到手香水提液研究論文
時間:2022-01-21 05:26:00
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1材料
1.1藥材及水提液的制備和揮發(fā)油的提取到手香,2001年引種于陽西縣原中山醫(yī)科大學(xué)藥材基地,在中山大學(xué)校園內(nèi)繁殖。到手香水提液最大濃度濃縮液(稠膏)的制備:取到手香地上部分,晾干剪碎后,精密稱取碎葉,加一定體積蒸餾水,浸泡后加熱煮沸提取,冷卻后用雙層紗布過濾,濾渣用蒸餾水清洗3次并過濾,棄去濾渣,合并濾液。濾液再用布氏漏斗墊雙層濾紙抽濾,得到濾液為到手香水提液。在溫度為70℃、壓力為-0.08MPa、轉(zhuǎn)速為60r/min的條件下,減壓蒸餾濃縮至最大濃度稠膏,并保證稠膏不會凝結(jié),得到到手香水提液最大濃度濃縮液(稠膏)[3],濃度為4.706g/ml。供小鼠最大耐受量實(shí)驗(yàn)用。揮發(fā)油的提?。喝〉绞窒愕厣喜糠郑栏杉羲楹螅芊Q取碎葉50.0g于1000ml蒸餾瓶中,加入600ml蒸餾水,按《中國藥典》規(guī)定的方法揮發(fā)油測定法[4]提得黃色油狀物,出油率為1.2%。取揮發(fā)油適量,用食用油稀釋至各個濃度,供霍恩氏法LD50測定用。
1.2動物昆明小鼠,體重18~22g,普通級標(biāo)準(zhǔn),合格證號:粵檢證字第2003A030號,由原第一軍醫(yī)大學(xué)(現(xiàn)更名為南方醫(yī)科大學(xué))實(shí)驗(yàn)動物中心提供。
2方法
2.1到手香水提液急性毒性實(shí)驗(yàn)(最大耐受量測定)選擇健康昆明小鼠,體重在18~22g共20只,雌雄各半,按性別分兩組,每組10只,稱重和標(biāo)記,分開飼養(yǎng),實(shí)驗(yàn)前和實(shí)驗(yàn)的觀察期內(nèi),均按正常飼料條件飼養(yǎng)。
灌胃給藥:灌胃給藥小鼠1次,0.8ml/20g(到手香水提液濃度4.706g/ml)。連續(xù)觀察14d,詳細(xì)記錄動物的反應(yīng)情況,包括飲食、運(yùn)動狀況、排泄?fàn)顩r等各個指標(biāo),計(jì)算出總給藥量(折合生藥量g/kg)。
2.2到手香揮發(fā)油急性毒性實(shí)驗(yàn)(霍恩氏法LD50測定)選擇健康昆明小鼠20只,體重18~22g,稱重、標(biāo)記,隨機(jī)分4組,每組5只,雌雄分別為2,3只。各組小鼠分別灌胃給藥0.4ml/20g(給藥前禁食16h,不禁水)。給藥后連續(xù)觀察7d,詳細(xì)記錄動物的反應(yīng)情況,包括飲食、運(yùn)動狀況、排泄?fàn)顩r、死亡時間及當(dāng)時狀況等各個指標(biāo)[5]。
到手香揮發(fā)油濃度:用食用油將到手香揮發(fā)油稀釋至各個濃度:0.05,0.1075,4.65,10.0ml/ml,給藥劑量遞增比為1013=2.15,分別為1.0,2.15,4.62,10.0ml/kg。
3結(jié)果
3.1到手香水提液急性毒性實(shí)驗(yàn)(最大耐受量測定)小鼠雌雄各10只給藥后,蜷縮少動,但很快就恢復(fù)正常,小鼠無其它異常行為,7d無小鼠死亡,且各方面狀態(tài)正常,體重增至24~28g,14d后亦無死亡,且各方面狀態(tài)正常,體重增至32~37g,將小鼠處死,解剖觀察,未見腦、心、肝、肺、脾、腎、胃、腸有肉眼可見的明顯異常,毛色正常。結(jié)果見表1。表1到手香水提液最大耐受量實(shí)驗(yàn)結(jié)果(略)
小鼠對到手香水提物(折算為生藥量)最大耐受量:4.706g/ml×0.8ml/20g=188.2g/kg。
3.2到手香揮發(fā)油急性毒性實(shí)驗(yàn)(LD50測定)第1組、第2組各有一只在第2天死亡,其余4只除在前兩天活動略為減緩?fù)?,各?xiàng)指標(biāo)均正常,且7d后亦無死亡;第3組在兩天內(nèi)全部死亡,第4組在3h內(nèi)全部死亡(結(jié)果見表2)。后兩組動物在給藥后蜷縮少動,進(jìn)食飲水都大為減少,甚至不進(jìn)食不飲水,直至死亡未見有掙扎等任何動作,死亡后解剖觀察動物,未見腦、心、肝、肺、脾、腎、胃、腸有肉眼可見的明顯異常,毛色亦正常。
查霍恩氏法LD50值計(jì)算用表(劑量遞增法測定LD50值計(jì)算用表A1),劑量1=1.00ml/kg、劑量2=2.15ml/kg,劑量3=4.65ml/kg,劑量4=10.0ml/kg,組1,組2,組3,組4死亡動物數(shù)為1,1,5,5,對應(yīng)的LD50值為2.37ml/kg,可信限為1.42~3.95ml/kg。按到手香揮發(fā)油提取率1.2%折算為生藥,則小鼠對到手香揮發(fā)油(折算為生藥)LD50為197.5g/kg,可信限為118.3~329.2g/kg。
4討論
小鼠對到手香水提液(折算為生藥量)最大耐受量:188.2g/kg,對動物無明顯急性毒性。按照20g小鼠與70kg人的體表面積之比為:387.9(山東中藥學(xué)院《中藥藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)講義》1994),轉(zhuǎn)換成人對到手香水提物(折算為生藥量)最大耐受量:1460.1g/70kg,因此可以初步推斷,對人來說到手香水提物無明顯急性毒性。
霍恩氏法測定小鼠對到手香揮發(fā)油LD50值為:2.37ml/kg,可信限為1.42~3.95ml/kg。轉(zhuǎn)換成人對到手香揮發(fā)油(折算為生藥量)LD50為:18.39ml/70kg,說明到手香揮發(fā)油對人也有一定的毒性。表2到手香揮發(fā)油急性毒性正式實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)(略)
到手香作為一個在國內(nèi)沒有收錄而民間有使用的藥用植物,對其毒理學(xué)研究,包括水提液急性毒性實(shí)驗(yàn)(最大耐受量測定)和揮發(fā)油急性毒性實(shí)驗(yàn)(LD50測定),可為到手香使用提供安全的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),對到手香的實(shí)際應(yīng)用有著重要的意義。同時這是對到手香進(jìn)行進(jìn)一步研究與藥效學(xué)研究提供理論基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。
【參考文獻(xiàn)】
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[5]寧立人,洪恂.現(xiàn)代中藥學(xué)大辭典[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2001:392.
【摘要】目的對到手香進(jìn)行毒理學(xué)研究,包括到手香水提液急性毒性實(shí)驗(yàn)和到手香揮發(fā)油急性毒性實(shí)驗(yàn)。方法將到手香水提液以最大濃度4.706g/ml,最大劑量0.8ml/20g對小鼠灌胃給藥,測定到手香水提液對小鼠的最大耐受量。采用霍恩氏(Horn)法,將小鼠隨機(jī)分4組,按1.0,2.15,4.62,10.0ml/kg劑量對小鼠灌胃給藥,測定到手香揮發(fā)油對小鼠半數(shù)致死量。結(jié)果到手香水提液(折算為生藥量)對小鼠最大耐受量:188.2g/kg,到手香揮發(fā)油對小鼠LD50為:2.37ml/kg。結(jié)論到手香水提液對小鼠無明顯急性毒性,到手香揮發(fā)油對小鼠有一定的急性毒性。
【關(guān)鍵詞】到手香急性毒性最大耐受量半數(shù)致死量
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