男寶片的健脾作用探討論文
時間:2022-02-09 10:44:00
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1材料與儀器
1.1藥品與試劑男寶片,石河子市中醫醫院研制,新疆維吾爾藥廠生產,每片相當于含生藥0.41g,批號為990421,使用時將藥片研磨,加雙蒸水配成每毫升含藥0.025,0.05,0.1g或0.035,0.07,0.14g的混懸液,古漢養生精片,湖南古漢集團股份有限公司產品,每片0.4g,(97)衛藥準字Z-125號,具補腎益脾、健腦安神等功能,批號990425,使用時將藥片研磨,加雙蒸水配成每毫升含藥0.05或0.07g的混懸液,氫化可的松,湖北制藥廠出品,鄂衛藥準字(1981)第001709號,每支5ml/25mg,使用時灌胃0.2ml/只,戊巴比妥鈉,上海行知化工廠出品,批號951019,使用時用生理鹽水配成1%的溶液,40mg/kg腹腔注射,乙烯雌酚,上海第九制藥廠產品,批號980403,使用時用麻油稀釋配成200ng/ml的溶液,黃體酮注射液,上海第九制藥廠產品,批號980402,使用時用麻油稀釋配成500μg/0.1ml的溶液,實驗前4h皮下注射500μg/只。生大黃液,稱取一定重量的大黃浸泡后用溫火煎煮,紗布過濾后,在80℃濃縮成每毫升含生藥1g的藥液;D-木糖臨床診斷試劑,南京建成生物工程研究所提供,批號990826;D-木糖(D-Xylose)Sigma,進口分裝,批號980812,北京化學試劑公司提供;地塞米松磷酸鈉注射液,江蘇省溧陽市制藥廠,5mg/ml安瓿,蘇衛藥準字(1987)218212-10號,批號951025,;Alsever`s液,葡萄糖2.05g、檸檬酸鈉8.0g、氯化鈉4.2g加雙蒸水至1000ml溶解后,高壓消毒,作為綿羊紅細胞(SRBC)保存液;都氏液,碳酸氫鈉1.0g,氰化鉀0.05g,高鐵氰化鉀0.2g加雙蒸水1000ml溶解,用于測定血紅蛋白;綿羊紅細胞(SRBC)自治區醫學實驗動物中心提供;免疫球蛋白G、M試劑,上海長征醫學科學有限公司提供;RPMI-1640培養基,美國GIBCO產品;刀豆蛋白A(ConA),美國Sigma公司產品。植物血球凝集素(PHA),美國Sigma公司產品;牛血清,北京華美公司提供;四甲基偶氮唑(MTT),北京華美公司提供;Hank`s液,南京建成生物工程研究所提供;酵母多糖,Sigma公司產品,使用時用PBS溶液配成濃度為10mg/ml的混懸液;魯米諾,Sigma公司產品,使用時準確稱取1.77mg加PBS至4.8ml溶解,調節pH值為7.2備用;金黃色葡萄球菌,新疆醫科大學微生物學教研室提供,菌號26003;I125睪酮放射免疫分析測定盒北京北方生物技術研究所產品,(94)衛藥準字R-29號,批號990611。
1.2動物昆明種,NIH小鼠,Wistar大鼠,均由新疆維吾爾自治區醫學實驗動物中心提供,二級,合格證書:新疆醫動字(94),16-001號。
2方法與結果[1~3]
2.1對小鼠小腸推進性運動的影響(墨汁法)選取小鼠57只,雌雄兼用,體重(18.9+1.0)g。隨機分成5組,即正常對照組、古漢養生精片組(0.7g/kg,ig,qd×10d)、男寶片小劑量組(0.5g/kg,ig,qd×10d)、男寶片中劑量組(1.0g/kg,ig,qd×10d)、男寶片大劑量組(2.0g/kg,ig,qd×10d)。給藥第10天動物禁食12h,用50%碳素墨汁生理鹽水溶液0.2ml/10g體重灌胃,20min后脫頸椎處死,立即剖腹,將消化管幽門至直腸末端完整地摘出,不加牽引平鋪于玻璃板上,輕輕將小腸拉成直線,測量腸管長度作為小腸總長度。以幽門至墨汁前沿的距離為“墨汁在腸內推進距離”,用公式計算墨汁推進百分率,并注意觀察各組小鼠小腸是否增大。
墨汁推進率(%)=墨汁在腸內推進距離(cm)腸管全長(cm)×100%
結果,3個不同劑量組的男寶片能降低小腸墨汁推進率,提示該藥對腸蠕動有抑制作用。結果見表1。表1男寶片對小鼠小腸運動的影響(墨汁法)(略)
2.2對生大黃所致脾虛小鼠耐常壓缺氧的影響選取小鼠80只,雌雄兼用,體重(20.4±1.3)g,隨機分8組,即正常對照組、長正常組、脾虛模型組、長脾虛模型組、古漢養生精片組(0.7g/kg,ig,qd×10d)、男寶片小劑量組(0.7g/kg,ig,qd×10d)、男寶片中劑量組(0.7g/kg,ig,qd×10d)、男寶片大劑量組(0.7g/kg,ig,qd×10d)。正常組和長正常組不進行任何處理,其余組給生大黃液(1g/只,ig×8d),第8天造成脾虛小鼠模型。模型建立后正常組和脾虛模型組小鼠進行常壓缺氧實驗,其余6組繼續給生大黃或和給藥治療,治療第9天,末次給藥后1h將小鼠放入盛有15g鈉石灰的廣口瓶內(體積200ml),用凡士林涂抹瓶口蓋嚴,使之不漏氣,立即計時,以呼吸停止為指標,觀察小鼠因缺氧而死亡的時間。
結果,3個不同劑量的男寶片明顯延長脾虛小鼠常壓缺氧條件下存活時間,提示該藥有明顯的增強脾虛小鼠耐缺氧能力。結果見表2。表2男寶片對生大黃致脾虛小鼠耐常壓缺氧的影響(略)
2.3對生大黃致脾虛小鼠抗疲勞能力的影響(游泳實驗)選取小鼠60只,雌雄兼用,體重(19.4+1.2)g,隨機分6組,即正常對照組、脾虛模型組、古漢養生精片組、男寶片3個不同劑量組。正常組不進行任何處理,其余5組小鼠ig生大黃藥液1g/只(1ml/只),連續給藥8d,造成脾虛模型。并于第9天起按下述劑量進行治療,同時繼續ig生大黃藥液,即古漢養生精片組(0.7g/kg,ig,qd×9d);男寶片小劑量組(0.5g/kg,ig,qd×9d);男寶片中劑量組(1.0g/kg,ig,qd×9d);男寶片大劑量組(2.0g/kg,ig,qd×9d),治療9d后小鼠各種癥狀消失。第17天末次給藥1h后,在(15±1)℃冷水中進行游泳實驗,以下沉水底5s以上,未能再上浮為死亡指標,記錄小鼠游泳存活時間。
結果,3個不同劑量的男寶片組使脾虛小鼠游泳時間明顯延長。結果見表3。表3男寶片對生大黃致脾虛小鼠耐常壓缺氧的影響(略)
2.4對生大黃所致脾虛耐高溫的影響選取小鼠60只,雌雄兼用,體重(20.7±0.9)g。隨機分6組,即正常對照組、脾虛模型組、古漢養生精片組、男寶片3個不同劑量組。正常組不進行任何處理,其余5組小鼠ig生大黃藥液1g/只(1ml/只),連續給藥8d,造成脾虛模型。并于第9天起按下述劑量進行治療,同時繼續ig生大黃藥液,即古漢養生精片組(0.7g/kg,ig,qd×9d);男寶片小劑量組(0.5g/kg,ig,qd×9d);男寶片中劑量組(1.0g/kg,ig,qd×9d);男寶片大劑量組(2.0g/kg,ig,qd×9d),治療9d后小鼠各種癥狀消失。第17天末次給藥1h后,將小鼠每只分別放入45℃恒溫孵育箱1h,以每組小鼠死亡數為指標進行耐高溫試驗。結果進行χ2檢驗。
結果,3個不同劑量的男寶片組可提高脾虛小鼠45℃環境中的生存能力,尤其是大劑量組作用明顯。結果見表4。表4男寶片對生大黃致脾虛小鼠耐高溫能力的影響(略)
2.5對生大黃所致脾虛耐寒能力的影響選取小鼠90只,雌雄兼用,體重(20±2)g。隨機分9組,即正常對照組、長正常對照組、脾虛模型組、長脾虛模型組、古漢養生精片組(0.7g/kg,ig,qd×9d)、男寶片小劑量組(0.5g/kg,ig,qd×9d)、男寶片中劑量組(1.0g/kg,ig,qd×9d)、男寶片大劑量組(2.0g/kg,ig,qd×9d)、自然恢復組(生大黃液1g/只,ig×8d)。正常對照組和長正常對照組不進行任何處理,其余組給生大黃液(1g/只,ig×8d),第8天造成脾虛小鼠模型。模型建立后,正常組和脾虛模型組小鼠在-5℃進行耐寒試驗;其余除自然恢復組以外繼續給生大黃或和給藥治療,治療第9天,給藥后1h將小鼠分別放入-5℃恒溫箱2h,以每組小鼠死亡數為指標進行耐寒實驗,結果進行χ2檢驗。
結果,3個不同劑量的男寶片可提高寒冷環境中脾虛小鼠的生存百分率,大劑量組作用更明顯。結果見表5。表5男寶片對生大黃致脾虛小鼠耐高溫能力的影響(略)
2.6對生大黃致脾虛大鼠木糖排泄率的影響選取大鼠60只,雌雄兼用,體重(227±14)g。隨機分6組,即正常對照組、脾虛模型組、古漢養生精片組(0.5g/kg,ig,qd×9d)、男寶片小劑量組(0.35g/kg,ig,qd×9d)、男寶片中劑量組(0.7g/kg,ig,qd×9d)、男寶片大劑量組(1.4g/kg,ig,qd×9d)。正常對照組不進行任何處理,其余組ig生大黃液(1.25ml/100g,qd×8d)造成脾虛。第9天開始加藥治療9天。末次給藥后禁食5h,ig10%木糖溶液4.5ml/只,收集5h尿液,同時尾靜脈采血分離血清,按試劑盒操作要求進行實驗。
結果,模型組大鼠尿木糖排泄率和血清木糖量明顯低于正常組,3個不同劑量的男寶片組與模型組比較尿木糖排泄率和血清木糖水平明顯提高。結果見表6。表6男寶片對生大黃致脾虛大鼠木糖排泄率的影響(略)
2.7對生大黃致脾虛小鼠免疫器官重量的影響選取小鼠72只,雌雄兼用,體重(19.4±1.1)g。隨機分6組,即正常對照組,脾虛模型組、古漢養生精片組、男寶片3個不同劑量組。正常對照組不進行任何處理,其余5組小鼠ig生大黃藥液1.0g/只(1.0ml/只),連續給藥8d,造成脾虛模型(癥狀有便溏、體重減輕、低溫偏低、畏寒等)。并于第9天起按下述劑量進行治療,同時繼續ig生大黃藥液:即古漢養生精片組(0.7g/kg,ig,qd×8d);男寶片小劑量組(0.5g/kg,ig,qd×8d);男寶片中劑量組(1.0g/kg,ig,qd×8d);男寶片大劑量組(2.0g/kg,ig,qd×8d)。末次給藥后1h,摘眼球放血處死,摘出胸腺及脾臟稱重。以胸腺和脾臟重量(mg)與體重10g之比為胸腺指數和脾臟指數。
結果,脾虛組與正常對照組比較,胸腺指數和脾臟指數明顯降低,而男寶片3個不同劑量組與模型組比較,其胸腺指數和脾臟指數明顯增加,其中大劑量組基本恢復正常。結果見表7。表7男寶片對生大黃致脾虛小鼠免疫器官重量的影響(略)
2.8對生大黃致脾虛小鼠體溫變化的影響選取小鼠72只,雌雄兼用,體重(19.4±1.1)g。隨機分6組,即正常對照組、脾虛模型組、古漢養生精片組、男寶片3個不同劑量組,并測定肛溫作為正常體溫。正常組不進行任何處理,其余5組小鼠ig生大黃藥液1.0g/只(1.0ml/只),連續給藥8d,造成脾虛模型(癥狀有便溏、體重減輕、體溫偏低、畏寒等)后測定肛溫作為造模后體溫。并于第9天起按下述劑量進行治療,同時繼續ig生大黃藥液:即古漢養生精片組(0.50g/kg,ig,qd×8d);男寶片小劑量組(0.35g/kg,ig,qd×8d);男寶片中劑量組(0.70g/kg,ig,qd×8d);男寶片大劑量組(1.40g/kg,ig,qd×8d),分別于給藥后第4天和第8天再各測肛溫1次。
結果,脾虛模型組與正常對照組比較小鼠體溫下降,而男寶片3個劑量與模型組比較,治療第8天其體溫明顯升高。見表8。表8男寶片對生大黃致脾虛小鼠體溫變化的影響(略)
2.9對生大黃致脾虛小鼠體重變化的影響選取小鼠72只,雌雄兼用,體重(19.1±1.1)g。隨機分6組,即正常對照組、脾虛模型組、古漢養生精片組、男寶片3個不同劑量組。正常組不進行任何處理,其余5組小鼠ig生大黃藥液1.0g/只(1.0ml/只),連續給8天,造成脾虛模型,并于第9天起按下述劑量進行治療,同時繼續ig生大黃藥液:即古漢養生精片組(0.7g/kg,ig,qd×8d);男寶片小劑量組(0.5g/kg,ig,qd×8d);男寶片中劑量組(1.0g/kg,ig,qd×8d);男寶片大劑量組(2.0g/kg,ig,qd×8d)。觀察造模后、治療第4天和第8天小鼠體重變化。
結果,脾虛模型組與正常組比較小鼠體重顯著下降,而男寶片3個劑量組與模型比較,治療第8天其體重明顯增加。結果見表9。表9男寶片對生大黃致脾虛小鼠體重的影響(略)
3討論
男寶片經上述4項實驗,在以生大黃造成大鼠、小鼠脾虛模型中,本片劑可使其耐常壓缺氧、低溫游泳、耐高溫、耐寒時間明顯延長;使免疫器官重量(脾臟和胸腺)、體溫和體重均高于模型組;使脾虛大鼠尿木糖排泄率提高等均提示本片劑有健脾、糾正脾虛癥狀的作用。對正常小鼠腸推進性運動有抑制作用,依據理氣健脾藥物多有抑制胃腸運動,少部分興奮胃腸運動的原則,本實驗結果符合健脾理氣藥的作用規律。本實驗為男寶片健脾作用提供了藥理學依據。
【參考文獻】
[1]徐叔云,卞如濂,陳修,等.藥理實驗方法學,第2版[M].北京:人民衛生出版社,1991:155.
[2]陳奇.中藥藥理研究方法學,第2版[M].北京:人民衛生出版社,1996:335,438,442,443,768,779,1029,1023.
[3]中華人民共和國衛生部藥政管理局.中藥新藥研究指南(藥學、藥理學、毒理學)[M].1999
【摘要】目的研究男寶片的補腎健脾作用。方法實驗觀察男寶片對小鼠和大鼠的抗應激反應以及免疫器官重量的影響,探討男寶片的健脾作用。結果男寶片能抑制小鼠小腸推進性運動,即由(88.4±4.3)%降為(71.1±9.0)%~(75.5±5.0)%。以ig大黃(1.0g/只)qd×8d造成脾虛模型(下同),以使脾虛小鼠耐常壓缺氧時間、低溫游泳時間、耐高溫(45℃)時間、耐寒時間(-5℃)明顯延長;使脾虛小鼠的脾臟和胸腺等免疫器官重量增加(中劑量優佳);治療4~8d后使小鼠體溫和體重高于模型組。以1.25g/100g大黃煎液給大鼠ig.qd×8d造成脾虛模型,可使脾虛大鼠尿木糖排泄率和血清木糖高于單純脾虛模型組。結論男寶片有健脾功效。
【關鍵詞】男寶片健脾生大黃小鼠
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