茄莖中化學成分實驗論文
時間:2022-09-01 07:03:00
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【摘要】目的了解茄莖中所含化學成分的種類和其中蘆丁的含量。方法采用系統提取分離法對茄莖中的化學成分進行提取分離,并對分得的各成分進行鑒定,對茄莖細粉、堿溶酸沉法得到的粗提物和純化后的提取物中蘆丁含量進行測定。結果表明茄莖中含有生物堿、氨基酸、蛋白質、多糖、有機酸和蘆丁,茄莖細粉、堿溶酸沉法得到的粗提物和純化后的提取物中蘆丁的含量分別是0.011%,0.205%和2.62%。結論實驗結果可作為更好地利用茄莖中的化學成分開發新的營養保健產品和藥品的依據。
【關鍵詞】茄莖化學成分提取分離鑒定
茄子為茄科植物SolanummelongenaL.,營養價值極高,具有清熱、活血、消腫等功效,除了富含各種糖類、蛋白質、維生素和鈣、磷、鐵等礦物質外,還含有生物堿、甾體皂苷和黃酮類成分,其中維生素P(蘆丁)的含量較高。蘆丁(rutin)又名蕓香苷,有增強人體細胞間粘著力的作用,可防止毛細血管出血,具有降低兔和人血膽固醇的功效。茄子的果實被人們廣為利用,而對茄莖中化學成分研究尚未見報道。本文僅對茄子的地上莖進行初步化學研究,為茄莖部分的開發利用奠定基礎。
一、儀器與材料
1.1材料茄莖(10月份采集于長春郊區)。
1.2儀器和設備Agilent1200高效液相色譜儀,Agilent1200可變波長檢測器(VWD),Agilent1200數據站,P/N-7725i手動進樣器,G1354A四元梯度泵及G1316A柱溫箱系美國Agilent公司產品。分析柱為Kromasil5-C18柱(250mm×4.6mm)系江蘇漢邦科技有限公司產品,煎煮設備,回流裝置,抽濾裝置,旋轉蒸發儀,離心機,層析柱。
1.3藥品AB-8大孔樹脂(D-101天津市光復精細化工研究所);732型陽離子交換樹脂、717型陰離子交換樹脂、雷氏銨鹽、丙酮、氯仿、硫酸銀、乙醇、硅鎢酸、碘、碘化鉀、次硝酸鉍、鹽酸、鎂粉、α-萘酚、濃硫酸、氧化鈣等均為分析純,甲醇為色譜純,其他試劑為分析純,實驗用水為二次蒸餾水。
二、方法
2.1茄莖中各種成分進行系統提取分離和鑒定
2.1.1提取分離取洗凈干燥粉碎后的茄莖1200g,按照如下工藝進行系統提取分離。
樣品A:
樣品A用1%鹽酸水溶液溶解,除去不溶物后,通過732型陽離子交換樹脂,用水洗滌除去雜質,用2%鹽酸水溶液對樹脂進行洗脫,洗脫液堿化到pH10,用氯仿進行提取,提取液回收氯仿后得粗制結晶A1,氯仿提取后的水溶液或不溶物蒸干后,用乙醇回流提取,趁熱過濾,濾液經濃縮后,冷卻得粗制結晶A2。
樣品B:
樣品B回收乙醇后,用1%酸水溶解,得酸水溶液,然后向酸水溶液中加雷氏銨鹽,濾集生成的沉淀,用少量水洗滌后,溶于丙酮,滴加飽和硫酸銀水溶液到溶液中至不再有沉淀生成為止,濾除沉淀,得丙酮溶液,回收丙酮后即是樣品B。
樣品D:
樣品D乙醇溶液回收乙醇,用5%的碳酸氫鈉溶解后,通過717型陰離子交換樹脂,樹脂風干后,用乙醇進行洗脫,洗脫液回收乙醇后得一粗制黃色結晶。
2.1.2鑒定
樣品A1和A2的鑒定:分別取樣品A1和A2少許,加1%鹽酸水溶液溶解后,各分成3份,分別加入碘-碘化鉀溶液、硅鎢酸溶液和碘化鉍鉀溶液,均有沉淀生成,說明樣品A1和A2中含有生物堿類成分。
樣品B的鑒定:取樣品B少許,加乙醇溶解后,分成3份,分別加入碘-碘化鉀溶液、硅鎢酸溶液和碘化鉍鉀溶液,均有沉淀生成,說明樣品B中含有生物堿類成分。
樣品C的鑒定:①取樣品C約0.2g,置試管中,加10mol·L-1的鹽酸4ml,在沸水中加熱40min,移置蒸發皿內蒸干,殘渣加水約2ml使溶解,濾過,取濾液1滴滴于層析濾紙上,風干后滴加茚三酮丙酮溶液2滴,涼干后呈紫色。剪取此色斑部分置試管中,加硫酸銅溶液2ml,振搖,溶液逐漸顯粉紅色;另取樣品C約0.2g,置試管中,加水溶解后,加福林酚試劑,生成深藍色,說明C中有氨基酸和蛋白質。
②取樣品C少許,置試管中,加α-萘酚混合后,沿試管壁滴加濃硫酸,界面出現棕色環。說明樣品C中含有糖。
樣品D的鑒定:①取本品少許,加乙醇溶解后,pH試紙檢查顯酸性。②在濾紙上滴一滴上述溶液,用溴甲酚綠試液噴灑出現黃色斑點。說明樣品D中含有機酸類成分。
樣品E的鑒定:①取樣品E少許置于試管中,加乙醇2ml溶解,水浴上小心加熱溶解,滴加濃鹽酸2~3滴,再加少許鎂粉,溶液由黃色變為櫻紅色。②取樣品E少許,加水溶解后,加入α-萘酚混勻后,沿試管壁滴加濃硫酸,界面出現棕色環,說明樣品中含有糖或苷(蘆丁)。③取樣品E少許,加乙醇溶解,按照下列條件進行紙色譜鑒定,并與標準品對照,記載Rf值進行比較。
展開劑:正丁醇-醋酸-水(4∶1∶5)上層
顯色劑:氨氣熏
結果表明:樣品和蘆丁標準品均呈棕色斑點,而且Rf值一致。說明該樣品中含有蘆丁。
綜上,樣品A1、A2、B中主要含有生物堿;樣品C沉淀主要含有氨基酸或蛋白質和多糖;樣品D中主要含有有機酸;樣品E沉淀主要含有蘆丁。公務員之家:
2.2茄莖中蘆丁的含量測定
2.2.1色譜條件以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,以甲醇-1%冰醋酸(32∶68)為流動相,檢測波長為257nm,流速為1.0ml/min,柱溫為30℃,進樣量為20μl。
2.2.2對照品溶液的制備精密稱取在120℃減壓至恒重的蘆丁對照品1.2300mg,加甲醇溶解稀釋至10ml溶液。
2.2.3供試品溶液的制備分別精密稱定茄莖細粉、粗提物細粉、分離純化提取物細粉各約0.5g,精密加甲醇25ml,稱定重量,超聲處理(功率100W,40kHz)40min,放冷,再稱定重量,用甲醇補足減失的重量,濾過,取續濾液經0.45μm濾膜(上海興亞凈化材料廠)過濾后備用。
2.2.4測定方法
分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20μl,注入液相色譜儀,測定,即得。
2.2.5結果
樣品測定:按照“2.2”項方法分別測定茄莖細粉、堿溶酸沉法得到的粗提物和純化后的提取物中蘆丁,含量分別為0.011%,0.205%和2.62%。
回收率測定:精密量取蘆丁對照品溶液,加入到一定量已知含量的樣品溶液中,按“2.2”項方法測定,平均回收率是98.5%,RSD=0.71%。
三、結論
本文僅對茄莖系統提取物中的各部分化學成分進行了初步的定性研究,對其中含有的蘆丁作了定量分析,若更好地開發和利用,還需要對每一部分中的成分進行結構研究和定量分析,特別是以活性為指標,進行有效部位和有效成分的篩選和研究。
本課題的研究結果表明,茄莖粗提物具有明顯的降血脂作用,因此,經過深入的研究,茄莖的開發和利用具有廣闊的前景,并將創造出一定的經濟和社會價值。
【參考文獻】
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