導(dǎo)語：小議胎兒性別鑒定辦法與現(xiàn)狀一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

摘要：優(yōu)生優(yōu)育是當(dāng)今社會提高人口質(zhì)量的方針政策。如何實現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育是人類將長期研究的課題。隨著遺傳學(xué)與分子生物學(xué)研究進(jìn)展，已發(fā)現(xiàn)許多遺傳性疾病與性別有關(guān)。所以，對有遺傳病傾向的胎兒實行性別鑒定，以便早期實行選擇性地終止妊娠，是降低此類遺傳病患病率，提高整個社會人口質(zhì)量的途徑之一。目前，關(guān)于胎兒性別鑒定的方法有多種，本文主要介紹胎兒性別鑒定方法的基本原理、優(yōu)缺點，為進(jìn)一步探討胎兒性別控制提供參考。

關(guān)鍵詞：胎兒性別鑒定x-連鎖遺傳聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)

前言

迄今,已發(fā)現(xiàn)的x連鎖遺傳病有200多種。包括x連鎖隱性遺傳病和x連鎖顯性遺傳病。常見的x連鎖隱性遺傳病有血友病、紅綠色盲、假肥大型肌營養(yǎng)不良（DMD），先天性丙種球蛋白缺乏癥等。此類病的致病基因由攜帶者母親傳給兒子。攜帶者女性與正常男性所生的男孩一半發(fā)病，一半正常，而女孩表型一般正常，為預(yù)防患兒出生，可保留女胎，流產(chǎn)男胎。而x連鎖顯性遺傳病遺傳性腎病、抗維素D佝僂病，男性患者與正常女性結(jié)婚，兒子正常，女兒都患病，通過性別鑒定，可保留男胎，流產(chǎn)女胎[1]。產(chǎn)前胎兒性別早期鑒定具有重要的社會意義。

二、胎兒性別鑒定的標(biāo)本種類目前用于細(xì)胞遺傳學(xué)性別鑒定的標(biāo)本有多種。（1）羊水：可以在妊娠16-20周，經(jīng)羊膜腔穿刺抽取10ml左右，收集羊水細(xì)胞。（2）絨毛膜細(xì)胞：可以在妊娠6-12周，經(jīng)陰道取絨毛膜細(xì)胞。（3）臍帶血：可以通過在B超引導(dǎo)下抽取臍帶血[2]。（4）孕婦母親外周血：近來有人發(fā)現(xiàn)采集6-41周孕婦母親外周血5ml-10ml，進(jìn)行連續(xù)密度梯度離心富集胎兒紅細(xì)胞[3]。

三、胎兒性別鑒定的方法：目前關(guān)于胎兒性別鑒定的方法主要有五種。（一）傳統(tǒng)的顯微鏡細(xì)胞染色質(zhì)分析法[1,4]此種方法將胎兒細(xì)胞通過特殊甲苯胺蘭染色液或硫堇染色液和阿的平染色液染色，觀察細(xì)胞內(nèi)有無X、Y染色體。核膜的內(nèi)緣有無一塊染色較深、大小為1um左右呈半月形的小塊，緊靠核膜，即為x小體。如果細(xì)胞核中有一發(fā)熒光的圓形或橢圓形的亮點，有如初秋夜空的北斗星，直徑約0.3um，即為Y小體，Y小體陽性診斷為男胎。此種方法不需要特殊的儀器，但結(jié)果受取材中細(xì)胞數(shù)、培養(yǎng)與染色效果及觀察細(xì)胞的數(shù)量有關(guān)，不易標(biāo)準(zhǔn)化，靈敏度不高。（二）B超技術(shù)這種技術(shù)較為安全，通過B超儀直接觀察胎兒的生殖器，此方法有較高的準(zhǔn)確性，但要求胎兒發(fā)育程度較高，生殖器基本形成，妊娠達(dá)4個月以上。（三）核型分析技術(shù)通過收集羊水細(xì)胞并對其人工培養(yǎng)，進(jìn)行染色體顯帶，性染色體XX型為女性；XY型為男性。此方法取材不方便，有較大的風(fēng)險，且費時，必須由訓(xùn)練有素的人員完成。(四)熒光原位雜交技術(shù)(FISH)有人根據(jù)母胎之間存在有微量血液交換，母親體內(nèi)存在有胎兒來源的有核紅細(xì)胞，而且胎兒紅細(xì)胞的形態(tài)、核形、胞漿著色與母親紅細(xì)胞不同，并有特異的血紅蛋白γ和ε鏈，通過X、Y染色體特異熒光標(biāo)記探針可鑒定胎兒紅細(xì)胞是來源于男性胎兒還是女性胎兒。此方法的特異性可達(dá)100%，靈敏度隨孕齡增加而增加[5]。但此方法需要較昂貴的流式細(xì)胞分析儀，操作也不易掌握，只有特定的科研人員能完成。但也有人[6]認(rèn)為從母親外周血中抽取胎兒細(xì)胞進(jìn)行產(chǎn)前診斷的可能性很小,因為胎-母轉(zhuǎn)移細(xì)胞數(shù)少，僅占母親細(xì)胞的0.0035%-0.008%胎兒有核紅細(xì)胞到達(dá)母體需要的妊娠的時間也在10周以上。（五）PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）技術(shù)從醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)的角度，性別是由個體性染體組成決定的，其中Y染色體起決定性的作用。這是因為Y染色體帶有睪丸決定因子。

90年代在Y染色體短臂上成功地定位和克隆了性別決定區(qū)（sexdetermineregionoftheYhromosome,SRY）基因[7]，近年來的研究表明，性別的決定與分化是一個以SRY基因為主導(dǎo)的多個基因參與的有序而復(fù)雜的調(diào)控過程，已發(fā)現(xiàn)參與這一過程的基因至少有7種，即SRY，SOX9,某種原因AMH,WT-1,SF-1,DAX-1,MIS基因，這些都為胎兒性別鑒定奠定了分子遺傳學(xué)基礎(chǔ)。隨著PCR技術(shù)的成熟，許多科研人員試圖應(yīng)用PCR技術(shù)進(jìn)行胎兒性別的鑒定。主要有如下幾種方法：（1）利用羊水或絨毛細(xì)胞，擴增Y染色體特異基因片斷如SRY、DYZ-1、DYS14、DAZ進(jìn)行定性分析[8,9]；（2）根據(jù)母親外周中含有少量胎兒細(xì)胞，提取母親外周血有核細(xì)胞（淋巴細(xì)胞），利用特異引物擴增Y染色體上特異系列，如果有Y染色體特異系列產(chǎn)物，胎兒即為男性，否則為女性[10]。（3）利用母親外周血血細(xì)胞或血漿，擴增X、Y染色體同源性基因如Amelogenin，利用擴增片斷電泳條帶數(shù)量進(jìn)行定性分析，兩條帶為男性，一條帶為女性[11]。(4)最近有報道利用母親外周血漿[12,13]，采用熒光實時定量PCR（RQ-PCR）技術(shù)擴增Y染色體特異基因片斷如SRY進(jìn)行胎兒性別鑒定的報道。VecchioneG[3]根據(jù)胎兒外周血血漿基因片段較母親短這一特點，通過一定密度梯度液進(jìn)行分離后，用X染色體短串連重復(fù)序列對26例進(jìn)行實時定量PCR分析，結(jié)果與傳統(tǒng)的染色體核型分析一致。

展望

建立一種胎兒性別鑒定常規(guī)方法具有重要的社會意義。作為常規(guī)方法，必須簡單、可靠、實用，價廉、安全。在上述諸方法中,無論是B超還是染色體核型分析，需妊娠時間較長（一般在16周以上），實施終止妊娠時，給孕婦身體影響較大[4]。經(jīng)穿刺術(shù)采集標(biāo)本，風(fēng)險大、操作煩鎖，方法不易掌握，而利用胎兒紅細(xì)胞的方法又因為母親體內(nèi)胎兒紅細(xì)胞僅占0.0035%-0.008%，存在靈敏度低的缺點。PCR技術(shù)由其技術(shù)原理和特點，在眾多方法中最具有優(yōu)勢，它有較高靈敏度和特異性。但由于PCR敏感性高，會出現(xiàn)非特異擴增，或PCR體系的不合理會導(dǎo)致擴增失敗，都會影響實驗的準(zhǔn)確度，但可以通過使用內(nèi)參照或巢式PCR技術(shù)，很好地解決了非特異性擴增和假陰性問題[12]。目前報道中，由于標(biāo)本來源、靶系列位點、引物系列、PCR類型的差異，診斷的特異性和靈敏度、準(zhǔn)確度有所不同。有的研究樣本較少,關(guān)于性別早期診斷的可靠性還沒見報道，PCR應(yīng)用于胎兒性別鑒定是一種有前景但技術(shù)尚未成熟，有待進(jìn)步探索。我們課題小組正朝此方向試圖探索進(jìn)行胎兒早期性別鑒定的條件研究。相信，隨著研究的深入，一種安全、無創(chuàng)傷性、較高，且易于標(biāo)準(zhǔn)化和自動化的成熟PCR方法，將取代傳統(tǒng)方法，真正實現(xiàn)胎兒早期性別鑒定。

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