導(dǎo)語：高烏頭藥材生藥學(xué)分析一文來源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

1試驗(yàn)材料

1.1高烏頭藥材。高烏頭分別購(gòu)于甘肅、青海等地，經(jīng)甘肅中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院楊扶德教授鑒定為毛茛科烏頭屬植物高烏頭的干燥根，結(jié)果見表1。1.2儀器與試劑。BT125D電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）；KQ3200DB超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；FW-400A高建萬能粉碎機(jī)（北京科偉永興儀器有限公司）；NikonDS-Ril生物顯微鏡；HHS-11S數(shù)顯恒溫水浴鍋（上海宜昌儀器紗篩廠）；BX51熒光顯微鏡；SHB-3循環(huán)水多用真空泵（鄭州杜甫儀器廠）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；多功能暗箱式紫外分析儀（北京賽百奧科技有限公司）；ATS4自動(dòng)點(diǎn)樣儀、稱量瓶、干燥器等。高烏甲素對(duì)照品（購(gòu)自甘肅神龍藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)20001001，含量97.50%）；冉烏頭堿；三氯甲烷、氨水、正己烷、異丙醇、水合氯醛、甘油、95%乙醇、乙酸乙酯均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1外觀性狀高烏頭根呈圓柱形，上粗下細(xì)，稍扁扭曲不直，有分枝，長(zhǎng)短不一，長(zhǎng)5~20cm，直徑1~4cm。表面棕褐色至棕黑色，粗糙，有時(shí)因后生皮層脫落露出木質(zhì)部，扭裂，頂端有凹陷的莖痕或留有莖的殘基，周圍有時(shí)殘存棕色葉鞘纖維，有明顯的網(wǎng)狀縱向裂隙，有的可見腐朽的空腔，有不規(guī)則縱紋。質(zhì)輕而松脆，易折斷，斷面淡黃棕色，呈蜂窩狀或中空。氣微，味苦。2.2顯微鑒別。2.2.1橫切面顯微鑒別取干燥高烏頭個(gè)子藥材，用水浸泡，待藥材浸透軟后，取直徑為2~4mm根末端，冷凍后徒手切片。將制備好的切片置顯微鏡下觀察，可見木栓層為2~5列木栓化細(xì)胞組成；皮層較寬廣，約占整個(gè)根部的2/3，皮層中有一輪異型維管束環(huán)狀排列，分布在皮層中，維管束均為外韌型；韌皮部細(xì)胞較小，排列緊密，束中形成層細(xì)胞數(shù)列，而束間形成層不明顯；形成層細(xì)胞2~3列；木質(zhì)部導(dǎo)管作徑向排列，直徑14~60μm，異型維管束之間的維管射線寬廣，射線細(xì)胞中夾雜有小型棕色細(xì)胞徑向排列成行；次生維管束呈圓柱形，韌皮部較寬廣。薄壁細(xì)胞中分布大量的淀粉粒及少量的草酸鈣方晶。結(jié)果見圖1。2.2.2粉末鑒別取樣品粉碎過4號(hào)篩，得棕褐色粉末，挑取少許置載玻片上，加2~3滴水合氯醛在酒精燈上透化后，蓋上蓋玻片，置顯微鏡下觀察，可見大量的淀粉粒，多為單粒，呈圓形、類圓形或半圓形，直徑為4~24μm；大粒有明顯的臍點(diǎn)，呈星狀或叉狀，層紋不明顯；復(fù)粒由2~4個(gè)分粒組成。后生皮層組織碎片呈棕褐色，細(xì)胞表面呈多角形或類方形，壁木栓化或木化，有時(shí)細(xì)胞壁彎曲直徑為25~220μm。網(wǎng)紋導(dǎo)管及具緣紋孔導(dǎo)管，直徑為20~45μm。常有棕色塊狀物散在。草酸鈣方晶少見，呈菱形或多邊形。結(jié)果見圖2。2.3薄層鑒別。2.3.1不同提取溶劑的考察取高烏頭藥材粉末2g（過三號(hào)篩）2份，一份加95%乙醇30mL超聲處理（功率300W，頻率40kHz，水溫25℃以下）30min，放冷，補(bǔ)足失重，搖勻，濾過，取續(xù)濾液25mL，40℃以下減壓回收溶劑至干，殘?jiān)尤爰状?mL，溶解，密塞，搖勻；另一份加氨試液3mL，再加入異丙醇-乙酸乙酯（1∶1）混合溶液50mL，稱定質(zhì)量，超聲處理（功率300W，頻率40kHz，水溫25℃以下）30min，放冷，補(bǔ)足失重，搖勻，濾過，取續(xù)濾液25mL，40℃以下減壓回收溶劑至干，殘?jiān)尤爰状?mL，溶解，密塞，搖勻。分別進(jìn)行薄層色譜鑒別。結(jié)果后者色譜斑點(diǎn)更為清晰。2.3.2展開劑系統(tǒng)的選擇分別以二甲苯-甲醇（5∶1）、正己烷-乙酸乙酯-甲醇（10∶8∶2.5）、甲苯-三氯甲烷-甲醇（1∶8∶1）、正己烷-三氯甲烷-甲醇（4∶8∶1）、正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇（5∶6∶8∶1.5）等展開系統(tǒng)進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果顯示以正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇（5∶6∶8∶1.5）為展開劑，置氨蒸氣飽和20min后展開，展開效果較好，斑點(diǎn)集中且分離好，Rf值適中。2.3.3薄層板的選擇分別篩選了硅膠G、硅膠GF254薄層板，結(jié)果顯示選用硅膠GF254薄層板時(shí)斑點(diǎn)清晰。2.3.4不同溫濕度對(duì)薄層色譜的影響考察不同溫濕度對(duì)薄層色譜的影響，結(jié)果表明在溫度為30℃下，相對(duì)濕度在45%~60%，均可使主斑點(diǎn)分離較好，斑點(diǎn)集中、清晰，且比移值變化不大。通過上述條件的考察，得到穩(wěn)定的薄層色譜鑒別條件：取高烏頭藥材粉末各2g（過3號(hào)篩），精密稱定，置具塞錐形瓶中，加氨試液3mL，再加入異丙醇-乙酸乙酯（1∶1）混合溶液50mL，稱定質(zhì)量，進(jìn)行超聲處理（功率300W，頻率40kHz，水溫25℃以下）30min，放冷，補(bǔ)足失重，搖勻，濾過，取續(xù)濾液25mL，40℃以下減壓回收溶劑至干，殘?jiān)尤爰状?mL，溶解，密塞，搖勻，作為供試品。另取冉烏頭堿及高烏頭甲素對(duì)照品，分別加甲醇溶解制成每1mL含1mg溶液，作為對(duì)照品溶液。按照薄層色譜法實(shí)驗(yàn)，分別吸取冉烏頭堿、高烏甲素對(duì)照品、各批次供試品各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇（5∶6∶8∶1.5）為展開劑，置氨蒸氣飽和20min后展開，取出，晾干，分別置紫外光燈（254nm及365nm）下檢視（溫度18~30℃，濕度45%~60%）。供試品色譜，在與對(duì)照品相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，結(jié)果如圖3。

3討論

3.1高烏頭是一味民間常用中藥，有關(guān)其質(zhì)量控制方面的研究鮮有文獻(xiàn)報(bào)道。現(xiàn)有的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)過于簡(jiǎn)單，不能很好地控制其質(zhì)量，本研究從外觀性狀、顯微特征、薄層鑒別等角度對(duì)甘肅、青海等西部特色民間常用中藥高烏頭進(jìn)行了生藥學(xué)研究，為新版《甘肅省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》中高烏頭藥材標(biāo)準(zhǔn)的完善提供了科學(xué)依據(jù)。3.2薄層色譜法用于中藥的鑒別具有快捷、簡(jiǎn)便等諸多優(yōu)點(diǎn)。試驗(yàn)分別考察了正己烷、二甲苯、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇等多種溶劑展開系統(tǒng)，用三氯甲烷-甲醇-氨水（7∶2∶0.5）、二甲苯-甲醇（5∶1）等，經(jīng)過多次試驗(yàn)和篩選，最終確定上述展開條件，證明該條件具有分離度好、斑點(diǎn)清晰、簡(jiǎn)便易行等特點(diǎn)，可用于高烏頭藥材的薄層鑒別分析。3.3高烏頭在功效上與同科同屬的烏頭（川烏、草烏）作用相當(dāng)，但高烏頭基本不含極毒的雙酯型烏頭堿類成分，臨床應(yīng)用比烏頭（川烏、草烏）更加安全。烏頭可以引起動(dòng)物心律失常[18]，而高烏頭則恰恰相反，不但不會(huì)引起心律失常，還具有抗烏頭堿引起的心律失常的作用[6]，這一點(diǎn)值得高度關(guān)注。高烏頭一直作為地方用藥，一方面是由于其標(biāo)準(zhǔn)不夠完善；另一方面是由于民間用藥，產(chǎn)量又小，目前主要用于提取高烏甲素的原料藥材，使用范圍受限，也未能引起重視。如果解決以上問題，高烏頭很有可能代替烏頭藥材，載入藥典標(biāo)準(zhǔn)。

作者:張立軍 戴海蓉 樊秦 夏鵬飛 沈秉學(xué) 李蕓 單位:1.甘肅中醫(yī)藥大學(xué) 2.甘肅省高校中藏藥化學(xué)與質(zhì)量研究省級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室