達到提高生活質量、降低病死率之目的。

在治療過程中所有患者未出現藥物不良反應，提示參麥和燈盞花聯合西醫治療NSTEAMI安全有效，值得在臨床上進一步探討和實踐。

[參考文獻]

[1] 中華醫學會心血管病學分會，《中華心血管病雜志》編輯委員會，《中國循環雜志》編輯委員會.急性心肌梗死診斷及治療指南[J].中華心血管病雜志，2001，29（12）:710.

[2] 汪溶汪恩定. 美托洛爾治療難治性心衰31例[J].醫學綜述，1998，4（4）：64-65.

[3] 王皓光，谷春華，姜鳳.參麥注射液配合西藥搶救急性心肌梗塞合并心源性休克23例臨床小結[J].中國中醫急癥，1999，8（2）:72-74.

[4] 張靜舒血寧、參麥注射液治療急性心肌梗死的臨床觀察[J].中國醫藥導報，2008，5（8）：75-76.

[5] 何平，代趙明.麥冬總皂甙對培養心肌細胞缺氧再給氧損傷的保護作用[J].微循環學雜志，2005，15（2）:45-47.

[6] 鄭琴，馮怡，徐德生，等.麥冬多糖MDG - 1對鼠實驗性心肌缺血的保護作用[J].中國中西醫結合雜志，2007，27（12）:1116-1120.

篇8

【關鍵詞】通心絡膠囊；阿司匹林；短暫性腦缺血短暫性腦缺血發作是指某一腦動脈血流量突然降低到臨界值以下所出現的一組神經功能障礙癥候群, 臨床表現為24 h內完全恢復, 但反復發作。短暫性腦缺血發作容易發展為腦梗死和腦缺血性疾病, 進而導致致殘或病死［1］, 因此臨床將短暫性腦缺血發作作為神經科急癥進行處理。本科室采用通心絡膠囊聯用阿司匹林進行小規模治療短暫性腦缺血發作, 取得了滿意的療效。

1資料與方法

1. 1一般標準獲得院內倫理委員會同意, 納入2011年10月~2013年12月依據2010版中國急性缺血性腦卒中診治指南［2］診斷的短暫性腦缺血發作患者126例, 其中男72例, 女54例, 年齡34~86歲, 均伴有突然發生的神經功能缺損, 癥狀和體征在24 h內完全消失, 經頭CT和MRI檢查證實無出血、占位及可以解釋癥狀的責任病灶。126例患者隨機分為對照組62例和治療組64例, 兩組一般資料, 差異無統計學意義(P>0.05), 具有可比性。

1. 2排除標準合并嚴重原發心、肺、肝、腎疾病者；多發性損傷伴有血氣胸或肺挫傷、或腹部臟器損傷、或失血性休克者；精神病患者及老年癡呆患者及由其他臟器疾病引起意識障礙者。

1. 3治療方法對照組每天給予鹽酸丁咯地爾200 mg靜脈滴注, 治療組予通心絡膠囊, 4粒/次, 3次/d, 療程4周, 兩組患者同時給予阿司匹林腸溶片100 mg/次, 1次/d, 療程1個月。并視病情加用降壓、降脂藥, 不用其他的血管活化劑。4周后觀察治療結果, 療程結束至出院后病患服用50 mg/d的阿司匹林。

1. 4療效評價兩組病患均在治療前和治療后4周采用臨床神經功能缺損標準, 即歐洲腦卒中 (The European Stroke Scale) 評分。治療后6個月電話隨訪病患的情況, 分為治愈、顯效、有效和無效。出現梗死和出血出現時即刻脫離本研究, 轉其他治療方案。

1. 5統計學方法采用SPSS13.0軟件進行分析, 檢測指標采用均數±標準差( x-±s)表示, 組間計量資料采用t檢驗, P

2結果

2. 1兩組康復功能評分治療組對短暫性腦缺血患者的生活和神經等改善較為明顯, 評分顯著減少(P

2. 2兩組有效率比較6個月隨訪發現對照組有4例, 治療組有1例因病情惡化脫失, 其余病例并無顯著的不良反應, 生活質量良好。見表2。

3討論

短暫性腦缺血發作起病突然, 多數短暫性腦缺血發作患者就診時癥狀已消失便不再繼續治療。但部分患者在短暫性腦缺血發作發生后的短期內可進展為腦梗死［3］。臨床上采取何種治療措施來有效預防短暫性腦缺血的反復發作, 減少卒中的發生率值得探討。

通心絡具一種具有降脂、抗凝和保護內皮功能的中成藥, 有益氣活血、通絡止痛之功效, 可有效地延緩動脈硬化, 改善腦供血［4］。而作為防治心腦血管疾病的基石, 在預防與治療心腦卒中效果明顯, 很多醫院心血管疾病住院患者阿司匹林的使用率也已超過85%, 兩者合用能減輕各種原因引起的血管內皮損傷, 顯著降低缺血的發生率, 能盡快控制短暫性腦缺血。實驗聯合兩種藥物進行治療, 效果顯著。

參考文獻

［1］ 傅毅, 孫家蘭, 郭正良, 等.短暫性腦缺血發作發展至腦梗死的分析.中國神經精神疾病雜志, 2008, 34(3):153-155.

［2］ 中華醫學會神經病分會腦血管病學組急性缺血性腦卒中診治指南撰寫組.中國急性缺血性腦卒中診治指南2010.中華神經科雜志, 2010, 43(5):146-153.

［3］ Karabeyoglu M, Unal B, Bozkurt B, et al. The effect of ethyl pyruvale on oxidative stress in intestine and bacterial translocation after thermal injury. J Surg Res, 2008, 144(1):59-63.

篇9

【關鍵詞】 食管鱗癌;nf?κb;rna interference;cyclin d1

effect of sirna?mediated inhibition of nf?κb combination with 5?fu on cell cycle of escc cell lines

tian fang1，2，chai yu?rong3，xu pei?rong2，liu hong?tao2，xue le?xun2

1. department of pathophysiology, basic medical college of zhengzhou university, zhengzhou 450052, china，2. laboratory for cell biology，3. department of histology and embryology

corresponding author：xue le?xun，e?mail：abstract：objective rna interference (rnai) was employed to inhibit the expression of p65 and to evaluate the effects of nf?κb signaling pathway as a target for gene therapy in escc cell lines. methods a fluorescein?labeled non?special sirna was used to monitor efficiency in ec9706. ec9706 and eca109 were transfected with 50 nm p65sirna, p65 and cyclind1 protein levels were determined using western blotting. after transfected with or without p65sirna at 72h, cells were tested for nuclear activity of nf?κb using nuclear extracts by emsa. escc cells were treated with or without p65sirna, 5?fu or combinations thereof for 48h. the cells were stained with pi and analyzed cell cycle by flow cytometry. results a fluorescein?labeled non?special sirna was used to monitor efficiency in ec9706, demonstrating nearly 90% transfection efficiency. the protein level of p65 and cyclind1 decreased after transfected with p65sirna at 72h. and p65sirna also suppressed the nf?κb?dna?binding. p65sirna?transfected cells showed an increase in the percentage of cells in the g0/g1 phase and a decrease in the percentage of cells in the s phase. while combination with 5?fu, the results were more prominence. conclusion p65sirna inhibits the constitutively active nf?κb signaling pathway, and downregulats the expression of cyclind1. the strong constitutive nf?κb signaling pathway in escc makes nf?κb a target for the development of novel therapeutic strategies.

key words：esophageal squamous cell carcinoma;nf?kappab;rna interference;cyclin d1

食管鱗癌是一種侵襲性很強的腫瘤，它的預后差，臨床進展迅速，多伴有淋巴結轉移，且易復發。核因子nf?κb (nuclear factor?kappa b) 是近年來發現的轉錄調控因子，最常見的形式是由 p50 和p65組成的異源二聚體，在絕大多數靜止期的細胞中，nf?κb 與其阻抑物iκbα蛋白相結合，以非活性形式存在于細胞質中。許多刺激物可以通過對iκbα的磷酸化而使其降解，使解離的nf?κb進入到核內并暴露它的核識別位點，從而促進靶基因的轉錄。活化的nf?κb信號通路可增強腫瘤細胞對放化療藥物的抵抗力，從而產生耐藥性。有研究表明，在許多人類腫瘤中nf?κb信號通路的激活在腫瘤的發生發展中起著重要的作用[1?3]。

rna干擾(rna interference，rnai)是由雙鏈rna(double?stranded rna，dsrna)引發的轉錄后基因靜默機制，是目前研究基因功能強有力的工具之一[4]。rnai 的功能是由21～23 個堿基長的短雙鏈rna完成的 ,即sirna(small interference rna ,sirna)，它具有與目的基因互補的序列。目前這一方法被用于體外細胞水平的基因敲除或基因表達抑制,為其成為基因治療的手段開辟了廣闊的前景。本研究擬應用rna干擾技術，使用針對nf?κb信號通路中p65的特異性sirna,觀察其對p65表達的抑制作用及聯合化療藥5?fu對食管鱗癌ec9706和eca109細胞周期的影響，探討將nf?κb作為基因治療靶點的價值。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 細胞系及細胞培養 食管癌細胞系eca109由本室保存，食管癌細胞系 ec9706由中國醫學科學院腫瘤醫院腫瘤研究所分子腫瘤學國家重點實驗室惠贈。兩株細胞在含有10%的胎牛血清，100u/ml青霉素，100μg/ml鏈霉素的1640培養液(gibco公司)中于37 ℃、5% co2 的條件下培養，實驗細胞均處于對數生長期。

1.1.2 抗體和試劑 鼠抗人p65(sc?8008)單克隆抗體和兔抗人cyclin d1(sc?753)購自santa cruz biotechnology 公司;細胞核和細胞質蛋白提取試劑盒、生物素3′末端標記試劑盒(89818)、化學發光emsa 試劑盒(78833)均購自 pierce 公司。nf?κb p65 sirna干擾試劑盒購自cell signaling technology公司，碘化吡啶pi購自美國sigma公司。

1.2 方法

1.2.1 sirna的轉染及效率檢測 按照cell signaling technology公司sirna干擾試劑盒說明書的要求，進行轉染。在轉染前，ec9706(5×104) 和eca109(6×104)按一定細胞數鋪于6孔板中，使用無抗生素的培養基培養24h。將含有sirna的轉染試劑或熒光素標記的對照sirna與細胞共孵育5h后，加入新鮮培養基孵育24h。用日本nikon公司顯微熒光攝像/照相系統檢測熒光素標記的對照sirna在ec9706細胞中的轉染效率并照相。

1.2.2 胞漿、胞白的制備 按照細胞核和細胞質蛋白提取試劑盒說明書，分別提取細胞質、細胞白，bradford 法檢測蛋白質的含量，-70℃保存。

1.2.3 western blot測定蛋白的表達 轉染p65sirna72h后，從ec9706和eca109細胞中取細胞質蛋白，與預染的蛋白質分子量標準一起上樣。檢測p65和非靶向mapk蛋白表達，及細胞周期蛋白cyclin d1的表達，經12%sds?page分離，電轉到硝酸纖維膜上。5%的脫脂奶粉tbst溶液封閉2h，抗體按1∶100 孵育4℃過夜，tbst溶液洗滌10min×3次，硝酸纖維膜分別與辣根過氧化物酶標記的二抗(1∶50 000)室溫孵育1h后，tbst溶液洗滌10min×3次，dab顯色。實驗重復三次。

1.2.4 凝膠電泳遷移率(electrophoretic mobility shift assay，emsa)檢測nf?κb與 dna的結合活性 ec9706和eca109細胞轉染p65sirna 72h后，收集轉染細胞和未轉染細胞提取細胞白，檢測轉染前后p65與dna結合活性的變化，方法如下：采用生物素3′末端標記法將nf?κb探針5′?agt tga ggg gac ttt ccc agg c?3′，3′?tca act ccc ctg aaa ggg tcc g?5′進行標記。將細胞核提取物(10μg)與生物素標記的探針在20μl的緩沖液(10m tris?hcl，ph 8.5，0.5 mm edta，5mm mgcl2，1m kcl，0.05% np?40，2.5% glycerol，1μg/μl poly (di·dc) and 0.2μg/μl bsa)中充分結合，行6%非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳后，采用毛吸轉移法轉移至帶正電荷的尼龍膜上，120mj紫外交聯5min。生物素標記的dna探針與hrp標記的親和素之間相結合，通過化學發光，顯影，定影。

1.2.5 流式細胞儀檢測細胞周期 轉染和未轉染p65 sirna的食管鱗癌細胞，在50ml培養瓶中培養，5?fu單獨或聯合應用，進行試驗分組和處理，作用48h后，收集細胞;1 000 r/min離心5min，棄去上清;用pbs洗兩遍，離心后棄去，加入70%冰乙醇固定，4℃過夜;上機前，1 000 r/min離心5min，棄去乙醇，pbs洗三遍;加入1ml pbs制成細胞懸液，加rnasea(終濃度50μg/ml)，室溫放置1h;調整細胞濃度為1×106，加1ml pi(100μg/ml)，避光30min，上機檢測細胞周期，每個樣本檢測10 000個細胞。

2 結果

2.1 sirna轉染食管鱗癌細胞ec9706的效率

將熒光素標記的對照sirna，在同樣條件下轉染到ec9706細胞中，置37℃、5%co2孵育箱內培養48h，通過熒光顯微鏡觀察轉染效率，見圖1。sirna轉染食管鱗癌細胞的效率可達90%以上。

2.2 食管鱗癌細胞轉染p65sirna后p65蛋白的表達水平

western blot檢測細胞中p65的蛋白表達水平，見圖2。結果表明，與未轉染p65 sirna的ec9706和eca109細胞相比，轉染后的ec9706和eca109細胞，p65蛋白的表達水平下調，而非靶向蛋白mapk的表達無影響。

2.3 食管鱗癌細胞轉染p65sirna后，nf?κb與κb位點結合活性的改變

ec9706和eca109細胞轉染p65sirna72h后，收集各組細胞提取細胞白，emsa檢測nf?κb與dna結合活性的變化。結果發現，與未轉染p65 sirna的ec9706和eca109細胞相比，轉染p65 sirna的ec9706和eca109細胞中，nf?κb與dna的結合活性明顯下降，見圖3。提示：p65 sirna可以抑制p65的表達，下調nf?κb與靶基因的結合活性。

2.4 p65sirna阻斷nf?κb信號通路下調cyclind1的表達

食管鱗癌細胞ec9706和eca109在轉染p65 sirna72h后，分別提取細胞總蛋白檢測細胞周期cyclin d1蛋白的表達情況。結果表明，與未轉染的細胞相比，cyclin d1的表達在轉染72h后開始下降，見圖4。

2.5 p65sirna單獨或聯合5?fu對食管鱗癌ec9706和eca109細胞周期的影響

食管鱗癌細胞ec9706和eca109按以下方法分組：未轉染組;轉染p65 sirna72h組;單獨使用5?fu組;轉染p65 sirna48h后，使用5?fu治療24h組。各組細胞使用pi染色，以未轉染組為對照，檢測細胞周期變化情況。結果顯示，ec9706和eca109在轉染p65 sirna后，g0/g1期的細胞開始增加，同時s期的細胞逐漸減少;當轉染細胞聯合使用5?fu時，g0/g1期的細胞明顯增加，同時s期的細胞明顯減少，見表1、2。

3 討論

研究表明，活化的nf?κb信號通路存在于多種人類腫瘤中，作者以往的研究已證實在兩種食管鱗癌細胞中存在有激活的nf?κb信號通路[5]。但是，激活的nf?κb信號通路在食管鱗癌細胞的增殖及對化療藥的耐受性等機制中是否起作用，尚不清楚。本研究使用rna干擾技術，特異性的阻斷nf?κb亞單位p65的表達，研究nf?κb信號通路在食管鱗癌的發生發展中的作用。western blot實驗中，將終濃度為50nm的p65 sirna分別轉染ec9706和eca109細胞，持續作用72h，檢測p65的蛋白表達水平，結果發現，在轉染72h后，與未轉染細胞相比，p65的蛋白表達水平也明顯下降，而非靶向抗體mapk的表達水平未受到影響。表1 p65 sirna轉染前后與5?fu單獨或表2 p65 sirna轉染前后與5?fu單獨或聯合

活化的nf?κb可以進入到核內，與下游調控基因上共同的κb序列結合，參與細胞的增殖、轉化、浸潤及抗凋亡。抑制nf?κb信號通路的活性，最終是抑制nf?κb與κb的序列結合，阻斷它促進下游基因表達的功能。本研究采用凝膠滯留實驗檢測nf?κb與dna的結合，結果發現，在轉染72h后，nf?κb與dna的結合活性明顯下降。以上實驗結果表明，p65 sirna可以高效的轉染到食管鱗癌細胞中，特異性的抑制目的基因p65在mrna和蛋白水平上的表達，導致nf?κb與dna結合能力下降，從而抑制nf?κb信號通路的活化。

cyclin d1的高表達存在于多種腫瘤中，如mega等[6]的研究發現，在食管鱗癌組織中，cyclin d1和e2f1的高表達會促進腫瘤的發展，導致病人的預后欠佳。在研究中國南方的食管癌組織中發現，cyclin d1的高表達存在于61%的樣本中，提示cyclin d1的表達是食管癌發生的早期事件，并在腫瘤的進展中cyclin d1的表達不斷積累[7]。本研究采用western blot法，檢測轉染p65sirna，阻斷nf?κb信號通路后，是否能夠下調nf?κb下游基因cyclin d1的表達。將終濃度為50nm的p65 sirna分別轉染ec9706和eca109細胞，72h后收集細胞總蛋白，結果發現，與未轉染細胞相比，轉染細胞中cyclin d1的表達受到抑制。本研究還采用流式細胞儀檢測食管鱗癌細胞在轉染前后及單獨或聯合應用5?fu后，對細胞周期的影響。ec9706和eca109在轉染p65 sirna后，g0/g1期的細胞開始增加，s期的細胞逐漸減少;當轉染細胞聯合使用5?fu時，g0/g1期的細胞明顯增加，同時s期的細胞明顯減少。以上這些結果表明，由于cyclin d1是細胞周期進行中一個重要的調節者，當使用p65 sirna阻斷食管鱗癌細胞中nf?κb信號通路時，cyclin d1的表達下調，腫瘤細胞被停滯在g1期，提示cyclin d1是受nf?κb調節的一個重要的下游基因，nf?κb可以通過對cyclin d1的調控來促進食管鱗癌細胞的增殖。p65 sirna阻斷食管鱗癌細胞中nf?κb信號通路并聯合使用5?fu，可以明顯抑制食管鱗癌細胞的增殖，使更多細胞停滯在g1期，減少細胞的分裂。

因此，激活的nf?κb信號通路在食管鱗癌細胞的增殖及耐藥中起著重要的作用，通過轉染p65 sirna可以特異性的阻斷nf?κb信號通路，抑制食管鱗癌細胞的增殖，增加細胞對化療藥的敏感性，提示nf?κb信號通路可以成為食管癌基因治療中一個強有力的作用靶點。

【參考文獻】

[1] wang jh，huang qk，chen mx. the role of nf?κb in hepatocellular carcinoma cell[j]. chin med j, 2003,116(5):747?752.

[2] yu hg，yu ll，yang y. increased expression of rela/nuclear factor?kappa b protein correlates with colorectal tumorigenesis[j]. oncology, 2003,65(1):37?45.

[3] nair a，venkatraman m，maliekal tt. nf?κb is constitutively activated in high?grade squamous intraepithelial lesions and squamous cell carcinomas of the human uterine cervix[j]. oncogene, 2003, 22(1):50?58.

[4] takahashi y, nishikawa m, kobayashi n, et al. gene silencing in primary and metastatic tumors by small interfering rna delivery in mice: quantitative analysis using melanoma cells expressing firefly and sea pansy luciferases[j]. j control release, 2005, 105(3):332?343.

篇10

【關鍵詞】 心肌肌鈣蛋白I；超敏C反應蛋白；急性心肌梗死

1 材料與方法

1. 1 儀器 美國強生全自動生化分析儀

1. 2 試劑 超敏C反應蛋白試劑（英科新創科技有限公司， 生產批號：APRK001）。心肌肌鈣蛋白I試劑（太原市川至生物有限公司， 生產批號：111123）。

1. 3 病例選擇 AMI組：選擇本院心內科患者中確診為AMI的患者80例， 男49例， 女31例。對照組：本院的健康體檢者40例。

1. 4 實驗方法 采用免疫透射比濁法對患者血清中心肌肌鈣蛋白I的含量進行檢測， 同時采用乳膠凝集比濁法對其血清中超敏C反應蛋白的含量進行檢測并比較。

1. 5 統計學方法 檢測結果用χ2 檢驗進行比較， P

2 實驗結果

2. 1 患者血清中cTnI和hsCRP的檢測結果AMI組cTnI陽性：男42人， 女28人；hsCRP陽性：男38人， 女27人：而對照組cTnI陽性：男2人， 女0人；hsCRP陽性：男4人， 女3人.AMI組和對照組男性和女性患者檢測結果為陽性的人數比較， 男性患者比女性患者有升高的趨勢。

2. 2 cTnI陽性和hsCRP陽性與cTnI+hsCRP陽性患者比較AMI組患者人數80人， cTnI陽性70人， hsCRP陽性65人， cTnI+hsCRP陽性76人；對照組患者人數40人， cTnI陽性2人， hsCRP陽性7人， cTnI+hsCRP陽性9人。cTnI和hsCRP的檢測在AMI組中的陽性率均明顯高于對照組， 有顯著性差異。

2. 3 cTnI陽性率和hsCRP陽性率與cTnI+hsCRP陽性率的比較AMI組患者人數80人， cTnI陽性率88%， hsCRP陽性率81%， cTnI+hsCRP陽性率95%；對照組患者人數40人， cTnI陽性率5%， hsCRP陽性率18%， cTnI+hsCRP陽性率23%， AMI組中cTnI+hsCRP檢測的陽性率明顯高于cTnI和hsCRP單獨檢測的陽性率。

3 討論

本研究表明當某一患者為疑似急性心肌梗死時， 應該同時進行cTnI和hsCRP兩項指標的測定。①當測定結果為cTnI陽性， hsCRP陰性時， 此人有患AMI的趨勢， 同時結合臨床， 診斷疾病；②當檢測結果為hsCRP陽性， cTnI陰性且患者有典型的AMI臨床癥狀時， 此人有患AMI的趨勢， 同時選用其他心肌損傷標志物輔助診斷疾病；③當檢測結果為cTnI和hsCRP同時升高時， 應該引起臨床足夠重視， 此人患AMI的幾率很大， 應及時對患者進行治療（注意：以上情況時， hsCRP含量增高應排除創傷、感染、炎癥， 外科手術和腫瘤浸潤等除心肌損傷原因之外可引起其升高的因素）。綜上所述， cTnI與hsCRP兩個指標聯合檢測對AMI早期診斷有重要意義， 有助于提高AMI的檢出率和診斷的準確性。

參考文獻

[1] 崔杰峰，潘柏申.急性心肌梗死血清酶標志物沿革.上海醫學檢驗雜志， 2000，15（1）：13-14.