乳腺癌端粒酶診斷技術(shù)論文

時(shí)間:2022-10-14 08:06:00

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乳腺癌端粒酶診斷技術(shù)論文

目前已公認(rèn)乳腺癌是一種全身性疾病,在其早期即有轉(zhuǎn)移,因此,探索提高乳腺癌術(shù)前確診率的診斷方法對(duì)于提高乳腺癌的治療效果有重要意義。端粒酶是近年發(fā)現(xiàn)的一種具有一定特異性的腫瘤標(biāo)記物,是一種含有蛋白質(zhì)和端粒。互補(bǔ),的核糖核蛋白酶,也是一種逆轉(zhuǎn)錄酶。幾乎在所有的人類原發(fā)惡性腫瘤中均可檢測(cè)到端粒酶活性,而在惡性腫瘤起源的正常組織細(xì)胞中則大多檢測(cè)不到端粒酶活性。這使端粒酶作為一種新的腫瘤標(biāo)記物應(yīng)用于臨床成為可能。我們對(duì),例患者的乳腺腫塊分別行穿刺細(xì)胞端粒酶活性檢測(cè)和光鏡細(xì)胞學(xué)檢查,對(duì)比了兩種方法的診斷準(zhǔn)確率,研究了乳腺腫瘤生物學(xué)特性與端粒酶活性表達(dá)的相關(guān)性,從而對(duì)端粒酶活性檢測(cè)的臨床應(yīng)用價(jià)值和提高乳腺癌術(shù)前確診率的新方法進(jìn)行了探討。

一、資料與方法

1,一般資料

乳腺腫塊患者,在我院普外科病房接受治療的女性患者,患者均在檢查后,內(nèi)手術(shù)。經(jīng)術(shù)后病理證實(shí),乳腺癌例,乳腺良性腫塊例,乳腺腫塊直徑。

2,主要試劑及儀器

端粒酶活性檢測(cè)采用山東醫(yī)科大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)研究中心提供的微量穿刺標(biāo)本端粒酶檢測(cè)試劑盒,主要成分包括,**。公司,引物,華美生物工程公司合成,**酶公司。≤,擴(kuò)增采用美國(guó)∞公司產(chǎn)的,型熱循環(huán)儀。電泳采用北京六一儀器廠生產(chǎn)的電泳儀及電泳裝置。

3,研究方法

術(shù)前行乳腺腫塊穿刺,穿刺標(biāo)本一部分作細(xì)胞涂片,其余注入裝有°,≥液,主要成分包括≤,≤,∞。管中,置于,ε保存,以備端粒酶活性檢測(cè)用。涂片采用瑞氏2姬姆薩染色法,分別在和倍光鏡下觀察。查見(jiàn)癌細(xì)胞者為陽(yáng)性,未查見(jiàn)癌細(xì)胞或查見(jiàn)異型細(xì)胞但不能確診為癌細(xì)胞者為陰性。

端粒酶活性檢測(cè)采用端粒重復(fù)擴(kuò)增法,將注入穿刺標(biāo)本的∞。管離心后收集細(xì)胞,加入裂解液,冰浴后在,ε條件下離心,取全部上清液加樣。

向裝有反應(yīng)液的∞。管中加入全量待測(cè)的上清液,或陽(yáng)標(biāo)混勻。向反應(yīng)管中加入引物,度帶者為端粒酶活性陽(yáng)性。

4,統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

兩種診斷方法診斷率的比較采用Υ檢驗(yàn),端粒酶活性表達(dá)與乳腺腫瘤生物學(xué)活性的相關(guān)性分析采用。

二、結(jié)果

1,乳腺腫塊術(shù)后病理結(jié)果

乳腺腫塊患者為乳腺癌,例為乳腺良性病變。穿刺標(biāo)本端粒酶活性檢測(cè)采用**。法,應(yīng)用陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照,以出現(xiàn)條,梯度帶者為端粒酶活性陽(yáng)性。

2,術(shù)前細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果和端粒酶檢測(cè)結(jié)果。

3,兩種檢測(cè)方法的靈敏度!特異性!約登指數(shù)和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值結(jié)果

如表所示。端粒酶活性檢測(cè)同細(xì)胞學(xué)檢查相比,靈敏度,Υ,1,Π,1,顯著增高,特異性,Υ,1,Π,1,!約登指數(shù),Υ,1,Π,1,和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值,Υ,1,Π,1,差異無(wú)顯著性意義。

4,端粒酶活性檢測(cè)和細(xì)胞學(xué)檢查聯(lián)合診斷乳腺腫塊結(jié)果

如表所示。在例乳腺癌患者中,兩種檢測(cè)方法均為陽(yáng)性的例,故聯(lián)合診斷乳腺癌靈敏度為1,聯(lián)合診斷方法均為陽(yáng)性的例患者,病理證實(shí)均為乳腺癌,故聯(lián)合診斷的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為,顯著高于陽(yáng)性預(yù)測(cè)值較高的細(xì)胞學(xué)檢查,Υ,1,Π,1,可以術(shù)前確診。

5,乳腺癌端粒酶活性表達(dá)與患者年齡

無(wú)顯著相關(guān)性,但隨著腫瘤長(zhǎng)徑的增加,端粒酶陽(yáng)性率呈上升趨勢(shì)。乳腺癌雌激素受體陽(yáng)性者和孕激素受體陽(yáng)性者乳腺腫塊端粒酶陽(yáng)性率分別顯著高于雌激素受體陰性者。

6,乳腺良性病變類型與端粒酶活性關(guān)系

如表所示。乳腺纖維腺瘤和乳腺病的端粒酶陽(yáng)性率顯著高于其他乳腺良性病變。

三、討論

端粒酶自身攜帶模板是端粒酶的一個(gè)重要特征。端粒酶維持著端粒的長(zhǎng)度和穩(wěn)定性。端粒酶的激活可導(dǎo)致細(xì)胞無(wú)限增殖,與細(xì)胞癌變有直接關(guān)系。而且研究已發(fā)現(xiàn)端粒酶活性表達(dá)在惡性腫瘤中具有一定特異性,許多學(xué)者發(fā)現(xiàn)在乳腺癌中端粒酶陽(yáng)性率可達(dá),因此能否將端粒酶活性檢測(cè)用于乳腺癌的術(shù)前診斷已引起學(xué)者們的重視。

1,端粒酶活性檢測(cè)在乳腺癌中的表達(dá),我們?cè)冢橄倌[塊中進(jìn)行腫塊穿刺標(biāo)本細(xì)胞學(xué)檢查和端粒酶活性檢測(cè),將端粒酶檢測(cè)乳腺癌的診斷結(jié)果同乳腺癌目前臨床常用的診斷方法細(xì)胞學(xué)檢查進(jìn)行了對(duì)照,結(jié)果顯示,兩種方法的特異性!約登指數(shù)和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值差異無(wú)顯著性意義,而靈敏度則端粒酶檢測(cè)顯著高于細(xì)胞學(xué)檢查。在本組中,乳腺癌患者癥狀!體征均不典型,細(xì)胞學(xué)檢查陰性,端粒酶活性檢測(cè)則為陽(yáng)性。這表明,細(xì)針穿刺端粒酶活性檢測(cè)很可能作為一種靈敏度較高的新方法應(yīng)用于乳腺癌的術(shù)前診斷。

2,這種新方法具有以下優(yōu)點(diǎn)靈敏度高,由于采用了技術(shù),微量癌細(xì)胞即可得出陽(yáng)性結(jié)果客觀性強(qiáng),采用陽(yáng)性對(duì)照判斷結(jié)果,較少受檢查者主觀影響創(chuàng)傷小,應(yīng)用方便,便于普查,易于為患者接受。但也有不足之處,受穿刺技術(shù)影響,可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果,采用技術(shù),稍有污染,可出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。公務(wù)員之家

3,端粒酶活性檢測(cè)和細(xì)胞學(xué)檢查聯(lián)合術(shù)前診斷乳腺癌的價(jià)值,本研究顯示,當(dāng)端粒酶和細(xì)胞學(xué)均為陽(yáng)性時(shí)的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值達(dá),顯著高于陽(yáng)性預(yù)測(cè)值較高的細(xì)胞學(xué)檢查,可達(dá)到術(shù)前確診的水平。端粒酶活性表達(dá)與乳腺腫瘤生物學(xué)特性的相關(guān)性,等發(fā)現(xiàn)端粒酶活性與形態(tài)學(xué)分級(jí)!雌激素受體和孕激素受體表達(dá)顯著相關(guān),但與腫瘤分期或淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況無(wú)明顯差異。研究認(rèn)為端粒酶表達(dá)與性激素受體水平!。倍性及淋巴結(jié)狀況有關(guān)。而,等和等則認(rèn)為乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況與端粒酶活性無(wú)關(guān)。認(rèn)為端粒酶表達(dá)與腫瘤大小!淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況和腫瘤分期顯著相關(guān)。

本研究顯示,端粒酶活性與性激素受體表達(dá)顯著相關(guān),但與患者年齡,腫瘤長(zhǎng)徑,腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況無(wú)顯著相關(guān)。此外,在乳腺良性病變中,與雌激素密切相關(guān)的乳腺纖維腺瘤和乳腺病端粒酶活性表達(dá)率顯著高于與雌激素?zé)o明顯關(guān)系的其他乳腺疾病。這些提示端粒酶的活性表達(dá)可能與雌激素相關(guān),受雌激素的調(diào)節(jié)。