白及甘露聚糖抗胃潰瘍研究論文
時間:2022-11-15 02:02:00
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【摘要】[目的]觀察白及甘露聚糖的抗炎、鎮(zhèn)痛及抗實驗性胃潰瘍作用。[方法]從白及中分離白及甘露聚糖。采用二甲苯誘導(dǎo)小鼠耳廓腫脹法、小鼠毛細血管通透性進行抗炎試驗;采用小鼠醋酸扭體法、熱板法進行鎮(zhèn)痛實驗觀察;采用冷水應(yīng)激、幽門結(jié)扎等方法進行胃潰瘍試驗。[結(jié)果]白及甘露聚糖對小鼠耳廓腫脹有明顯對抗作用;對小鼠毛細血管通透性有一定對抗作用;白及甘露聚糖能明顯抑制熱板和醋酸所致小鼠疼痛,減少熱板引起的小鼠疼痛反應(yīng)和減少扭體次數(shù)。大鼠幽門結(jié)扎實驗顯示,白及甘露聚糖(3mg/只)能有效降低潰瘍指數(shù)(P<0.05);大鼠應(yīng)激性潰瘍實驗顯示,白及甘露聚糖(3mg/只)能有效降低潰瘍指數(shù)(P<0.01)。[結(jié)論]:白及甘露聚糖具有良好抗炎和一定鎮(zhèn)痛作用及對實驗性胃潰瘍有較好治療作用。
【關(guān)鍵詞】白及甘露聚糖抗炎鎮(zhèn)痛胃潰瘍
白及為多年生草本植物,是常用的止血藥物,研究表明,白及塊莖中含大量粘膠類物質(zhì),一般認(rèn)為,自芨的止血作用正是與其所含粘膠類成分有關(guān)[13]。本文擬對白及甘露聚糖抗炎鎮(zhèn)痛及抗胃潰瘍藥理作用進行研究。
1材料
(1)藥品與試劑:白及購自浙江省中醫(yī)院。雷尼替丁膠囊:由杭州民生藥廠生產(chǎn),批號20070112,為本實驗西藥陽性對照藥。阿斯匹林:由無錫阿斯特拉公司產(chǎn),批號20070318。(2)動物:ICR種小鼠,雌雄各半,體重18~22g。SD種大鼠,雌雄各半,體重200~220g。均由浙江中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。
2方法
2.1白及甘露聚糖的提取白及塊莖烘干、破碎,用95%乙醇連續(xù)抽提兩次,殘渣干燥后,在殘渣中加入蒸餾水浸泡2h,不斷攪拌,水浴抽提2次,合并抽提液,離心除沉淀,上清液濃縮至小體積,加入三倍量95%乙醇,4℃靜置過夜,用Sevag法除去蛋白質(zhì),真空干燥得白及粗多糖。用甲醇分級沉淀和DEAE纖維素柱層析得白色干燥甘露聚糖粉末。
2.2白及甘露聚糖鎮(zhèn)痛抗炎作用研究
2.2.1白及甘露聚糖對小鼠扭體的影響[4]ICR小鼠,雌雄各半,隨機分成6組,按照白及甘露聚糖高劑量組4mg/只、中劑量組2mg/只、低劑量組1mg/只,阿斯匹林組8mg/只,空白對照組(等容積水)灌胃給藥15d,末次灌胃給藥1h后,腹腔注射0.6%醋酸(HAC),0.2ml/只,記錄15min內(nèi)動物扭體次數(shù)。
2.2.2白及甘露聚糖對小鼠熱板反應(yīng)的影響[4]ICR小鼠,雌雄各半,隨機分成6組,按照白及甘露聚糖高劑量組4mg/只、中劑量組2mg/只、低劑量組1mg/只,阿斯匹林組8mg/只,空白對照組(等容積水)灌胃給藥15d,末次給藥后15、30、60min分別將小鼠放在(55±0.5)℃的熱板上,測定小鼠痛閾值。如60sec小鼠仍無反應(yīng),其痛閾以60sec計算,記錄實驗數(shù)據(jù)。
2.2.3白及甘露聚糖對小鼠耳廓腫脹的影響[4]ICR小鼠,雌雄各半,隨機分成6組,按照白及甘露聚糖高劑量組4mg/只、中劑量組2mg/只、低劑量組1mg/只,阿斯匹林組8mg/只,空白對照組(等容積水)灌胃給藥15d,末次給藥0.5h后,將二甲苯20μl滴涂于左耳,15min后將動物處死,用直徑8mm打孔器在左、右耳相同部位打孔,分別稱重,計算重量差值,記錄實驗數(shù)據(jù)。
2.2.4白及甘露聚糖對小鼠毛細血管通透性的影響[4]ICR小鼠、雌雄各半,隨機分成6組,按照白及甘露聚糖高劑量組4mg/只、中劑量組2mg/只、低劑量組1mg/只,阿斯匹林組8mg/只,空白對照組(等容積水)灌胃給藥15d,末次給藥后0.5h,尾靜脈注射10%伊文氏藍生理鹽水溶液0.2ml,再腹腔注射醋酸(HAC)1ml,30min后取腹腔液于620nm測光密度,以光密度值作組間統(tǒng)計學(xué)處理,記錄實驗數(shù)據(jù)。
2.3白及甘露聚糖對胃潰瘍的治療作用
2.3.1白及甘露聚糖對幽門結(jié)扎性潰瘍的影響[4]SD大鼠,雌雄各半,隨機分成5組,按照白及甘露聚糖高劑量組12mg/只、中劑量組6mg/只、低劑量組3mg/只,阿斯匹林組70mg/只,空白對照組(等容積水)連續(xù)灌胃15d,在末次給藥前48h禁食,自由飲水,末次給藥1h后,用乙醚麻醉動物,打開腹腔,結(jié)扎幽門。手術(shù)18h后,開腔取胃,向胃腔內(nèi)注入1%甲醛6ml,將胃浸入1%甲醛中,10min后沿胃大彎剪開胃,觀察胃部的潰瘍情況,記錄胃部潰瘍點數(shù),以潰瘍點數(shù)為指數(shù)計算潰瘍抑制百分率和潰瘍發(fā)生百分率。
2.3.2白及甘露聚糖對應(yīng)激性潰瘍的影響[4]SD大鼠,雌雄各半,隨機分成5組,按照白及甘露聚糖高劑量組12mg/只、中劑量組6mg/只、低劑量組3mg/只,雷尼替丁組6mg/只,空白對照組(等容積水),連續(xù)灌胃給藥15天,在末次給藥前25h禁食自由飲水,在禁食至24h,各組末次給藥,將動物垂直浸入25℃水中,深度至動物劍突,24h后取出處死,結(jié)扎幽門和賁門后取出胃。向胃內(nèi)注入1%甲醛10ml,再將胃浸泡于1%甲醛液中10min。沿胃大彎剖開,觀察潰瘍情況,拍照記錄,記錄胃粘膜損傷長度,并以胃粘膜損傷長度總和為潰瘍指數(shù)。
2.4統(tǒng)計學(xué)處理采用t檢驗,所有數(shù)據(jù)以x±s表示。
中國論文聯(lián)盟-3結(jié)果
3.1白及甘露聚糖鎮(zhèn)痛作用研究在小鼠扭體實驗和熱板疼痛反應(yīng)實驗結(jié)果見表1。
表1白及甘露聚糖鎮(zhèn)痛作用(略)
與空白對照比較,*P<0.05,**P<0.01
3.2白及甘露聚糖抗炎作用研究小鼠耳闊腫脹實驗和小鼠毛細血管通透性實驗結(jié)果見表2。
表2復(fù)方蜂膠片對小鼠抗炎作用的影響(略)
與空白對照比較,*P<0.05,**P<0.01
3.3白及甘露聚糖對幽門結(jié)扎性潰瘍的影響在幽門結(jié)扎性實驗中,以潰瘍點數(shù)為指數(shù)計算潰瘍抑制百分率,計算結(jié)果見表3。
表3白及甘露聚糖對大鼠幽門結(jié)扎潰瘍的影響(略)
與空白對照比較,*P<0.05,**P<0.01
3.4白及甘露聚糖對應(yīng)激性潰瘍的影響在應(yīng)激性潰瘍實驗中,潰瘍指數(shù)計算結(jié)果見表4。
表4白及甘露聚糖對大鼠應(yīng)激性潰瘍的影響(略)
與空白對照比較,*P<0.05,**P<0.01
4討論
目前治療PU的藥物取得很大進展,但因目前使用的藥物存在不同程度的毒副作用,使很多患者無法接受長期治療。因此,各國學(xué)者仍在努力尋找療效好、毒副作用小的新型抗?jié)兯幬?。多糖是一類天然高分子化合物具有多種生物活性,而且?guī)缀鯚o毒。近些年,學(xué)者們陸續(xù)發(fā)現(xiàn)某些多糖具有明顯的抗?jié)兓钚?,為抗消化性潰瘍藥物的研發(fā)提供了一個廣闊的前景[7]。
白及“生肌治瘡,胃中邪氣、…痱緩不收”,局部應(yīng)用即有止血收斂作用。臨床常用于創(chuàng)傷性治療,也廣泛應(yīng)用于胃潰瘍的臨床治療,但相關(guān)實驗研究甚少。白及中含豐富的白及膠質(zhì),但對白及膠質(zhì)中富含的白及多糖的研究尚未見相關(guān)藥理報道。前期文獻報導(dǎo),甘露聚糖臨床研究發(fā)現(xiàn)具有較好抗胃潰瘍作用[8]。本實驗再次確證白及甘露聚糖具有抗動物胃潰瘍作用。
白及可以提高創(chuàng)面羥脯氨酸的量,促進創(chuàng)面組織中纖維細胞、血管內(nèi)皮細胞的增生,提高創(chuàng)傷巨噬細胞的量,這些均可以促進創(chuàng)面的愈合。在本研究中,白及甘露聚糖在鎮(zhèn)痛試驗中對于醋酸引起的扭體反應(yīng)具有明顯的抑制作用,對于熱板引起的小鼠疼痛反應(yīng)具有明顯的延后作用。這一藥理實驗結(jié)果明確顯示了白及甘露聚糖具有明顯的鎮(zhèn)痛作用。在抗炎試驗中,我們可以看到白及甘露聚糖能明顯抑制二甲苯引起的小鼠耳片腫脹,這說明白及甘露聚糖同樣具有抗炎作用。白及甘露聚糖很可能也是通過抗炎鎮(zhèn)痛作用而起到抗胃潰瘍的作用。
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