乙型肝炎病毒檢測分析論文

時(shí)間:2022-06-19 09:00:00

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乙型肝炎病毒檢測分析論文

論文關(guān)鍵詞:前S2抗原;HBV-DNA;乙型肝炎病毒標(biāo)志物

論文摘要:目的:探討乙肝病毒前S2抗原(pre-S2Ag)的檢測及其臨床意義。方法:對188例標(biāo)本采用ELISA法進(jìn)行乙型肝炎病毒標(biāo)志物fHBVM1及pre-S2Ag檢測,并對其中162例標(biāo)本應(yīng)用熒光定量PCR法檢測HBV-DNA。結(jié)果:162例血清標(biāo)本同時(shí)檢測HBV-DNA和pre-S2Ag,兩者檢出率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=2.78,P>0.05)。HBeAg(+)與HBeAb(+)組之間pre-S2Ag陽性率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=28.03,P<0.005)。HBeAg(+)組、HBclgM(+)組pre-S2Ag陽性率為100%,HBSAg(+)的肝癌組pre-S2Ag陽性率達(dá)95.0%,結(jié)果明顯高于HBV-DNA(-)組18.4%,P值均<0.005。結(jié)論:pre-S2Ag是反映病毒感染與復(fù)制的指標(biāo),與臨床病情活動有關(guān),可作為療效和預(yù)后的觀察指標(biāo),能完善和補(bǔ)充乙肝病毒血清標(biāo)志物的檢測。

我國是乙型肝炎病毒(HepatitiSBViruS,HBV)感染的流行區(qū),乙型肝炎病毒是引起病毒性肝炎最常見的溶血性病毒,不僅人群感染率高。而且有些HBV感染可能由于外周耐受,T細(xì)胞反應(yīng)低下、抗原呈遞抑制、選擇性免疫抑制、病毒基因表達(dá)下調(diào)或基因變異等導(dǎo)致T細(xì)胞識別障礙,容易轉(zhuǎn)為慢性感染。部分患者可演變?yōu)楦斡不踔猎l(fā)性肝癌。不同的HBV血清免疫標(biāo)志物模式提示不同的臨床意義,HBV-DNA是判定HBV感染者病毒是否復(fù)制和當(dāng)前有無傳染性的主要指標(biāo),了解免疫學(xué)和分子生物學(xué)標(biāo)志物間的關(guān)系對臨床診斷和治療很有價(jià)值。據(jù)估計(jì)無癥狀的乙肝病毒攜帶者達(dá)1.2億,乙肝患者3000多萬,其中15%~25%的患者將死于慢性肝病(肝癌、肝硬化),給人類健康帶來極大危害。為了能及時(shí)、準(zhǔn)確地診斷,以指導(dǎo)治療及判斷預(yù)后,乙肝病毒的檢測指標(biāo)日益增多。文獻(xiàn)資料顯示,pre-S2Ag在乙肝HBSAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)模式中陽性檢出率最高,抗HBSAg(+)、抗HBe(+)、抗HBe+模式中次之,其他模式較低。本文就pre-S2Ag陽性率與HBV-DNA、HBVM檢測結(jié)果進(jìn)行比較分析,旨在探討pre-S2Ag檢測的臨床意義,現(xiàn)總結(jié)分析報(bào)道如下:

1.資料與方法

1.1標(biāo)本來源

搜集本院2006年3~12月門診和入院患者188例,其中同時(shí)檢測HBVM及HBV-DNA共162例:另外急性乙肝患者6例,乙肝表面抗原陽性并臨床診斷為肝癌患者20例。

1.2g~試劑

HBVM、HBcIgM試劑由某有限公司提供;pre-S2Ag試劑由某市肝病試劑研究中心提供,以上均采用ELISA法檢測;HBV-DNA試劑購自某有限公司,結(jié)果以≥500拷貝/ml為陽性。以上操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3檢測儀器

意大利希亞克(SEAC)公司的全自動免疫分析儀一愛麗絲及HBV-DNA測定由我市人民醫(yī)院用國外羅氏公司的全自動熒光PCR擴(kuò)增儀。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

分析計(jì)量資料、計(jì)數(shù)資料比較分別使用t檢驗(yàn)和x2檢驗(yàn),所有數(shù)據(jù)用SPSS10.0forWindowS統(tǒng)計(jì)軟件包處理。

2.結(jié)果

2.1pre-S2Ag與HBV-DNA及乙型肝炎病毒標(biāo)志4h(HBVM)之間的結(jié)果比較

3.討論

慢性HBV感染常對部分肝細(xì)胞有長期持續(xù)性損傷,但損傷程度與HBV-DNA水平無明顯正相關(guān),機(jī)體對HBV的免疫應(yīng)答是造成肝組織破壞及肝功能異常的主要機(jī)制。pre-S2Ag是乙肝病毒外殼中蛋白的一部分,是HBSAg肽鏈N末端前附加的55個氨基酸序列,其暴露于HBV囊膜外層,也是病毒的表面抗原。HBV-DNA是衡量乙肝病毒復(fù)制最靈敏、最精確的證據(jù),是判斷患者有無傳染性最直接的指標(biāo)。表2中,HBV-DNA與pre-S2Ag檢測結(jié)果采用配對資料x2檢驗(yàn),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=2.78,P>0.05),與文獻(xiàn)報(bào)道相同。pre-S2Ag具有多聚人血清白蛋白受體(PHSA-R),能與PH—SA結(jié)合,由于肝細(xì)胞表面也有PHSA-R,HBV能通過血循環(huán)中存在的PHSA的介導(dǎo),吸附到肝細(xì)胞表面,最后由胞飲作用進(jìn)入肝細(xì)胞內(nèi),因此,病人血清檢出pre-S2Ag表示HBV在肝細(xì)胞中復(fù)制。

乙肝患者血清中存在HBeAg是經(jīng)典的HBV復(fù)制及評估其傳染性的標(biāo)志物。本組資料HBeAg(+)的標(biāo)本中的pre-S2Ag陽性率為100%,同時(shí)HBclgM(+)的急性乙肝患者pre-S2Ag檢出率為100%,同樣表明pre-S2Ag的存在和病毒復(fù)制及臨床病情活動有關(guān)。表3中,HBeAg(+1組與HBeAbf+1組與pre-S2Ag檢出率比較(x2=28.03,P<0.005),說明兩組pre-S2Ag檢出率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。HBeAb(+)組pre-S2Ag陽性率低于HBeAg(+)組,HBeAg向HBeAb轉(zhuǎn)換表示病毒復(fù)制減少,傳染性變?nèi)酰砻鱬re-S2Ag轉(zhuǎn)陰是病情好轉(zhuǎn)、傳染性減弱的指標(biāo)。隨著HBV-DNA(+)到HBV-DNA(-).HBeAg向HBeAb轉(zhuǎn)換的過程,其pre-S2Ag陽性標(biāo)本吸光度(A值1均值由1.535→1.087→0.734逐漸降低(P<0.05),同時(shí)在肝癌組pre-S2Ag陽性標(biāo)本A均值為1.362,HBcIgM(+)組pre-S2AS陽性標(biāo)本A均值為1.305,兩疾病組proS2Ag陽性標(biāo)本A均值也很高,表明高滴度的pre-S2Ag與病情活動有關(guān),而低滴度的pre-S2Ag預(yù)示HBeAg的消失或病情好轉(zhuǎn)。

有資料表明,在HBV無癥狀攜帶者中。如果同時(shí)查出pre-S2Ag為陽性,說明病毒在體內(nèi)還比較活躍,并沒有被清除,肝臟還有潛在的病理損傷可能,此類患者更易演變?yōu)楦斡不蚋伟1敬螌?shí)驗(yàn)中HBSAg(+)的肝癌患者組,其pre-S2Ag陽性率達(dá)95%,與文獻(xiàn)報(bào)道相符。在HBV-DNA(-)的標(biāo)本中,pre-S2Ag陽性率為18.4%,主要原因是pre-S2Ag不僅存在于病毒顆粒表面,也出現(xiàn)在非傳染性的球形顆粒表面,具有調(diào)節(jié)對S蛋白的免疫應(yīng)答反應(yīng)及控制病毒裝配等功能。也可能在病情好轉(zhuǎn)、傳染性減弱時(shí)存在低滴度的pre-S2Ag,而HBV-DNA水平低而未能檢出。同時(shí)也發(fā)現(xiàn)HBSAg(-)的標(biāo)本,pre-S2Ag有5.9%的陽性率,對此類似報(bào)道極少,可能由于S基因和前S基因盡管位于同一開放閱讀框內(nèi)(ORF),但它們的啟動信號不同,彼此可以獨(dú)立表達(dá),導(dǎo)致S蛋白和前S蛋白速率和含量不相同。

綜上所述,本次資料顯示,pre-S2Ag的表達(dá)是反映病毒感染與復(fù)制的指標(biāo),pre-S2Ag在反映病情活動和預(yù)后轉(zhuǎn)歸方面優(yōu)于HBSAg。血清pre-S2抗原滴度的改變常先于疾病臨床過程和ALT的改變,并且其檢出率和血清水平均隨疾病的活動度增加而增加,且在不同的隨訪時(shí)間其陰轉(zhuǎn)率均高于HBSAg。急性乙型肝炎患者pre-S2抗原陰轉(zhuǎn)越早。預(yù)后越好,是病毒清除的最早跡象,反之,pre-S2持續(xù)陽性,將發(fā)展至慢性肝炎。有人認(rèn)為,對于基層受實(shí)驗(yàn)條件限制無法開展PCR的醫(yī)院,直接開展pre-S2Ag檢測來代替HBV-DNA,我們認(rèn)為不妥,兩者檢測的內(nèi)容不同,它們之間存在互補(bǔ)。pre-S2Ag可作為乙肝病毒標(biāo)志物的補(bǔ)充,并完善乙肝病毒血清標(biāo)志物的檢測。