維吾爾藥黑種草子中總黃酮分析論文
時(shí)間:2022-01-26 05:01:00
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1儀器與材料
TU-1800型紫外分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司);電熱恒溫水浴鍋(型號(hào):HH-S4);電子天平(型號(hào):AB104-N);蘆丁對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供,亞硝酸鈉,硝酸鋁,氫氧化鈉,甲醇試劑均為分析純;實(shí)驗(yàn)用水為蒸餾水。
維吾爾藥黑種草子購(gòu)于新疆維吾爾民族醫(yī)院,經(jīng)新疆醫(yī)科大學(xué)生藥學(xué)教研室邢文兵鑒定。
2方法與結(jié)果
2.1維吾爾藥黑種草子黃酮類化合物的提取取維吾爾藥黑種草子25g精密稱定,置100ml圓底燒瓶中,加入甲醇50ml,回流3h,濾過(guò),提取液置100ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,待用。
2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密稱取蘆丁對(duì)照品100mg,置50ml容量瓶中,加入甲醇70ml,置水浴中微熱使溶解,放冷,加甲醇至刻度,搖勻,得濃度為2.0mg·ml-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密量取對(duì)照品溶液0.0,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0ml,置10ml量瓶中,分別加水至2.4ml,再分別加5%NaNO2溶液0.4ml,搖勻,放置6min;再加10%Al(NO3)3溶液0.4ml,搖勻,放置6min;再加10%NaOH溶液4.0ml,搖勻,室溫放置15min。在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,同時(shí)以試劑空白作參比。以吸光度為縱坐標(biāo),溶液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2.3測(cè)定波長(zhǎng)的選擇精密吸取3.0ml蘆丁,余下部分按“2.3”方法操作,在紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)上,波長(zhǎng)400~800nm掃描,確定最大吸收波長(zhǎng)為500nm。
2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線與回歸方程結(jié)果表明,蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度線性關(guān)系良好。得到回歸方程:A=0.0109C-0.0003,r=0.9998。
2.5維吾爾藥黑種草子總黃酮含量的測(cè)定精密量取樣品溶液0.5ml,置10ml量瓶中,余下部分按“2.3”項(xiàng)方法操作,在500nm波長(zhǎng)處平行測(cè)定5次,同以樣品空白做參比。根據(jù)回歸方程,計(jì)算總黃酮濃度。根據(jù)公式:總黃酮含量(%)=(黃酮化合物質(zhì)量/樣品質(zhì)量)×100%,得維吾爾藥黑種草子總黃酮含量。結(jié)果見(jiàn)表1。表1維吾爾藥黑種草子總黃酮含量測(cè)定結(jié)果(略)
2.6精密度實(shí)驗(yàn)取一定質(zhì)量濃度的供試品溶液,按“2.3”項(xiàng)顯色,連續(xù)測(cè)定5次,結(jié)果見(jiàn)表2。采用本法測(cè)定維吾爾藥黑種草子總黃酮含量,精密度良好,其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.59%。表2精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果(略)
2.7穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取對(duì)照品溶液及供試品溶液,按“2.3”項(xiàng)顯色,于室溫分別放置0,15,30,45,60min,測(cè)定對(duì)照品及供試品溶液吸光度,其RSD分別1.68%,2.92%。表明對(duì)照品及供試品溶液在1h內(nèi)穩(wěn)定。結(jié)果見(jiàn)表3。表3穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果(略)
2.8回收率實(shí)驗(yàn)精密稱取已知量的維吾爾藥黑種草子5份,分別精密加蘆丁對(duì)照品適量,按“2.3”項(xiàng)下方法測(cè)定,平均回收率為98.2%,RSD為0.55%。結(jié)果見(jiàn)表4。表4回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果(略)
3討論
有關(guān)維吾爾藥黑種子草中總黃酮的含量測(cè)定,目前尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。本方法采用甲醇回流提取維吾爾藥黑種草子中總黃酮,以NaNO2-Al(NO3)3-NaOH體系為顯色劑,利用分光光度法測(cè)定總黃酮,操作簡(jiǎn)便,重復(fù)性好,結(jié)果準(zhǔn)確可靠,為維吾爾藥黑種草子的質(zhì)量控制提供了可行的方法。
【摘要】目的采用比色法測(cè)定維吾爾藥黑種草子中總黃酮的含量。方法以蘆丁作對(duì)照品,以亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉體系為顯色劑,檢測(cè)波長(zhǎng)為500nm。結(jié)果線性范圍為0.008~0.040mg·ml-1,平均回收率為98.2%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.55%。結(jié)論該法為控制維吾爾藥黑種草子的內(nèi)在質(zhì)量提供了依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】維吾爾藥黑種草子;總黃酮;比色法