導(dǎo)語(yǔ)：鉛中毒大鼠幾種血清酶活性逆向變化的初步探討一文來(lái)源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

【關(guān)鍵詞】鉛；血清酶；逆向變化

Primarystudyonreversechangesofenzymeactivitiesinserumofleadpoisonedrat

【Abstract】AIM:Tounderstandthemechanismunderlyingthereversechangesofenzymeactivityinserumofratpoisonedbylead.METHODS:FemaleWistarratswererandomlydividedinto4groups:controlgrouptreatedwithdistilledwater;leadgroupstreatedwith10,30and60mg/kgPbAc2,respectively,ip,onceevery2d,for7times.Subsequently,allanimalsweresacrificedformeasuringtheactivityofALT,AST,ALP,LDHandγGTinserum.TheserumofratstreatedwithdifferentconcentrationofPbAc2(0,30and300μmol/L)wasincubatedin37℃.Threehourslater,theactivitiesofALT,AST,LDH,ALPandγGTintheserumwereassayed.RESULTS:Invivo,comparedwiththecontrolgroup,theactivitiesofAST,γGTinserumweresignificantlyhigher，andtheactivityofALP,LDHinserumweresignificantlylower(P<0.05),andtheactivitiesofALTinserumweresignificantlylowerin10mg/kgPbgroup(P<0.05).Inthehistopathologicalexamination,paredwiththatofthecontrolgroup,invitro,theactivityofALTinserumwassignificantlylower(P<0.05)andtheactivitiesofLDH,ALP,ASTandγGTinserumshowednosignificantinhibition.CONCLUSION:Themechanismofthereversechangesofenzymeactivityinserumisduetothedifferentdegreesofactivityinhibitionbylead.

【Keywords】lead;seroenzyme,reversedchanges

【摘要】目的：實(shí)驗(yàn)研究鉛中毒以闡明血清酶活性逆向變化的機(jī)制.方法：Wistar雌性大鼠隨機(jī)分為4組，對(duì)照組，對(duì)照組10，30和60mg/kg組.醋酸鉛腹腔注射，隔天染毒1次，7次后處死動(dòng)物，取血分離血清，測(cè)血清酶活性.另分別向大鼠血清中加入醋酸鉛使其終濃度為0，30及300μmol/L，37℃孵育3h，測(cè)定血清酶活性.結(jié)果：體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明，隨染鉛劑量的增加，血清ALP與LDH活性變化呈下降趨勢(shì)（P＜0.05）；而γGT及AST活性變化呈上升趨勢(shì)（與對(duì)照組比較，P＜0.05）；ALT活性變化先下降（與對(duì)照組比較，P＜0.05），而后隨鉛劑量的增加而呈上升趨勢(shì).體外實(shí)驗(yàn)表明，鉛對(duì)ALT活性抑制較明顯（與對(duì)照組比較，P＜0.05），而對(duì)LDH，ALP，AST及γGT活性未見(jiàn)有抑制作用.結(jié)論：鉛中毒所引起的部分血清酶活性逆向變化的機(jī)制是由于其活性受到鉛等因素不同程度的抑制所致.

【關(guān)鍵詞】鉛；血清酶；逆向變化

0引言

當(dāng)肝損害發(fā)生時(shí)，肝細(xì)胞中的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)，谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)，乳酸脫氫酶(LDH)，γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γGT)等釋放到血液中，其活力升高，這稱為血清酶活性順向變化.長(zhǎng)期以來(lái)在該理論的指導(dǎo)下，血清酶活力的檢測(cè)成為了診斷肝損害的重要指標(biāo).然而,有時(shí)也發(fā)現(xiàn)肝受損時(shí)血清酶的活性并非均升高，有時(shí)甚至?xí)l(fā)生降低的現(xiàn)象，或無(wú)肝損害時(shí)，出現(xiàn)血清酶活性持續(xù)升高或減低的現(xiàn)象，這稱為血清酶活性逆向變化.我們?cè)谘芯裤U中毒時(shí)發(fā)現(xiàn)了這一現(xiàn)象，為此，作了初步的探討.

1材料和方法

1.1材料醋酸鉛（AR.廣州化學(xué)試劑廠），血清ALT，AST，LDH，ALP及γGT活性測(cè)定試劑盒(上海科華東菱診斷用品有限公司),全自動(dòng)生化分析儀（東芝亞培，日本）.健康成年雌性Wistar大鼠65只,體質(zhì)量(220±15)g，由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供（SCXK桂20030003）.

1.2方法將動(dòng)物隨機(jī)分為4組:對(duì)照組(蒸餾水,n=17),低劑量鉛組（10mg/kg，n=16)，中劑量鉛組（30mg/kg，n=16)和高劑量鉛組（60mg/kg，n=16）.左下腹部以20g/L碘酒消毒皮膚后，3個(gè)實(shí)驗(yàn)組分別給予10，30，60mg/kg體質(zhì)量的乙酸鉛蒸餾水溶液，對(duì)照組給予相同容量的蒸餾水，隔天染毒1次，14d后處死動(dòng)物,測(cè)定各項(xiàng)血清酶指標(biāo)及取肝組織做病理檢查.另將對(duì)照組大鼠的血清混合后，分成3組（n=4），對(duì)照組加入蒸餾水，而實(shí)驗(yàn)組加入醋酸鉛使其終濃度分別為:0，30及300μmol/L.37℃孵育120min后，測(cè)定血清酶活性.血清酶活性測(cè)定方法：ALT（IFCC法）,AST（IFCC法）,LDH（LP法）,ALP（IFCC法）及γGT（IFCC法）.

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：數(shù)據(jù)用x±s表示.組間比較,方差齊時(shí)用方差分析,方差不齊時(shí)用秩和檢驗(yàn).

2結(jié)果

2.1體內(nèi)試驗(yàn)隨鉛劑量的增加，血清ALP和LDH活性而呈下降趨勢(shì)（與對(duì)照組比較，P＜0.05），血清γGT及AST活性變化呈上升趨勢(shì)（與對(duì)照組比較，P＜0.05），血清ALT活性變化先下降（與對(duì)照組比較，P＜0.05），后隨鉛劑量的增加呈上升趨勢(shì)（表1）.

2.2體外試驗(yàn)鉛對(duì)ALT活性抑制較明顯，而對(duì)LDH，ALP，AST及γGT活性未見(jiàn)有抑制作用（表2）.

2.3病理檢查各組肝細(xì)胞未見(jiàn)明顯的細(xì)胞變性或壞死.

表1鉛中毒大鼠血清肝酶活性的變化(略)

aP<0.05vs對(duì)照.

表2體外鉛對(duì)大鼠血清酶活性的影響(略)

aP<0.05vs對(duì)照.

3討論

血清酶活性作為診斷肝細(xì)胞損害的標(biāo)志在毒理學(xué)、藥理學(xué)等研究及臨床應(yīng)用已有很多年的歷史，為肝病的診斷立下了汗馬功勞.然而近年有些報(bào)道表明血清酶活性有時(shí)不能準(zhǔn)確反映肝細(xì)胞的損害，甚至有可能誤診.導(dǎo)致該現(xiàn)象的原因是因?yàn)槲覀儗?duì)血清酶活性的變化規(guī)律缺乏全面的認(rèn)識(shí).

本研究表明，雖然光鏡下各組肝細(xì)胞未見(jiàn)明顯的形態(tài)病理學(xué)變化，但血清酶活性譜已呈現(xiàn)了多樣性的改變.已有人報(bào)道了與本研究相似的結(jié)果，如Todorovic等［1］報(bào)道血清ALP活性在大鼠鉛中毒時(shí)，比對(duì)照組低.崔京偉等［2］發(fā)現(xiàn)TNT組血清ALT和AST活性明顯低于對(duì)照組.韋耀東等［3］在觀察亞急性砷中毒對(duì)大白鼠部分生化指標(biāo)影響時(shí)也發(fā)現(xiàn)血清ALT活性低于對(duì)照.張香莉等［4］采用太安對(duì)大鼠灌胃染毒，結(jié)果表明太安對(duì)肝有一定的損害作用，血清AST活性升高，而ALT活性變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.倪秀雄等［5］選S180荷瘤小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺，結(jié)果表明血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性無(wú)顯著變化，而病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)環(huán)磷酰胺引起肝細(xì)胞點(diǎn)狀及小灶性壞死，壞死區(qū)及匯管區(qū)炎性細(xì)胞浸潤(rùn).

以上這些實(shí)驗(yàn)顯示了中毒組血清酶活性發(fā)生了減低的現(xiàn)象,或即使肝細(xì)胞出現(xiàn)形態(tài)病理學(xué)變化，部分血清酶活性也未升高，這說(shuō)明了血清酶活性逆向變化現(xiàn)象的發(fā)生絕非偶然.

由于血清酶的活性可受酶含量、激活劑和抑制劑等因素的影響，而激活劑和抑制劑等因素應(yīng)當(dāng)是產(chǎn)生酶活性逆向變化現(xiàn)象最直接的因素，因此有些學(xué)者對(duì)此進(jìn)行了研究.如賈秀英等［6］發(fā)現(xiàn)當(dāng)水中鎘離子濃度為32mg/L,64mg/L時(shí)，鯽魚(yú)肝胰臟、腎臟和鰓的谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活性顯著降低.體外試驗(yàn)表明，鎘能直接抑制GPT、GOT的活性，而對(duì)Catalase活性不產(chǎn)生直接影響.戴玉錦［7］也發(fā)現(xiàn)Na+,Ca2+,Mg2+等離子對(duì)ALT有激活作用，而Mn2+,Cu2+和Zn2+等離子則有抑制作用.李勝聯(lián)等［8］報(bào)道新西蘭家兔血清ALT活性明顯受鉛的抑制.為驗(yàn)證鉛對(duì)本次實(shí)驗(yàn)動(dòng)物雌性Wistar大鼠血清酶類是否產(chǎn)生抑制作用，設(shè)計(jì)了體外試驗(yàn)，結(jié)果表明鉛對(duì)血清ALT活性產(chǎn)生了抑制作用（P<0.05）,而對(duì)血清ALP,AST,γGT和LDH活性未見(jiàn)有明顯的抑制作用（P>0.05），提示ALT活性比較容易受鉛的抑制.與其他指標(biāo)相比，血清ALT活性并非理想的鉛所致肝損害血清學(xué)診斷指標(biāo)；而血清γGT及AST活性因其活性不易受鉛的抑制,故不易產(chǎn)生逆向變化,可以認(rèn)為它們是較為理想的鉛所致肝損害血清學(xué)診斷指標(biāo).除鉛等金屬離子影響血清酶活性外,機(jī)體內(nèi)其他非金屬物質(zhì)也可影響血清酶的活性，如劉耕陶［9］等發(fā)現(xiàn)使用Sy801可使小鼠血漿NO升高，ALT及AST活性水平下降，用硝基精氨酸抑制了NO水平，血漿中ALT,AST活性升高.已有報(bào)道表明NO是大鼠血清ALT和AST活性強(qiáng)烈的抑制劑［10］.本研究體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中毒組血清ALP和LDH活性明顯下降（P<0.05），而體外實(shí)驗(yàn)，血清ALP和LDH活性未見(jiàn)有鉛的抑制作用，提示可能存在另外的血清ALP和LDH酶活性逆向變化機(jī)制,即鉛中毒時(shí)血清NO是否升高?它們活性是否受NO等除鉛以外的因素抑制?這有待于進(jìn)一步探討.

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