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摘要：目的觀察冬蟲夏草對小鼠抗體形成細胞的作用。方法用100%濃度冬蟲夏草浸出液定期給小鼠灌胃，然后進行小鼠抗體產生能力檢測、特異玫瑰花環結形成細胞檢測（SRFC）、血清IgG檢測。結果用藥組以上3項免疫學指標均增高。結論冬蟲夏草有明顯促進抗體形成細胞的作用。

關鍵詞：冬蟲夏草；免疫功能；小鼠

冬蟲夏草，始載于《本草綱目拾遺》。因其冬季為蟲，夏季為草，故名。為麥角菌科真菌冬蟲夏草Cordycepssinensis(Berk.)Sacc，寄生蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲上的子座及幼蟲尸體的復合體。主產于四川阿壩藏族自治州松潘、理縣、茂汶羌族自治縣、甘孜藏族自治州、德格、道孚、青海玉樹、果洛藏族自治州及同德、同仁，云南中甸、德欽、麗江納西族自治縣等地，均為野生。主要功效：益腎補肺，止血化痰，止嗽定喘。本實驗主要研究冬蟲夏草對抗體形成細胞作用，旨在為冬蟲夏草的臨床應用提供科學依據。

一、器材與方法

1.1儀器和藥物

低溫冷凍離心機（Beckman,美國）；美國Multiskan產全自動酶標儀；恒溫水浴箱（上海）；電泳儀（上海）；100目不銹鋼網。冬蟲夏草（購于附屬醫院中藥房），取100g加水1000ml，文火煎煮2h，去渣濃縮為100ml（濃度為100%）備用。

1.2動物及分組

取BALB/C純系小鼠24只，體重18～22g，雌雄各半，隨機分為兩組，每組12只，Ⅰ組為生理鹽水對照組，Ⅱ組為藥物實驗組。

1.3方法

Ⅰ組用生理鹽水灌胃，1次/d，0.5ml/(次·只)；Ⅱ組用冬蟲夏草液灌胃，1次/d，0.5ml/(次·只)，共灌10次。

1.4檢測項目

1.4.1定量溶血分光光度測定法（QHS）

本法體外測定B細胞產生分泌抗體裂解紅細胞所釋放的血紅蛋白量（以OD值表示），其結果可反映機體體液免疫功能。實驗第5天分別將5%的綿羊紅細胞0.2ml注入各組小鼠腹腔內。第11天頸椎脫臼處死小鼠，常規取脾臟，然后脾細胞計數，調整細胞濃度至1×107/ml，平均每組每只小鼠設3支試管，每管依次加脾細胞懸液，0.2%綿羊紅細胞（SRBC），1∶10新鮮豚鼠血清（補體）各1ml混勻。另外分別設補體、脾細胞以及SRBC對照管各3支，置37℃水浴溫育1h，2000r/min離心5min。取上清液用96孔細胞培養板于全自動酶標儀450nm波長處測OD值，作為QHS反應值。

1.4.2特異玫瑰花環形成細胞檢測（SRFC）

取脾細胞0.1ml（1×107/ml），1%SRFC0.1ml，小牛血清0.1ml，試管內混勻，4℃放置2h，加結晶紫溶液20μl，計數500個淋巴細胞，求出SRFC/106脾細胞的形成率。

1.4.3血清IgG檢測

采用對流免疫電泳實驗，摘除小鼠眼球取血，分離血清，取不同稀釋度血清10μl加入陰極端瓊脂板孔中，將瓊脂板陽極端孔內加入羊抗鼠IgG(1∶32)10μl，將對流免疫電泳通電30min后觀察結果，以血清最高稀釋度仍有明顯沉淀線為準。結果以稀釋度表示。公務員之家

二、結果

2.1冬蟲夏草對抗體形成細胞的影響

表1結果顯示，用藥組可促進抗體細胞形成，與對照組相比有顯著性差異（P<0.05）。表1冬蟲夏草對抗體形成細胞的影響(略)

2.2冬蟲夏草對SRFC的影響

表2結果顯示，用藥組SRFC產生明顯增強，與對照組相比有非常顯著性差異（P<0.01）。表2冬蟲夏草對SRFC的影響(略)

2.3冬蟲夏草對小鼠IgG的影響

表3結果顯示，用藥組可明顯促進IgG產生，與對照組相比有顯著性差異（P<0.01）。表3冬蟲夏草對小鼠IgG的影響(略)

三、討論

冬蟲夏草是臨床上常用的中藥。現代藥理研究證實，冬蟲夏草能顯著增加小鼠血清溶菌酶的含量，極顯著地提高綿羊紅細胞的滴度，也能提高巨噬細胞的吞噬功能，提高淋巴細胞轉化率和自然玫瑰花環形成率，且能明顯增加血清IgG的含量。尚有抗心肌缺血和心律失常的作用、抗應激作用、抗衰老作用、抗炎作用及抗腎衰作用。本研究重點從細胞及分子水平探討冬蟲夏草對抗體形成細胞，IgG分子的影響。實驗證明，冬蟲夏草能增強小鼠抗體形成（B細胞）活性，促進B細胞分化、增殖為漿細胞；藥物組與對照組相比有顯著性差異（P<0.05），冬蟲夏草組SRFC數目明顯高于對照組，與對照組相比有非常顯著性差異（P<0.01），冬蟲夏草可使小數血清IgG含量增加，與對照組相比有非常顯著性差異（P<0.01）。提示如機體免疫功能下降者可口服冬蟲夏草以增強機體免疫功能，預防某些疾病。本實驗結果為臨床應用冬蟲夏草提供了實驗依據。

【參考文獻】

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