千金婦炎舒治療盆腔炎分析論文
時間:2022-02-09 11:09:00
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1器材
1.1藥品及試劑千金婦炎舒為棕色浸膏,1ml浸膏相當于5.33g生藥,由本實驗室自制,批號:060330。推薦人日用量為20.16g生藥/60kg;婦科千金片,株洲千金藥業股份有限公司,批號:20051102。注射用環磷酰胺,江蘇恒瑞醫藥股份有限公司,批號:06033021;伊文思蘭,上海化學試劑公司,批號:F981016;冰醋酸,廣東汕頭市西隴化工廠0605052;印度墨汁,上海長江日用粘合材料廠,批號881120;角叉菜膠,北京西中化工廠,批號000803;戊巴比妥鈉,上海化學試劑公司(進口分裝),批號F20021216;大腸桿菌(CMCC44103)、金黃色葡萄球菌(CMCC26003)、乙型溶血性鏈球菌(CMCC32210)購自江蘇省疾病控制中心。營養瓊脂,北京奧博星生物技術責任有限公司,批號20040915;血瓊脂基礎,杭州天和微生物試劑有限公司,批號20051115。
1.2藥物配制取5.7g/ml千金婦炎舒原液,加蒸餾水配成0.17,0.34,0.68g/ml藥液;取婦科千金片,去除包衣,研碎后加蒸餾水煮沸30min,配成0.1g/ml藥液;混合菌液:取一標準環大腸桿菌(CMCC44103)及金黃色葡萄球菌(CMCC26003)分別密涂法接種于營養瓊脂平板上,置37℃孵箱培養18h;取一標準環乙型溶血性鏈球菌(CMCC32210)密涂法接種于血平板上,置37℃孵箱培養24h。分別用5mlNS沖洗金黃色葡萄球菌培養板,用4ml無菌NS沖洗大腸桿菌及乙型溶血性鏈球菌培養板,收集并充分混勻制成細菌懸液。計數后分別以無菌NS稀釋成1011個/ml。按大腸桿菌:金黃色葡萄球菌:乙型溶血型鏈球菌比例為2∶1∶1制備成混合細菌懸液(2×1011個/ml的細菌數),備用。
1.3動物清潔級KM小鼠及SD大鼠,由河南省實驗動物中心提供。
1.4儀器754紫外可見分光光度計,上海光譜儀器有限公司;3111型CO2孵化箱,ThermoForma;LDZ5-2型離心機,北京醫用離心機廠;PAPER-I型血小板聚集及血凝測定儀,北京世帝科學儀器公司;STEELIEX-R-80粘度計,北京世帝科學儀器公司;電子天平(FA1104N),上海精密科學儀器有限公司;JA-1203上皿電子天平,上海天平儀器廠。
1.5統計方法量反應資料用t檢驗法;質反應資料用χ2檢驗法。
2方法與結果
2.1對混合菌液致大鼠慢性盆腔炎的治療作用取200~220g雌性大鼠64只,其中9只作為空白組,其余動物用40mg/kg戊巴比妥鈉腹腔麻醉后固定,常規消毒打開腹腔,找出右側子宮,在子宮中段進4號針,劃傷子宮內側,注入混懸菌液0.1ml。分層關閉腹腔,正常飼養。30d后,將造模大鼠隨機分為5組:每組11只,各組每日灌胃給藥1次,連續28d。模型組和正常組分別給予等體積NS。停藥后次日,測定下列指標:大鼠體重;血流變;子宮和卵巢臟器系數;病理檢查。結果顯示,千金婦炎舒治療組對大鼠紅細胞壓積與模型組比較未見明顯差異;但均能降低大鼠全血及血漿黏度和血小板最大集聚率,與模型組比較差異顯著(P<0.05,0.01);6.8g/kg組能減小子宮系數及改善模型相應部位病變程度。見表1。
2.2對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響[1]取26~29g雄性小鼠60只,隨機分為5組,每組12只。各組給藥1次/d,連續5d。末次給藥1h后用二甲苯0.03ml涂于小鼠左耳兩側。在致炎1h后處死小鼠,剪下左右兩耳,用打孔器分別在同一部位取下圓耳片,稱重,計算耳殼重量,并比較各組小鼠耳殼腫脹度(左耳殼重-右耳殼重)和腫脹抑制率。結果表明,千金婦炎舒治療組均能減輕小鼠耳殼腫脹度,與空白組比較差異顯著(P<0.05或P<0.01)。結果見表2。
表1千金婦炎舒對大鼠血流變、臟器系數(g/100g體重)及子宮病變程度影響(略)
與空白組比較,△P<0.05,△△P<0.01;與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01。
子宮炎病理學評分標準:(1)腔壁結構有無病變;(2)上皮細胞有無變性壞死;(3)慢性炎細胞浸潤及其程度;(4)內膜有無充血水腫。上述病變根據由輕到重的順序分別記為1分(輕度),2分(中度),3分(重度)。無明顯病變記0分
表2千金婦炎舒對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響(略)
與空白組比較,*P<0.05,**P<0.01;n=12
2.3對小鼠腹腔毛細血管通透性的影響取18~22g小鼠60只,雌雄各半,隨機分為5組,每組12只。各組每日灌胃給藥1次,連續5d。末次給藥1h后,尾靜脈注射0.5%Even''''sblue(0.1ml/10g),隨即腹腔注射0.6%冰醋酸0.2ml/只。20min后脫頸椎處死,ipNS5ml沖洗,剪開腹腔,吸取洗滌液4ml移至試管中并于2500r/min離心5min,取上清液,于590nm處測定A值。結果顯示,千金婦炎舒治療組均能減少小鼠腹腔內依文思藍A值,與空白組比較差異極顯著(P<0.01),表明千金婦炎舒能抑制急性炎癥時毛細血管通透性增加,有抗炎作用。結果見表3。
表3千金婦炎舒對小鼠腹腔毛細血管通透性的影響(略)
與空白組比較,**P<0.01;n=12
2.4對角叉菜膠所致大鼠足腫脹的影響[2]取170~190g雄性大鼠60只,隨機分為5組,每組12只。各組每日灌胃給藥1次,連續5d。末次給藥后1h,將1%角叉菜膠0.1ml注射入右后足跖皮下,然后用容積法分別測量致炎前、致炎后1,2h大鼠右后足踝關節以下部分容積,計算腫脹率及其抑制率。結果顯示,千金婦炎舒治療組均可減小角叉菜膠引起的大鼠足腫脹率,與空白組比較差異顯著(P<0.05或P<0.01),表明千金婦炎舒能抑制角叉菜膠致大鼠足腫脹,有抗炎作用。結果見表4。
表4千金婦炎舒對角叉菜膠致大鼠足腫脹的影響(略)
與空白組比較,*P<0.05,**P<0.01;n=10
2.5對單核-巨噬細胞功能的影響取18~21g小鼠72只,雌雄各半,隨機分為6組,每組12只。各組每日灌胃給藥1次,連續7d。并于給藥第3日開始,空白組每日皮下注射滅菌NS0.1ml/10g,其余各組皮下注射環磷酰胺150mg/kg,連續5d。末次給藥后,立即尾靜脈注射20%的印度墨汁0.1ml/10g,于2min和10min分別眼眶取血20μl,加入盛有2ml0.1%碳酸鈉溶液試管中,于680nm處測其A值。然后處死小鼠,取肝臟、脾臟稱重。計算廓清指數K及吞噬指數α。
K=lgOD2min-lgOD10mint10-t2
a=體重(g)肝脾(g)×K1/3
結果顯示:皮下注射環磷酰胺150mg/kg能使小鼠廓清指數K及吞噬指數α顯著下降,與空白組比較差異顯著(P<0.01),而千金婦炎舒治療組均能明顯提高K和α,與模型組比較差異極顯著(P<0.01),表明千金婦炎舒對環磷酰胺引起的非特異性免疫功能低下具有增強作用。見表5。
表5千金婦炎舒對環磷酰胺免疫抑制小鼠單核-巨噬細胞吞噬功能的影響(略)
與空白組比較,△△P<0.05;與模型組比較,**P<0.01;n=12
3討論
盆腔炎系指女性子宮頸以上盆腔生殖器和盆腔腹膜及其鄰近結締組織感染引起的臨床綜合征[3],為婦科較常見疑難病,其病情復雜、病程較長、病勢纏綿、易反復發作,并且致病的病原體不一。中醫學認為盆腔炎多由濕熱淤阻、氣血不暢、正氣不足等原因引起,以濕、熱、淤為主要致病因素。血淤是其主要病機,屬于“熱入血室”“帶下病”及“婦人腹痛”等范疇。現代醫學認為,此癥由細菌感染所致,常見病原體是鏈球菌,金葡菌及大腸桿菌。因此,我們采用細菌性致炎、化學性燒傷致炎、非特異性炎癥模型以及從免疫調節等方面觀察其療效。千金婦炎舒以活血化淤止痛為主,清熱解毒消腫為佐,隨證辨治,祛淤生新,散結止痛,活血解毒。根據長期臨床實踐及反復摸索比較,我們確定了以上實驗劑量,其治療組均優于對照組。實驗結果表明,千金婦炎舒有利于改善血液流變學和促進局部的血液循環,消除炎性包塊及慢性粘連,減輕子宮病變程度,調節機體的免疫功能,以使機體功能恢復正常,體現了中醫整體治療的特色。
【參考文獻】
[1]賈麗娜,趙世平,閆靜,等.婦科千金軟膠囊治療慢性盆腔炎藥效學研究[J].中藥新藥與臨床藥理,2006,17(1):18.
[2]陳奇.中藥藥理研究方法學[M].北京:人民衛生出版社,1993:278,366.
[3]樂杰.婦產科學,第5版[M].北京:人民衛生出版社,2001:302
【摘要】目的研究千金婦炎舒的主要藥效作用。方法采用細菌性致炎、化學性燒傷致炎、非特異型炎癥以及免疫功能低下等藥理模型。結果千金婦炎舒能明顯降低模型大鼠全血及血漿粘度、血小板聚集率,減少子宮重量系數,改善模型大鼠子宮的病理組織損害,能抑制角叉菜膠引起的大鼠足腫脹及二甲苯致小鼠耳殼腫脹,減少乙酸所致小鼠腹腔毛細血管通透性的增加,能提高環磷酰胺所致免疫功能低下的碳廓清指數及吞噬指數。結論千金婦炎舒具有較明顯的抗菌、抗炎、改善血液流變學指標及免疫調節作用。
【關鍵詞】千金婦炎舒大腸桿菌抗炎免疫調節
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