導語：如何才能寫好一篇立冬的文案，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

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2021描寫立冬節氣的文案

1、一年有著四個季節，立冬就是冬天的開頭了，走進立冬，天氣就漸漸冷了，它告訴我們冬天來了。

2、寒冷的冬天來了，一場大雪過後，整個東方紅都成了粉妝玉砌的世界。柳樹上掛滿了銀條，草坪也披上了銀裝。

3、初冬至，天轉涼，問候掛心腸;葉兒黃，寒氣漲，冷時添衣裳;托浮雲，喚流水，提醒保健康;至，問候來，幸福又吉祥。

4、立冬已到，補啥?天上飛的，去打;陸上爬的，去抓;水裡遊的，去?;好，吃飽喝足，送一條，來一回瀟灑，立冬快樂。

5、寒風起，思念意;立冬至，長相憶;遙相寄，祝福你;變天氣，多注意;冷添衣，顧身體;願朋友，甜如蜜，書美麗。立冬快樂。

6、有些話語像是雪花，平淡卻純潔!有些思念像是北風，乾燥卻強勁!有些問候像是冬天，寒冷卻溫馨!今日立冬，願你幸福開心!

7、我讓葉子伴著秋風遊走，讓雪花隨著風兒飄散，讓太陽跟著藍天回家，讓月亮帶著星星共舞，上帝問我還要啥?我說:祝你冬天快樂!

8、該練攤的練攤，該防寒的防寒，該換毛的換毛，該冬眠的冬眠，該發短信的發短信，該送祝福的送祝福，立冬了，該多加點衣裳了。

9、立冬，把憂愁"凍住";讓煩惱"冬眠";把幸福"冷藏";讓快樂"還陽"。祝福你冬日吉祥，立定堅強，幸?？鞓?，如沐暖陽!

10、隻要情不減，就會有掛念;隻要眉不鎖，就會有歡樂;隻要心不冷，就會有溫暖;隻要發，就會祝福你;隻要是節氣，就會發。立冬快樂!

11、我讓葉子伴著秋風遊走，讓雪花隨著風兒飄散，讓太陽跟著藍天回家，讓月亮帶著星星共舞，上帝問我還要啥?我說:祝你冬天快樂!

12、歲月匆匆，轉眼又立冬;露寒霜凍，天氣又變冷;情誼有多重，思念在心中;遙把問候送，每日多運動，願你健康幸福，一切多保重!

13、冬天來了，天氣越來越冷，樹葉紛紛揚揚的飄落下來，給地上蓋了一層厚厚的被子，每天放學我走在上麵，感覺軟綿綿的，舒服極了。

14、泡一杯奶茶，暖手思友;品一杯香茗，思念故人;聽一首老歌，翻出回憶;發一條短信，聯絡朋友;道一聲問候：立冬時節，注意身體!

15、收一收煩惱，藏一藏鬱悶，躲一躲憂愁，得安定心神。養一養氣血，順一順呼吸，調一調陰陽，蓄無限生機。立冬節氣，祝你溫暖過冬。

16、落葉黃，寒風狂，立冬時節又登場;花帶露，月如霜，一天更比一天涼;祝福傳，問候長，心中思念不會忘;祝願你，身安康，幸?？側绯?

17、風涼了，我用溫暖的友情為你驅寒，天冷了，我用溫情的關懷為你取暖，立冬了，我用溫馨的文字為你祝福，願你立冬快樂，記得加衣喲!

18、品一杯香茶：思念朋友;聽一首老歌：回憶朋友;發一條：聯絡朋友;道一聲問候：最近好嗎?傳一份關懷：天冷保重;送一個祝福;立冬快樂!

19、送走秋的斑斕，迎來冬的淡雅。大雁展翅南飛，萬物悄然入眠。在這初冬寒氣襲人的日子，隻想輕輕說一聲：天冷了，多保重。立冬快樂!

20、立冬是季節的一個片段，季節是人生的一個畫麵。讓我們收拾心情，攢足乾勁，再把所有的煩惱雪藏起來。因為冬天來了，春天還會遠嗎?

2021描寫立冬節氣的文案

1、天蒼蒼，野茫茫，看你晚上蓋被單;立冬寒，氣溫降，按鍵速度跟不上;手按按，眼看看，鍵盤按得手發涼;看短信，彆慌張，快把豬蹄暖一暖。

2、立冬時節，禦寒重要：穿衣戴帽，保暖就好;在家懶覺，不如晨跑;勤做早操，健身健腦;多吃果蔬，雜糧是寶;樂觀向上，青春不老。預防感冒，有利環保，用紙能少就少!

3、冬天的問候像是火鍋的羊肉，精華暖心!冬天的祝福像是火鍋的蔬菜，細致貼心!冬天的短信像是火鍋的底料，分量十足，讓你動心!立冬快樂!

4、立冬了，北風吹，雪花飄，天氣轉冷了，加衣的加衣了，蛻皮的蛻皮了，換毛的換毛了，溫馨提醒：你也挖個洞，儲存好糧食，和你的同伴一起冬眠去吧。

5、快樂雪，好運霧，陽光伴你行一路;健康霜，平安露，成功陪你每一步;朋友情，心相顧，真誠思念遙傾訴;天雖寒，共相度，立冬願你更幸福。

6、立冬，我願變成安靜的湖麵，聽你唱一曲莫斯科郊外的晚上，立冬，我願變成安靜的雪片，堆積在你心愛的雪人裡麵，立冬，我願變成安靜的夜晚，陪你數著星星說一句晚安，親愛的，立冬快樂。

7、立冬到，問聲好!冷侵襲，多穿衣;皮膚糙，多睡覺;手腳寒，熱水泡;喝熱水，調陰陽;忌生冷，腸胃好;要早起，勤做操。立冬節氣，祝你溫暖過冬，吉星高照!

8、聆聽冬的步履，落葉飄紅了思緒;流水替我寄語，幸福正在等你;清霜冷絮鋪地，凝聚美好情意;當問候輕輕響起，聲聲祝福傳遞。立冬送你無儘愜意!

9、立冬到，祝你心情舒暢身體好;立冬來，祝你事業有成發大財;立冬臨，祝你幸福美滿家溫馨;立冬好，祝你吉星高照祥雲繞;立冬節氣，增衣防寒，多多鍛煉，健康永遠。

10、又是一年立冬到，問候祝福短信飄，願你快樂祥雲繞，吉祥如意開心笑，青春美麗人更俏，健康長壽永不老，事業輝煌步步高，財源滾滾數鈔票，增衣防寒最重要，整個冬天不感冒。

11、餓了，飽飽胃腸;冷了，添添衣裳;煩了，外出逛逛;累了，在家躺躺;樂了，說說分享;想了，聊聊家常。立冬到了，祝你久久快樂健康!

12、立冬啦，氣溫持續下降了，每天凍得遭罪了，注意自己身體吧，工作不要太累了，白天多做運動，晚上要蓋棉被，遇事不要上火，養心護肺寶貴。

13、立冬了，送你件升級版外套：口袋叫非常溫暖，領子叫十分關懷，袖子叫體貼入微，扣子叫極其思念，款式是經典老款，麵料是真摯的友情，請永久珍藏!

14、寒冬，總有一縷陽光溫暖心扉;遠方，總有一個背影念念不忘;心中，總有一段問候溫馨甜蜜;語言，總有一句祝福是在冬季。立冬，希望你一切順利!

15、我為你排憂，請收藏快樂;我為你解難，請收藏運氣;我為你撫平不安，請收藏和氣;我為你傳遞關懷，請收藏真心，並收藏祝福：天冷添衣，立冬快樂!

16、時間過得真快，眨眼立冬到來，短信傳遞思念，溫馨演繹關懷：外套圍巾和手套，出門記得隨身帶;新鮮果蔬維生素，營養補充要及時，願你立冬心情愉快!

17、又是寒冷立冬時，冒著凜冽寒風吹，頂著鵝毛大雪飛，忍著超常低溫凍，拎著冷靜頭腦奔，衝著時間比賽跑，趕著手機結冰前，接著友情信息念。朋友，又立冬了，穿厚點可彆凍著!

18、寒風呼嘯葉枯黃，雪花飄飄迎立冬;清霜冷絮鋪滿地，凝聚心中思念情;立冬將至心寄語，為君送上真溫暖;暖手暖腳暖心房，健康快樂永伴隨;無儘愜意送給你，祝你幸福又安康。立冬了，要把厚衣服準備好哦，流感季節，千萬不要感冒哦!

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2、一年有著四個季節，立冬就是冬天的開頭了，走進立冬，天氣就漸漸冷了，它告訴我們冬天來了。

3、立冬，有秋收冬藏的含義，是一個輪回的休止，也是又一個輪回的開始！是草木凋零，蟄蟲伏藏，萬物活動趨向休止，以冬眠狀態，養精蓄銳，為來春生機勃發作準備。

4、立冬后，眼見大河緊緊地抱著水，直到抱成冰。當水被冬留住，與岸彼此相守，河就成了路。遠方的雪花，正醞釀著席卷而來。我想起坐在炕上納起鞋底的母親，冬天就走向更深的時光。秋去冬來，這是宿命。

5、立冬，每每一聽到這樣的詞便又怦然心動一次。從一場秋雨一場寒的立秋到還借自家小火爐的立冬時節，每一個細節彌漫著的都是游子的眷戀，每一個細節浮現著的都是故人的音容。

6、秋聲還來不及細細的玩味，就突然聽見朋友說已是立冬時節了，我慌亂的披了衣服跑到小樓外倚著欄桿望著眼前的已經半是黃半是紅的山脈來，心中有著說不出的喜悅，光是聽到立冬這個詞撩起的就是無限的情思。

7、餓了，飽飽胃腸；冷了，添添衣裳；煩了，外出逛逛；累了，在家躺躺；樂了，說說分享；想了，聊聊家常。立冬到了，祝你久久快樂健康！

8、送走秋的斑斕，迎來冬的淡雅。大雁展翅南飛，萬物悄然入眠。在這初冬寒氣襲人的日子，只想輕輕說一聲：天冷了，多保重。立冬快樂！

9、我讓葉子伴著秋風游走，讓雪花隨著風兒飄散，讓太陽跟著藍天回家，讓月亮帶著星星共舞，祝你立冬快樂！

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一、問題設計應具有靈活性

語言教育活動中應注意采用各種方式靈活地設計問題，如在《大象手帕》的活動中，有這樣一個環節：大象先生的手帕被風吹落掉進了河里，小青蛙撈起并玩耍，大象先生告訴小青蛙這是它的手帕，并要小青蛙還給它。當我問：大象先生是用什么樣的語氣和小青蛙說的時，有的孩子說是“高興的”、有的說是“生氣的”等，但 是沒有人想到應該用請求的語氣。我請小朋以們表演了高興的語氣是怎么樣的，會產生什么樣的結果，孩子雖然覺得這兩種語氣不是特別合適，但他們還是沒想到要獲得別人的幫助，應該作出請求。后來，我在設計這個問題時就換了一種方式問：如果別人撿到了我們丟失的東西，我們是應該用高興的語氣、生氣的語氣，還是應該用請求的語氣，讓別人還給我們呢？孩子們經過慎重比較，認為請求的語氣更合適。再如在欣賞詩歌《春風》時，我設計的問題是：“春風吹來了，我們周圍的環境發生了什么變化”課堂陷入了靜默狀態，我趕緊換了一種提問方式，把問題具體化、縮小化，問：“春天到了柳樹有什么變化？”“桃樹，小草有什么變化？”“小朋友的穿著打扮有什么不一樣了？”……這下，教室里馬上活躍起來了，大家說出了許多春天的變化，把一個難度較大的問題分為若干個小問題，由淺入深逐步追問，讓幼兒了解問題的構成，找到最終答案。所以，我們教師的問題不要絆住自己，在原地轉圈，而要靈活地變換方式，讓幼兒更快地理解提問的意圖，從而延續對話的進行。

二、問題的設計要具有啟發性

啟發式的問題能開啟幼兒的心智，使幼兒樂學、好學，并能引導幼兒的思維步步深入，教師若將問題置于一種情景中，逐步引導幼兒由直觀形象思維向抽象思維過渡，如《小蝌蚪找媽媽》這個故事中，我以往在教學時，常常設計成這樣幾個問題：“小蝌蚪分別問了哪些動物？”“它們是怎么說的？”“小蝌蚪為什么沒有找到媽媽？”，這學期我把這些問題綜合成“小蝌蚪為什么問了那么多動物都沒找到媽媽呢？”其它問題答案都隱含著對事物局部與整體之間關系的理解，等孩子們回答了，我再追問，“為什么？”“你從什么地方知道的”，“為什么會有這樣的結果呢？”這樣就啟發幼兒不斷地思考，而不是單一的問：“它遇到了誰？”再如：我在執教《盲人摸象》這一文時，我設計了這樣一個問題：“五位盲人各自摸的大象是怎樣的？”幼兒按照故事的內容回答后，我又提問：“你認為他們誰說的對？為什么？”幼兒說：“都不對”，在這里我有意設計了一個錯誤問題，我說：“四位盲人都說對了，不信，你們來摸一摸！”接著幼兒帶著問題觸摸大象的模型，由于幼兒迫切想知道自己的判斷是對還是錯，聽課注意力非常集中，通過觸摸，我又問：“為什么不對？”話音剛落，幼兒就展開了激烈的爭論，并得出了比較客觀的道理：“看問題要全面，看到他的全部，不要只看他的一點及部分”。整個設計民主、和諧，啟發了幼兒的思維。

三、問題的設計要有雙向性

常言說：一個巴掌拍不響，問題的設計也是如此。如果只有老師的問，沒有孩子的疑問，也不能很好地啟迪孩子的思維。因此，在教學中，應引導孩子自己提出問題，這樣的互問互答，才能使其語言流暢思維深刻。例如：看圖講述就是讓孩子自己提出問題，老師在設計看圖講述活動時把問題留給了孩子們，老師可引導孩子思考，你們覺得這個問題應該怎么回答？我再講一遍，你們有什么不懂的地方可以舉手問我，看誰能把老師問住了。又如在大班語言《爸爸、媽媽和我》這一詩歌中，我首先出示一幅掛圖，問：孩子們：你們看到了什么？孩子們七嘴八舌的說開了，有的孩子就問我：“老師：為什么把爸爸說成是大樹？把媽媽說成是雨露呢？”這些都是孩子們通過思考，給老師出的問題了。這種師生之間相互合作地開展講述，問答活動常常會給幼兒帶來積極愉快的情緒，可以滿足幼兒的心理需求，有利于幫助教師針對幼兒關心的熱點問題進行教學，同時也培養了幼兒好奇心、好問、好學的良好習慣。

四、問題的設計要具有開放性

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關鍵詞：文書檔案管理 辦公自動化應用

在機關事業單位檔案的整體工作中，文書檔案占據了十分重要的地位，它明確記載著機關事業單位的歷史發展過程，對處理問題、領導決策、研究開發、基本建設等方面的內容有一個客觀的反映。隨著信息網絡的快速發展，怎樣應用辦公自動化管理文書檔案以提高機關事業單位的檔案管理水平顯得尤為重

一、應用辦公自動化的文書檔案管理的優點

1.提高工作效率

計算機強大的信息處理能力也是正確運用辦公自動化的最大優點。在以往的檔案管理工作中，工作人員過多地依賴于手工操作，要求收集完整、齊全，避免漏寫、漏抄；用筆規范、耐用，字跡工整、清楚；分類、統汁準確無誤，結果又費時，又費力。在應用了計算機軟件處理后，使文件資料收集、儲存、分類、統計和查閱等環節變得十分方便、有序因而無論是起草還是辦理傳遞，都變得簡單易行。

2.文件和文字信息得到充分交流與共享

在原始的手工操作管理中，企事業單位由于不能做到信息共享，使得大量信息閑置在文件柜中，不僅造成資金和資源的浪費，還造成文件和信息查找困難。運用計算機技術對檔案進行管理后，檔案管理由案卷級深入到文件級，由單途徑管理發展為體系管理，由對檔案外部特征（目錄）管理到內、外部特征（目錄和內容）合并管理。隨著計算機及其網絡技術的進一步發展，實現檔案信息與載體分離利用，可與其他信息系統建立共聯，提供信息的橫向與縱向、歷史與現實記錄，從而極大地提高檔案利用工作的質量和效率，可以對所調閱的信息資源作出適時響應和脫機處理，可以保證很高的查全率和查準率，可以不受空間的限制。并且通過網絡服務這個寬廣的平臺，了解其他檔案工作部門概況、工作的重點和最新、最快的檔案管理信息動態。

3.電于文件保存的穩定性

與紙質檔案載體相比，電子文件載體材料的壽命要長得多。紙張的耐久性取決于纖維素的性質，纖維素在一定的條件下容易受到破壞：如高濕、高溫、酸、堿、酶、氧化劑等情況下，可發生水解和氧化反應，在檔案工作過程中稍不注意就可能發生不可挽回的損失。而電子文件則不同，隨著電子技術日新月異，貯存、讀取電子文件的設備日趨成熟，我們可以根據不同的需要，選擇不同的電子載體，如VCD、DVD光碟，小容量的閃存U盤，大容量的移動硬盤等等。這些載體的普遍特點都是存、讀方便快捷，易于傳遞，且貯存時間長，受外部環境影響小，不易損壞，具有很強的穩定性。

4.提高了文件傳遞的速度和安全性

日常公文辦理過程中，辦理人員私存文件或文件在傳遞過程中丟失的情況時有發生，文件傳遞的傳統手段是靠郵政系統傳送時間受距離長短的限制。同時，文件還可能因為其他原因造成丟失或延誤，給檔案人員歸檔和其他人員檢索利用造成很大不便，在應用計算機網絡技術下，直接通^網絡工具進行傳遞，大大提高了文件傳遞的安全性和時間性。

二、應用辦公自動化的文書檔案管理存在的問題

1.電子文件保密性受限制

電子文件的內容不僅易于變化，而且失去了固定的形式，使得文件保密性變弱。電子文件易于修改，而且改動后可以不留任何痕跡，雖然已有一些技術可防止偽造電子文件和在“原稿”上增刪改，但其內容發生變化的可能性總是比紙質文件要大得多，從而使人們感到把握其內容原貌的困難。電子文件不再具有特定的字跡，人們可以根據需要以不同的字體、字號將電子文件輸出，無法從字跡上分辨其原始性，而且不能為每一份電子文件蓋印或親自簽名，也就無法借助印章或簽署的字跡來判斷一份電子文件是否為原件。以上的種種問題都對電子文件的保密性提出了嚴峻的考驗，隨著網上竊密技術的不斷完善，進入網絡中的任何文件都再難以做到絕對保密。

2.檔案管理人員無法適應現代技術要求

對電子文件、電子文件歸檔及其歸檔后形成電子檔案的管理，絕不是僅僅懂得紙質檔案管理理論、原則、方法和技術的管理人員所能勝任的。也不是僅僅懂得電子計算機技術或數據通信技術的人員所能勝任的。這就對管理人員技術和素質水平提出更高的要求。實現檔案信息辦公自動化，首先要有現代化的人，管理人員要有較高的知識層次和先進技術水平，不能僅僅滿足于一般的計算機操作水平，從目前看，許多檔案部門缺乏現代高技術人才，其中檔案信息處理復合型人才就更奇缺，大部分檔案人員現代技術水平偏低，盡管引進了現代化設備，仍不能充分發揮作用，就談不上檔案信息電子化了。

三、應對措施

文書檔案的辦公自動化應用在發展過程中有利有弊，就其對現代檔案工作的貢獻來說，利是遠遠大于弊的。針對在實踐應用過程中遇到的一些問題，筆者提幾點方法。

1.辦公自動化系統內、外網隔離

在內部辦公自動化網絡和外網之間，設置物理隔離，以實現內外網的隔離是保護辦公自動化網絡安全的最主要、同時也是最有效、最經濟的措施之一。第一層隔離防護措施是路由器。路由器濾掉被屏蔽的IP地址和服務?？梢允紫绕帘嗡械腎P地址，然后有選擇的放行一些地址進人辦公自動化網絡。第二層隔離防護措施是防火墻。大多數防火墻都有認證機制，無論何種類型防火墻，從總體上看，都應具有以下五大基本功能：過濾進、出網絡的數據；管理進、出網絡的訪問行為；封堵某些禁止的業務；記錄通過防火墻的信息內容和活動；對網絡攻擊的檢測和告警。

2.提高檔案人員的綜合素質

一是從硬件建設和投入上下功夫，不斷改善硬環境，提高檔案人員業務技能。事實證明只有在不斷增加現代化硬件設施投入的基礎上，檔案人員才能通過對這些設備、設施的了解、學習直至熟練運用達到增加業務技能、提高管理水平的效果。二是以“自學為主，培訓為輔”模式逐步形成可持續終身教育機制，保障檔案人員素質隨時代變化而不斷提高。通過不斷學習獲取知識是提高素質的根本途徑，要對本單位的檔案人員建立學習激勵機制，把檔案業務學習成績作為業績考核的一部分。三是加大檔案部門間、區域間系統合作工作的力度，要不斷擴大自己的交際面。通過交流，多學習兄弟單位和科（室）利用檔案資源進行轉化、知識創新的經驗，運用網絡、現代通訊等高科技手段，不斷增加檔案部門和檔案人員的信息源和創新思維。

四、結語

文書電子檔案是信息時代的產物，是現代檔案管理工作中不可回避的。因此，還要不斷研究整理文書電子檔案管理和利用中存在的管理和技術上的問題，并加以解決，以實現安全、高效的管理和利用文書電子檔案的目的。

在當代信息化迅速發展的今天，在加強文書電子檔案管理工作時，要根據文書電子檔案自身的特點，不僅要注重硬件建設，充分利用計算機技術和網絡技術，更要注重軟件建設，建立健全電子文件及電子資料管理制度，提高電子文件制作及電子檔案管理人員的素質，不斷加強各個環節的溝通、管理。只有這樣，才能順應時代的發展，準確、快速地向社會提供有利的信息資源，最終做到既能節約開發資源，又能提升信息時代文書檔案管理的層次和工作效率。

參考文獻：

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【關鍵詞】電力自動化系統 網絡安全

如今，計算機網絡技術的高速發展為電力自動化系統提供了很大的發展機遇。隨著社會的進步和人們生活條件的改善，人們對電力的需求有了更好的要求。人們在日常生活中時時刻刻都在用電，學生用的手機、電腦、ipad需要不斷充電。各種家用電器需要有電才可以運行。工業用電更是對電力系統的安全和穩定提出了要求。面對如此大的用電需求，電力企業必須要完善自身的服務體系，讓人們可以安全放心地用電。

1 電力自動化系統的基本功能

清楚地了解了電力自動化系統的基本功能，才可以安全放心的用電。在了解電力自動化系統的基本功能的時候，網絡系統的可靠安全性是首要考慮的問題。目前，電力系統自動化的基本功能可以從以下幾個方面來考慮，首先是SCADA功能，它就相當于電力系統的一個仿真操作，它可以利用遙控對數據實施實時監控。其次是系統接口功能，它主要是對電力系統的仿真進行控制。PAS功能主要體現在電力的操作過程中，它可以對電壓進行優化控制。

目前，我國電力企業的市場發展十分迅速，企業的發展模式也很豐富多樣。電力自動化系統的網絡安全問題也越來學成為人們擔心的問題。因此電力企業應該重視起這個問題來。電力企業根據企業的生產類型和環境、企業內部的運營管理機制、企業員工的工作環境、企業的運營現狀和發展前景、企業平時存在的問題，來歸納總結出適合企業發展的、能幫助企業取得最大經濟效益的電子自動化系統。電力企業一定要與時俱進，充分利用網絡技術的優勢，把握時展的方向為大眾構建安全穩定的電力使用環境。

2 電力自動化系統的網絡安全問題

2.1 在網絡構建方面的問題

雖然我國目前的綜合實力和經濟實力在國際上的綜合排名都有了很大的提升，但是我國仍是世界上最大的發展中國家，科技的發展水平有限，數字化設備很缺乏，管理人員的專業素養也不是很高，導致電力工作人員在一定程度上不能安全規范的操作電力，電子自動化系統的網絡安全得不到很好的保證。因此，首先要從網絡構建的安全問題來引起電力企業和人民大眾的重視。

電力自動化系統的網絡構建方面的問題主要有：物理、系統和網絡三個方面。物理層面上的安全直接關系到了整個電力企業的安全運營，它是進行電力系統設計的時候首先要考慮的問題，比如自然災害的發生、員工的操作失誤，設備的意外失竊等等都屬于物理層面的安全問題，因此在構建電力自動化系統的時候要嚴格按照規范要求來安裝設備，同時也要用制度來規范操作人員的行為，對可能發生的自然災害和意外事故要進行預測，做好防范措施。其次，要想從根本上解決電力自動化系統的安全問題必須要從系統層面入手，系統層面級容易出現系統漏洞等安全方面的問題，因此在安裝系統的時候一定要注意安裝殺毒軟件，并且要及時地更新漏洞補丁。電力自動化系統在網絡層面的安全是極其重要的，電力網絡要想正常運營，就必須要不斷地優化網絡結構和系統結構。電力網絡安全的管理人員一定要保證好網絡結構和系統結構不出故障。

我國電力企業的負責人往往總是只注重最后的經濟效益，而對平時的生產管理過程不管不問，這樣很容易出現很多問題。在網絡條件下，電力企業要對所有的工作人員進行規范化的管理。要將各項工作都落實到相應的部門身上，堅持讓每個部門的負責人每周定期做工作匯報。做到有突況發生的時候隨時隨地都能找到對應的責任人。此外，還要加強電力企業內部的信息和網絡安全管理系統，這樣可以為電力企業的內控管理提供安全保障。

2.2 殺毒軟件

對于網絡系統的安全來講，殺毒軟件有著至關重要的作用。及時地對殺毒軟件進行分析研究，可以有效地保障電力自動化系統的網絡安全。首先要在病毒的入口處安裝病毒防護，防止病毒入侵之后篡改系統的文件和程序等等，其次，要定期檢查系統的硬盤等，要及時地更新殺毒軟件，這樣才可以有效保障電力自動化系統的網絡安全。殺毒軟件的存在可以消滅系統內存在的病毒，保障電力自動化系統的安全。

2.3 防護墻

防護墻主要起的是隔離作用，它可以在電力自動化系統與外部進行信息交換的時候對信息進行過濾和控制，它可以保障信息的安全。它主要可以分為硬件防護墻和軟件防護墻兩大類，要根據實際情況的需要選擇適當的防護墻，這樣才可以有效保障電力自動化系統的安全。由于我國在電力自動化系統的管理方面，相關部門都沒有形成統一的管理模式，在對企業的管理、制度方面都沒有制定統一的標準，因此給電力企業的自動化系統管理工作造成了很大的困難，加上管理人員專業素養有欠缺，對數字化技術的應用存在困難，因此，我們國家要加大在科學技術方面的投入，培養優秀的網絡技術人才，這樣他們可以及時的對電力自動化系統的安全問題進行檢測和維護。從而可以為電力企業的正常運行以及電力自動化系統的網絡安全提供充實的經基礎和技術保證。

3 總結

如今，我國高速發展的電子信息技術為電力自動化系統的發展提供了很大的平臺。面對變幻莫測的市場環境，電力企業必須要與時俱進。本文首先分析了電子自動化系統的基本功能，其次從三個方面分析了電力自動化系統的網絡安全問題。電力企業內部要重視科技發展，加大在科學技術方面以及網絡信息技術設備的投入，提高企業員工的專業素質，培養優秀的網絡技術人才，為電力企業的正常運行以及電力自動化系統的網絡安全提供充實的經濟基礎和技術保證；其次，企業要有嚴格規范的制度作為保障，來確保電力企業的自動化系統的網絡安全管理工作可以有效的進行。

參考文獻

[1]朱占榮.電力自動化系統中的數據交換[J].科技創業報，2004，38（04）.

[2]何忠，姜國華.電力信息系統信息安全關鍵技術的研究[J].湖北電力職業技術學院，2004（03）：380-482.

[3]揚世勇.探討電力自動化系統的網絡安全[M].成都：四川科學技術出版社，2002：49-102.

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一、辦公自動化在文??檔案管理中應用的意義

首先，能夠實現高效的工作。傳統的文書檔案管理都是人工進行操作的，通過人工的方式收集、整理、儲存文書檔案資料，會造成人財物的浪費，并且工作效率不高，檔案管理服務與人們的實際需要之間還存在著一定的差距。將辦公自動化應用到文書檔案管理中，就是利用計算機信息技術處理檔案內容，計算機的運算速度較快，并且能夠很好地對信息進行處理，保證檔案資料能夠在短時間內處理完畢，有助于提高檔案管理的效率。

其次，能夠很好地優化檔案服務功能。傳統的文書檔案管理中，資料的共享性不強，檔案資料的查找也遇到一定的困難，服務效果并不理想。使用辦公自動化技術建立檔案數據庫，可以通過網絡查找檔案資料進行應用，檔案資料的應用率比較高，能夠實現更便捷的服務功能。使用計算機進行精細化管理，使檔案信息與網絡系統相連接，使得信息的深度延伸，做好檔案信息的共享以及在線服務，使得檔案服務功能得以優化實現。

最后，使用辦公自動化技術還能夠高質量地儲存文書檔案資料。文書檔案管理中應用辦公自動化技術，實現電子檔案的儲存，能夠提高儲存的便利性。此外，還能結合實際需要，實現紙質文檔與電子文檔之間的轉換。傳統的紙質檔案在應用上是不方便的，并且在傳輸儲存過程中容易出現損壞，使用辦公自動化技術能夠實現電子檔案的保管與儲存，使得檔案資料更加完整，提高傳輸儲存的安全性。

二、辦公自動化在文書檔案管理中應用的策略

（一）健全文書檔案管理的制度。當前社會不斷發展，文書檔案管理工作也呈現出新的特點，要結合文書檔案管理的實際情況，不斷提高文書檔案管理的效率和質量，健全文書檔案管理的制度，使得文書檔案管理工作有科學的制度作保障，實現文書檔案的規范化、標準化管理。由于受到傳統管理理念以及模式的影響，當前的一些文書檔案管理還是分部門管理，不利于文書檔案的整體效果實現，而且部門間缺乏交流合作，文書檔案管理的專業化、統一化也會受到一定的影響，因此必須進一步完善文書檔案管理制度，實現文書檔案的統一管理，使得文書檔案管理滿足現代化的發展需要。

（二）統一文書檔案管理的技術標準。文書檔案管理過程中，為了充分發揮辦公自動化的價值，就需要明確文書檔案管理的特點以及實際需要，科學地分析研究，對辦公自動化技術進行科學的應用，統一文書檔案管理的技術標準，使得辦公自動化軟件有好的性能，滿足文書檔案管理工作的實際需要，實現高效的文書檔案管理。此外將辦公自動化技術應用到文書檔案管理中，還需要注重其系統功能的實現，對相關的技術參數進行規范，使得文書檔案管理各項工作的開展都有科學的依據，提高文書檔案管理的效率、安全性。

（三）技術處理電子檔案。將辦公自動化技術應用到文書檔案中，建立電子檔案，使得檔案數據內容更加準確，實現高效地工作，對電子檔案進行技術處理，當前辦公自動化技術的應用逐漸深入，檔案管理中會出現很多新的資料，實現電子檔案管理是極為必要的，這就需要檔案管理人員科學地研究文件資源。對電子檔案進行技術性的處理，就需要做好接收、處理、儲存等工作，保證文檔內容的真實性，技術處理后，將電子文檔轉變為只讀文件，不能進行修改，使得文件的原始性得以保證，使得電子文檔更加安全、可靠。將電子檔案儲存在計算機中，能夠避免檔案信息丟失，對檔案信息進行備份，加密處理。防止檔案資料丟失或被不法人員盜取。

（四）強化檔案管理人員的綜合水平。在文書檔案管理中，檔案管理人員的素質水平對檔案管理的效果有著直接的影響，因此必須要提高檔案管理人員的素質水平，實現高效的文書檔案管理。文書檔案管理中應用辦公自動化技術，還需要提高檔案管理人員的專業化技能。加強檔案管理的投入，使工作環境以及硬件設備得到優化，檔案管理人員能夠熟練地操作各種設備，具有較高的業務素質。強化檔案管理人員的教育培訓，樹立終身教育的理念，完善獎懲機制的建立，提高檔案管理人員的技能以及工作積極性。同時做好職業道德教育，在檔案管理工作中能夠更加認真、細致。此外，要加強與單位各部門之間的有效溝通和聯系，使檔案管理的影響力得以提升。還要積極與其他單位加強聯系，積極學習先進的經驗技術，并結合單位自身的實際情況，通過現代化的網絡技術手段，使得文書檔案管理工作水平得到全面的提升，更好地為單位各項決策提供科學依據。

篇7

【關鍵詞】電力系統；自動化；繼電保護；安全管理

1.電力系統繼電保護的特征及其管理現狀

面對電力系統自動化的發展趨勢，繼電保護已不再是傳統意義上的儀表監測、預告信號、事故音響的單一管理模式，而是創設了基于計算機現代化管理技術的自動化管理模式，其保護性能好、可靠性高、裝置先進、功能強大，并具有維護安裝調試便利、操作便捷等優勢，科學實現了遙測、遙控、遙調及遙信等共享化管理功能，并可實現無人值守的自動化管控目標。同時其引入的故障錄波與基于GPS的衛星對時功能，很大程度便利了管理人員對電力系統各類故障及時、準確的分析與高效處理。然而由于現行繼電保護運行環境尚未實現根本改變，綜合自動化變電站、現代化電網對繼電保護功能的需求日漸提升，使其全方位功能的激發與安全管理工作有了更高的奮斗目標。相比于電磁型保護方式，計算機技術系統對防雷擊、抗干擾、工作環境、電源電壓等條件具有更高的客觀要求，同時由于現行不盡完善的變電站后臺遠方監控，要求我們必須強化和提升繼電保護管理，完善繼電保護相關設備服務運行環境、優化設計維護方式，進而合理補充綜合自動化變電站的人性化功能，為打造運行安全、穩定的綜合電網奠定良好的基礎。

2.電力自動化繼電保護的安全管理

2.1　統籌規劃，科學進行選型設計

在選型設計階段，我們應主體面向形象良好的知名企業，選擇設計完善、技術成熟、性能可靠、安全穩定的繼電保護產品，設備質量過硬，是實現長期穩定運行服務的保障。片面追求價格低廉而選用過渡型技術、不穩定設備，保護裝置極易發生‘據動’和‘誤動’故障，反而會耗費很大的人力、物力資源來對其進行再次技術改造和設備更新（如90年代，我系統曾在多座35KV、110KV變電所的農網改造建設中，有過慘重的教訓）。

因此，在實踐管理中，我們必須秉承全局觀念開展設計，科學合理地進行設備的選型和配置，使繼電保護、信號、計量、控制、測量及遠動等各個環節相互配合、協調有序，確保整個系統始終保持高水平的運行狀態。同時應合理實施變電站的擴建增容，為更換設備和實施改造留有一定的空間，使變電站設計能夠同時適應傳統有人值守以及綜合自動化的管理模式。為避免網絡故障及無法實施數據遠傳現象，應對傳統變電站的監測儀表、事故音響及預告信號等進行合理保留，進而完善并保障電力設備的持續安全運行。計算機繼電保護裝置的全面引入，依據相關規定和要求，應合理改造接地網，使用高電導率、強耐腐性接地網，將接地電阻控制在零點五歐姆以下，同時應符合變電站場地相關安全與技術要求，嚴格杜絕接地網不良引發地電位升高、繼電保護拒動、誤動或設備燒損等安全事故的發生。另外還應科學改善和更新監控數據庫，對后臺信號依據變電站名稱、重要等級進行合理劃分，并實現分類顯示。一旦故障發生，數個后臺信號同時顯示時，操作或管理人員則能夠依據類別的重要程度，快速做出準確的判斷、分析和處理。

2.2　完善調試安裝、確保各設備協調配合

綜合自動化變電站系統的建設，使得繼電保護涵蓋眾多環節設備。例如：后臺監控、測量表計、直流系統、遠動、五防等。因此，我們必須加強調試安裝工作，明析繼電保護同該類設備的管理分工與責任劃分，進而促進各方的協調配合。同時還應在錄入基礎數據、建立系統數據庫、聯合調試各項設備等環節上下功夫。對新安裝的繼電保護裝置應嚴格進行校驗，對其加入百分之八十的額定電壓，模擬系統可能產生的各類故障，進行傳動試驗與整組模擬試驗，進而對保護裝置涵蓋的邏輯回路得到正確性驗證。針對計算機裝置防潮和抗干擾性能較差、安全系數和工作可靠性有限、易受雷擊、對電源電壓與工作環境要求較高的現狀，安裝時應執行兩端電纜屏蔽層接地的工藝規定，并在相關回路上加裝抗干擾接線端子，在網線及二次回路中合理配置避雷器，在直流電源處加設穩壓與濾波設備，在變電站控制室裝設調節室溫的空調設備，交流電源處加裝雷電吸收器、提高網絡線和光纜抗外力破壞的能力，保證自動化繼電保護裝置接線的牢固可靠等安全技術措施，輔助提升計算機裝置的安全可靠性，并對電力工程重要質量環節（如：遠方后臺反映監測、GPS對時精度、遠動通道質量及全站模擬精度等），進行科學管控。對于變電站改造工程，若出現設備不能停運的情況時，應利用技術手段完善安全措施，例如可用模擬開關校驗新裝置，實現不停電服務。同時要不斷積累施工經驗，總結和完善不停電典型作業規范以及繼電保護安全管理新措施，為安全施工創造良好的環境。

2.3　依據安全保護要求，強化驗收投運及運行

根據繼電保護的相關要求，我們必須嚴格組織設備驗收，及時進行運行維護。除了一些常規整組保護傳動試驗外，還應著重強化對各項設備遙信、遙控、遙調與遙測操作的驗收。依據各項設備客觀特征，制定適應性很強的操作運行規程，并列出運行要點。各類報告書、工程竣工圖紙以及技術資料應及時報送相關部門，并做好系統數據的存儲備份工作，進而為后續的維護運行、改造檢修做好充足的技術準備。另外應進一步強化運行維護人員的現場培訓，提升其業務素質及對新設備熟練掌握的程度，進而直接提升設備運行維護的質量。設備投入運行之前，相關人員應熟悉變電站電氣主接線以及運行方式，熟練掌握計算機操作技巧，并通過嚴格考核合格后，方可擔任相關工作。同時還應進行事故預想，能夠準確、清晰地對后臺信號進行分析并判斷故障。為隨時記錄故障情況，要將GPS對時與故障錄波裝置列為重點巡查對象，以便對系統故障進行科學的分析與處理。一些變電站在經過綜合自動化改造后，其各類電源電壓均統一為直流二百二十伏，包括控制、保護、信號等電源，使得室外設備的直流回路明顯增加，因此，應切實加強室外二次回路的安全維護管理工作，努力降低直流接地而引發故障的幾率。

3.結束語

總之，鑒于電力系統繼電保護的特征以及管理現狀，我們只要根據現實工作需要，系統而科學地制定安全管理策略，強化在選型設計、設備訂貨、安裝調試、，驗收投運以及運行維護等各個環節的全過程管理，才能切實提升電力系統繼電保護的安全性，以適應電力系統的自動化改造，并充分發揮其功能優勢，大大提升電力系統的服務水平和經濟效益。

參考文獻

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一、交通規劃課程應用問題驅動教學法的可行性分析 

傳統教育理念以教師為主體，對學生進行填鴨式教學，很難調動學生積極性，導致學生缺乏創新精神。現代教育理念強調啟發式教學，以學生為主體、教師為主導，通過調動學生積極性引導學生思考、探究問題，培養學生敏銳、客觀、批判性地學習和創造知識的能力和品質。[3][4] 

啟發式教學法是在辯證唯物主義的認識論指導下批判地繼承過去的教學理論遺產，在現代心理學和教育學的基礎上發展和完善起來的。該方法根據教學任務和學習規律，從學生實際出發，采用多種方式，以啟發學生思維為核心，調動學生的學習主動性和積極性，促使其生動、活潑地學習。其特點是強調學生是學習主體，教師要調動學生學習積極性，實現教師主導作用與學生積極性相結合；強調學生智力的充分發展，實現系統學習知識與充分發展智力相結合；強調激發學生內在學習動力，實現內在動力與學習責任感相結合；強調理論聯系實際，實現書本知識與直接經驗相結合。[3][4]在啟發式教學過程中，問題和案例常被用于啟發學生思考以探求真理。問題驅動是學習和研究的原動力和推動力，基于問題驅動的教育教學模式有助于培養學生的創新精神和意識，有利于實現成果導向教育目標，達到工程教育認證標準。[4] 

加拿大麥克馬斯特大學的醫學教育項目最早倡導問題驅動學習法。[5]該方法是一種使學生學會學習的教學活動，針對剛畢業的醫學院學生雖有大量專業知識卻缺乏臨床應用能力的缺點，以學生為中心，強調以問題為學習的起點，而不像傳統教學那樣先學習理論知識再嘗試解決問題。[6]后來，這種教學策略逐步被推廣到商學、教育學、建筑、法律、工程等學科的教學活動中，對于培養學生自主創新和解決實際問題的能力具有明顯的促進作用。[7][8]交通規劃具有宏觀、抽象、知識點多、涉及面廣、貼近生活等特點，適合采用問題驅動教學法激發學生學習興趣、促使學生理論聯系實際。 

二、交通規劃課程應用案例主導教學法的可行性分析 

案例是人們在生產、生活中所經歷的典型事件的陳述或故事的有意截取，對于人們的學習、研究和生活具有重要意義，常作為一種工具對學生進行說服和教育。案例教學法是一種以案例為基礎的教學法，本質上是提出一種教育的兩難情境，沒有特定的解決之道，而教師在教學中扮演著設計者和激勵者的角色，鼓勵學生積極參與討論。不像傳統的教學方法，教師是一位有學問的長者，扮演著傳授知識的角色。[9]這種教學方法通過案例向學生傳遞有針對性的教育意義的信息，有助于激發學生學習積極性，幫助學生學會理論聯系實際。 

以往的交通規劃課堂教學大多采用灌輸式教學模式，一般是根據教材設計的內容體系給學生講解基本原理、模型和方法等。這種以教師為主體的傳統灌輸式教學方法不利于調動學生的學習積極性，激發不了學生的學習興趣，也達不到培養卓越工程師的要求。[4]啟發式教學法能夠很好地調動學生學習的興趣和積極性。為調動學生學習積極性，教師在教學過程中通常安排課外大作業，并要求課堂匯報，然而，教學效果依然不盡如人意。究其原因可能是任課教師對于啟發式教學法的理解還不夠透徹、運用還不夠自如，在課堂教學過程中所述事例不夠生動、形象，所介紹的案例比較少。另一方面，一些工程實踐案例過于復雜，不適合也很難直接應用于課堂教學。由此可見，選擇合適的案例，并采用案例主導教學法有助于提高交通規劃課程的教學效果。 

三、問題驅動和案例主導的交通規劃課程教學方案 

為提高交通規劃課程的教學質量和水平，使學生能夠積極、主動地學習該課程，通過該課程的學習能夠真正掌握該課程的核心理念和精髓，具備從事相關設計和研究的能力，筆者提出問題驅動和案例主導的交通規劃教學思路。針對核心知識點，利用啟發式問題和主導式案例引導學生主動思考，弱化龐雜的理論模型和算法。借助交通規劃軟件，讓學生模仿示范案例自己制作案例，然后在課堂上講解和討論。通過實際操作與演練調動學生學習積極性，引導學生課外自學具體的模型與算法，從而培養學生發現、分析和解決問題的綜合能力。 

（一）核心知識點 

筆者查閱國內外有關交通規劃理論與方法的教材、專著和文獻等資料，梳理交通規劃課程的核心知識點，將這些知識點進行分層、分類，并繪制核心知識點結構圖。例如，圖1為四階段交通需求預測模式，包括各個階段之間的關系以及各階段的內涵示意圖?！。ǘ﹩l式問題 

運用啟發式教學法的核心在于啟發式問題的設計，通過問題啟發學生思考，使其對問題感興趣，在尋求答案的過程中掌握理論知識的核心內容、體會理論知識的重要性及其與工程實踐的聯系。這樣的啟發式問題可能來自現實需求或理論需要，包括知識銜接性問題和現實需求性問題。 

知識銜接性問題即銜接已有知識點與未知知識點的那些問題。一方面，在每堂課開始介紹知識點之前，教師可提出與先修課內容或上一堂課內容有關的問題，促使學生對已有知識進行回顧，并順理成章地接受本堂課所要介紹的內容。另一方面，在每堂課講解知識點之后，提出與下一堂課內容或后續課程內容有關的問題，啟發學生思考本堂課所授知識點的作用和價值，并為學生拓寬知識面和主動學習奠定基礎。在課堂教學過程中，首先通過啟發式問題使學生回顧上一堂課所講授的主要內容，加深對已有知識點的理解和記憶；然后通過啟發式問題引入本堂課要講授的主要內容，使學生帶著問題學習新知識，在解決問題的過程中理解和記憶新的知識點；最后通過啟發式問題引出下次課將講授的主要內容，培養學生善于思考和靈活運用所學知識的能力。例如，在開始介紹“緒論”之前，可以提出幾個問題：“你熟悉交通嗎？”“你經常遇到什么樣的交通問題？”“你怎樣理解交通？”“你認為如何解決交通問題更有效？”通過這些問題引導學生主動思考，在他們回答問題之后做出總結并順利地引出交通規劃在解決交通問題中的地位與作用。當解釋交通規劃含義時，首先可以問學生“你的人生規劃是什么？”“你的職業規劃是什么？”，然后再給出交通和規劃的科學定義，最后可以告訴學生，“你們現在開始應該科學地規劃一下自己的人生、職業和生活”。使用問題驅動法在知識點之間以及理論與實踐之間設計一系列環環相扣的問題，使學生從已知到未知、從現象到本質，在探究問題的過程中學習并掌握理論知識，從而樹立發現、分析和解決問題的意識，并培養正確的科學素養。 

現實需求性問題即由實際交通規劃需求所產生的統計、預測、評估、設計等問題。這些問題可能來源于對交通現象的解釋或描述，也可能來源于科研實踐中碰到的困難或解決方案等。在授課過程中，可通過啟發式問題引導學生發現現實生活中存在的問題，理解理論知識在解決現實問題過程中的價值，培養學生理論聯系實際、運用理論知識解決實際問題的能力。例如，在講解五大交通運輸方式及其優缺點時，可以向學生提出以下問題：“你寒暑假回家時采用什么樣的交通方式？”“你更喜歡哪種交通方式？為什么？”“你認為未來哪種交通方式的發展空間較大？為什么？”當介紹城市道路系統形式時，可以提問：“北京市的道路網是什么形式的？有什么特點？”“大連市的道路網又是怎樣的形式？為什么不能構建成北京的那種路網形式？”通過這些問題驅使學生理解現實需求與理論發展之間的關系，樹立理論指導實踐、具體問題具體分析的理念和思路。 

（三）主導式案例 

交通規劃是一門實踐性很強的課程，案例教學法對該課程教學具有重要作用。一方面，教師可使用交通規劃軟件編制虛擬案例，通過虛擬案例增強學生對理論模型和算法的理解與運用。例如，采用一個虛擬案例解釋出行生成預測過程中的P-A平衡（即產生量-吸引量平衡）問題。通過該案例可以使學生更清楚、更直觀地了解出行生成預測中存在的P-A不平衡問題以及進行P-A平衡的算法。借助專業軟件設計的這種虛擬案例能讓學生更深刻地理解理論、公式、算法的含義和本質，還可以使學生熟悉專業軟件，培養學生抓住問題本質和使用專業軟件解決實際問題的能力。另一方面，介紹交通規劃軟件中的已有案例或來自工程實踐的交通規劃案例，通過這些實際案例讓學生了解交通規劃問題及其實際來源，從實際問題中感受理論發展的需要和必要性，以及交通規劃理論對工程實踐或現實生活的指導作用和意義。例如，圖2顯示了使用交通規劃軟件TRANSCAD實現某區域交通需求預測的重要步驟。通過這種實際案例的介紹，學生能夠真實地了解實際工程需求、實際問題、實際操作過程，也提高了理論聯系實際、針對實際問題提出解決方案的能力。 

無論是虛擬案例還是實際案例，都可以通過案例介紹讓學生真實地感受到實際應用過程中常犯的錯誤以及正確的做法。例如，在TRANSCAD軟件使用過程中，初學者經常由于操作不精確導致所劃小區個數與設想不符。教師可以進一步地通過分析讓學生理解案例所揭示問題的深刻含義。 

（四）教學內容設計及實踐檢驗 

將核心知識點、啟發式問題和主導式案例融入交通規劃課程的教學內容和過程中，通過啟發式問題或主導式案例的引入突出交通規劃課程的主要知識點，強化核心知識點。經過教學內容的重新設計，形成以問題驅動和案例主導為特色的交通規劃課程教學方案。 

通過教學實踐，對新教學方案進行直接和間接檢驗。直接檢驗指的是學生在本門課程學習過程中的表現以及課程考核成績。間接檢驗指的是學生在后續課程學習過程中或參加各類相關科技競賽或科研訓練活動中對相關知識的應用和移植能力。 

四、結語 

為提高交通規劃課程的教學質量，課題組提出問題驅動和案例主導的交通規劃課程教學改革思路。首先，梳理該課程的核心知識點。其次，設計啟發式問題和主導式案例。然后，以問題驅動和案例主導為特色制作交通規劃多媒體教學課件。最后，通過教學實踐檢驗和完善新的教學思路和方案。問題驅動和案例主導的教學思路符合學生學習特點，適用于具有較強工程實踐特點的交通規劃課程，有助于培養學生發現、分析和解決問題的能力，同時有助于培養學生深刻認識問題、生動活潑地表達觀點以及團隊合作等方面的能力。綜上，問題驅動和案例主導的教學思路具有較好的應用價值。 

[ 參 考 文 獻 ] 

[1] 邵春福.交通規劃[M].北京：北京交通大學出版社，2012. 

[2] 湯天培，徐勛倩，王鈺明.任務驅動法在交通規劃課程教學中的應用[J].高等建筑教育，2013（6）：78-82. 

[3] 趙彥如.高等教育教學方法研究[J].科技資訊，2009（26）：240. 

[4] 付冬梅.問題驅動的教學方法研究與實現[J].大學教育， 2014（4）：1-3. 

[5] Neville AJ. Problem？鄄based learning and medical education forty years on： A review of its effects on knowledge and clinical performance [J]. Medical Principles and Practice： International Journal of the Kuwait University， 2009（1）：1-9. 

[6] Barrows HS. Problem-based learning in medicine and beyond： A brief overview[J]. New Directions for Teaching and Learning， 1996（68）：3-12. 

[7] Gasser KW. Five ideas for 21st century math classrooms [J]. American Secondary Education， 2011（3）：108-116. 

篇9

一、勞動爭議仲裁與勞動爭議訴訟的關系

（一）勞動爭議訴訟應當嚴格執行仲裁前置制度。

根據勞動法和相關司法解釋的規定，勞動爭議仲裁（以下簡稱仲裁）是勞動爭議訴訟的必經前置程序，即勞動爭議案件必須經過仲裁程序，方可向人民法院提起訴訟，否則未經仲裁而直接起訴的，人民法院不予受理。在這里，“勞動爭議案件經過仲裁前置程序”包括以下兩種情形：一是確實經過仲裁前置程序的情形，即仲裁委員會在實體上作出仲裁裁決；二是視為經過仲裁前置程序的情形，即仲裁委員會在程序上作出不予受理的書面結論，包括裁決、決定、通知書三種形式。其中，第二種情形是根據最高人民法院《關于審理勞動爭議案件適用法律若干問題的解釋》（以下簡稱《勞動爭議解釋》）第二條至第四條規定，而“視為”經過仲裁前置程序的。

在審判實務中，勞動爭議仲裁前置制度已為廣大司法工作者普遍理解和接受，但是仍有個別人員在嚴格執行該規定上還存有疑意。例如：對勞動爭議當事人已向仲裁委員會提出仲裁申請，而仲裁委員會又長期不作出仲裁裁決，或者不作出是否受理的書面結論的，有人認為如確實屬于仲裁委員會怠于履行職責，而長期不作出仲裁裁決或者不作出是否受理的書面結論的，也可視為爭議已經經過仲裁前置程序，人民法院應予受理。筆者認為，勞動爭議仲裁是訴訟的法定前置程序，凡當事人已向仲裁委員會提出仲裁申請，但仲裁委員會未作出仲裁裁決或者不作出是否受理的書面結論的，都屬于未經仲裁前置程序的情形，人民法院均不應受理。

（二）仲裁與訴訟的銜接問題。

1、勞動爭議訴訟與民事訴訟的關系。

勞動爭議訴訟雖然適用的是民事訴訟法的規范體系，但是其與民事訴訟有一定區別。勞動爭議訴訟適用民事訴訟法，以及勞動爭議案件在人民法院內部分工管轄上由民事審判業務庭審理，此等情形或制度并不能說明勞動爭議訴訟在性質上就是民事訴訟。勞動爭議訴訟適用民事訴訟法的規定，實際上是“借用”民事訴訟程序規定，這與當初行政訴訟“借用”民事訴訟程序規定的情形相類似。勞動爭議處理程序，從仲裁到訴訟，是一個完整的自成體系的程序過程，有其自身的規范體系和特征性，不能因其在訴訟階段“借用”民事訴訟程序，而完全以民事訴訟的規范和理念來排斥勞動爭議處理程序本身的規范和特征。相反，人民法院在運用民事訴訟程序規范處理勞動爭議案件過程中，在某些環節上，更應當以勞動爭議程序規范在訴訟階段的特殊規定，來影響和改變某些民事訴訟程序原有的規范及理念之適用。

2、“不告不理”原則在勞動爭議訴訟中的特殊體現。

在起訴與訴訟請求的關系問題上，勞動爭議訴訟案件的審理具有很強的特殊性。這種特殊性集中體現在“人民法院應當對勞動爭議進行全面審理”這點上，即仲裁裁決作出后，如當事人不服而在十五日內起訴的，仲裁裁決不發生法律效力，而由人民法院對該勞動爭議進行全面審理。不服勞動爭議仲裁裁決而訴至法院的當事人往往都是仲裁程序中敗訴的一方，這里所稱“敗訴方”一般有兩類：一是在仲裁程序中實體權利未得到保護或未得到充分保護的當事人一方；二是在仲裁程序中被裁決承擔責任的當事人一方。對于以前述第一類“敗訴方”作為原告起訴的，其訴訟請求的核心就是保護實體權利，其起訴的目的與訴訟請求之間具有一致性。對于以第二類“敗訴方”作為原告起訴的，其起訴在實質上并沒有什么具體的訴訟請求，其起訴之目的就是不服仲裁裁決而通過起訴使其不生效，進而將勞動爭議交由人民法院審理并作出判決。對于后一種情況，依照相關法律及司法解釋的規定，人民法院不得不處理原告未請求的事項，對此有人認為違背了“不告不理”的司法原則。其實，這種情形并不能說明勞動爭議訴訟違背“不告不理”原則，相反說明了勞動爭議訴訟的特殊性影響和改變了“不告不理”原則的具體表現形式。在勞動爭議訴訟程序中，“不告不理”原則的特殊性主要反映在以下三個方面：

第一、訴爭請求可經由仲裁程序向訴訟程序“移植”而形成。勞動爭議訴訟是以仲裁為前置程序的一種特殊訴訟程序，對于后續進行的訴訟程序而言不能將其與前置的仲裁程序截然相分離，也即已經經過的仲裁程序因素對訴訟程序來說仍然具有某種程序價值意義。比如，當事人在仲裁程序中提出的請求和主張對訴訟而言仍然可以有效，換言之，“不告不理”原則在勞動爭議訴訟中，應當從仲裁與訴訟兩個程序的結合中才能得到完整體現。但是，同時應當看到，仲裁與訴訟畢竟是兩個不同的程序，而訴訟所要解決的仍然是原有的爭議，由此產生一個如何將仲裁程序中的爭議事項“移植”到訴訟程序中來的問題。對該問題，可從以下兩方面加以解決：一是人民法院及法官必須充分行使釋明權，明確告知雙方當事人“仲裁裁決因一方當事人起訴而不生效”、“當事人應針對原勞動爭議提出訴訟請求或者進行反駁，并且承擔相應的舉證責任”等重要事項，促使當事人將其在仲裁程序中已呈請的訴爭請求以及提交的證據“移植”到訴訟程序中來，從而達到“人民法院對勞動爭議進行全面審理”的訴訟要求。二是人民法院與仲裁機關應當加強協作配合，建立起仲裁程序材料（包括仲裁申請書、仲裁審庭記錄等）向人民法院移送或復印的制度，為當事人向訴訟程序“移植”相關訴爭請求及證據材料提供物質載體形式。

第二、在訴訟中當事人可提出與仲裁訴爭內容“具有不可分性”的訴訟請求?！秳趧訝幾h解釋》第六條規定“人民法院受理勞動爭議案件后，當事人增加訴訟請求的，如訴訟請求與訴爭的勞動爭議具有不可分性，應當合并審理；如屬獨立的勞動爭議，應當告知當事人向勞動爭議仲裁委員會申請仲裁”，其中“當事人增加訴訟請求”是指相對于原仲裁程序中的訴爭請求而在訴訟程序中新增加的訴訟請求。因而，對“經由仲裁前置程序后，人民法院對勞動爭議應當進行全面審理”制度中的“全面審理”應作如下理解：即人民法院審理勞動爭議案件所要解決的爭議內容，從程序發展過程來看，既包括已經進行的仲裁程序中反映出來的訴爭，也包括仲裁程序中未出現但與已經經過的仲裁程序中的爭議“具有不可分性”的訴爭，也即人民法院審理勞動爭議訴訟案件，不完全受制于已經經過的仲裁程序中的訴爭內容的限制，可以適當超過該勞動爭議在仲裁程序中所訴爭內容的范圍。

第三、當事人的訴爭請求應當在訴訟程序中另行提出。不管是在仲裁程序中已提出的訴爭請求，還是在訴訟程序中增加的訴訟請求，都必須有待于當事人在訴訟程序中明確提出來，只有如此才能成為人民法院“全面審理”的對象，否則確實有違“不告不理”訴訟原則。但是，由于勞動爭議訴訟具有特殊性，當事人在訴訟程序中提出訴訟請求的形式可與一般的民事訴訟有所區別，表現在勞動爭議訴訟的起訴與訴訟請求的提出兩者可以相分離。根據前述“人民法院應當對勞動爭議案件進行全面審理”的制度規定可見，對于勞動爭議來說，只要當事人任意一方不服仲裁裁決而起訴，人民法院就應當對爭議進行全面審理，其他沒有起訴或者沒有反訴的當事人，如果仍然堅持其在仲裁程序中的訴爭請求或者另行提出與訴爭的勞動爭議具有不可分性的訴訟請求的，可直接向人民法院提出該具體的訴訟請求，而不必另行起訴或者提起反訴，并且人民法院應當對各方當事人的訴訟請求一并作出判決。而對于一般的民事訴訟而言，人民法院只能針對起訴或者反訴的一方當事人的訴訟請求作出判決。這就是勞動爭議訴訟與一般民事訴訟在起訴與訴訟請求的關系問題上的區別。

3、勞動爭議訴訟程序應不存在反訴問題。

對于雙方當事人均不服仲裁裁決而起訴的情形，《勞動爭議解釋》第九條規定“先起訴的一方為原告，后起訴的一方為被告，但人民法院應對雙方的訴訟請求一并作出裁決”，由此可見，勞動爭議訴訟從程序規范上已排除了反訴制度的存在。同時，根據反訴的原理，反訴得以成立應當具有以下三個構成要件：1、反訴是用來抵銷本訴的；2、反訴是獨立的訴；3、反訴與本訴有一定關聯性。因此，在勞動爭議訴訟程序中，反訴要得以成立也必須滿足上述三個條件。但是，一般而言，那些在勞動爭議訴訟中被認為是提出反訴的，其目的往往都是為了反駁本訴，而不是為了抵銷本訴。而且，前已述及《勞動爭議解釋》第六條規定“人民法院受理勞動爭議案件后，當事人增加訴訟請求的，如訴訟請求與訴爭的勞動爭議具有不可分性，應當合并審理；如屬獨立的勞動爭議，應當告知當事人向勞動爭議仲裁委員會申請仲裁”，可見相對于起訴一方當事人的另一方當事人，如果其提出獨立于原勞動爭議之訴訟請求，則人民法院應告知當事人向仲裁委員會另行申請仲裁，這也從根本上排除了勞動爭議訴訟程序存在反訴的可能。綜上，由勞動爭議訴訟程序規范的特殊性規定，使得勞動爭議訴訟在反訴的構成要件上缺乏“反訴是用來抵銷本訴”和“反訴是獨立的訴”兩個要件，從而決定了勞動爭議訴訟程序無法像一般的民事訴訟程序那樣可以容納反訴制度的存在。

4、起訴與原仲裁裁決效力的關系。

根據有關法律及司法解釋的規定，勞動爭議仲裁裁決作出后，如當事人在收到裁決之日起十五日未起訴，則仲裁裁決發生法律效力，如當事人在此期間內提起訴訟，則仲裁裁決不發生法律效力。在審判實務中，時?？梢妱趧訝幾h案件經人民法院審理認為原仲裁裁決內容并無不當的情形，對此有的法院按一般的民事訴訟程序理念處理，即駁回不服仲裁裁決一方當事人的訴訟請求，并且認為在其作出駁回訴訟請求的判決生效后原仲裁裁決即視為生效。這種對案件的處理方法及其認識，與前述法律及司法解釋關于“仲裁裁決因起訴而不生效”的規定相予盾，顯然是錯誤的。正確的作法應當是，對經過全面審理認為原仲裁裁決的內容并無不當的，人民法院應當將仲裁裁決中具有執行內容的部分吸收到判決主文中來。不過應當看到，雖然仲裁裁決因起訴而不生效，但是也存在仲裁裁決在當事人起訴后經由特定的程序事項而生效的特定情形。最高人民法院《關于人民法院對經勞動仲裁裁決的糾紛準予撤訴或駁回起訴后勞動仲裁裁決從何時生效的解釋》明確規定，仲裁裁決在起訴后經一定的程序事項又生效的情形只有兩種：一是當事人申請撤訴經人民法院審查準予撤訴的；二是當事人因超過訴訟期間而被人民法院裁定駁回起訴的。除此以外，仲裁裁決不存在起訴后經由一定的程序事項而生效的其他情形。因而，那種認為對勞動爭議訴訟案件經過審理認為仲裁裁決的內容并無不當而駁回原告訴訟請求后，原仲裁裁決即生效的觀點是錯誤的。

二、工傷保險賠償與人身損害賠償的關系

（一）工傷保險賠償與人身損害賠償的程序關系。

在人民法院審理的勞動爭議案件中，工傷保險賠償糾紛居于突出地位，而在人民法院審理的人身損害賠償糾紛中，含有雇傭關系因素的糾紛又占有一定比例。雖然雇傭關系不屬于勞動法調整的勞動關系，而屬于民法直接調整的范圍，但是由于雇傭關系也包含一定的勞動因素，因而勞動關系與雇傭關系在某些外在特征上具有相似性的一面，尤其是在勞動關系中發生的工傷保險賠償糾紛與在雇傭關系中發生的人身損害賠償糾紛兩者在某些方面更具有相似性。因此，正確區分這兩類案件是審理好兩類案件首先應當解決的問題。

依照我國勞動法所反映的價值傾向，對凡具有勞動因素的用工關系或雇傭關系，都應納入勞動法調整的范圍和勞動行政機關行政管理的范圍，并且對工傷賠償實行的無責任補償的原則（有的稱為無過錯責任原則），這些制及理念體現了國家立法及行政管理對勞動者及雇工的特殊保護，符合對弱勢群體進行特殊保護的社會正義。因而，對那些在養老、工傷保險等制度較為健全的用人單位工作，訂有規范勞動合同的固定工，在其工作過程中發生傷亡事故，按工傷糾紛以勞動爭議程序處理，對此爭議不大。但是，在審判實務中，工傷賠償案件或者與勞動因素有關的人身損害賠償案件，較多發生在那些未訂立勞動合同的農民工、臨時工、雇工等人員身上。對這類案件，如果依照前述勞動法所體現的價值理念，自然可按勞動爭議的工傷賠償案件處理。但是，對這類案件，如果是以民事法律規范來考量，又具有雇用關系的法律特征，從而可以人身損害賠償案件來進行處理。對同一類案件，分別適用工傷賠償與人身損害賠償不同的法律制度處理，對當事權利保護的程度影響較大。雖然，當事人選擇工傷賠償制度求償，可因工傷賠償適用無過錯責任原則及隨之而來的受害人舉證責任的減少，從而使一些如果選擇人身賠償制度，將得不到賠償或者賠償較少的工人或雇員，從工傷賠償制度中獲得某種實體或程序上的利益。但是，工傷保險賠償糾紛處理機制及程序具有繁瑣、復雜、冗長的特點，其在勞動爭議訴訟程序之處，還要經歷仲裁前置程序，工傷認定程序（對勞動行政機關作出的工傷認定不服的，當事人可申請行政復議，并且還可提起行政訴訟）。對于那些在法律特征上可歸為雇傭關系的農民工、臨時工、雇工等人員而言，他們較少有時間、精力和現實條件來承受工傷保險賠償爭議處理機制繁瑣、復雜、冗長的程序過程，工傷保險賠償爭議處理機制對他們來說已經失去了特殊保護的價值意義，反而成為一種負擔和羈絆。因而，應當允許他們根據具體情況，選擇是按工傷賠償制度求償，還是按人身損害賠償制度求償。

從《最高人民法院公報》公布的幾個典型勞動爭議案件來看，如“劉明訴鐵道部第二十工程處第八工程公司、羅友敏工傷賠償糾紛案”、“龍建康訴中洲建筑工程公司、姜建國、永勝縣交通局損害賠償糾紛案”、“張連起、張國莉訴張學珍損害賠償糾紛案”等，均是把那些依照勞動法的規定應當適用勞動法調整的、未訂立勞動合同的用工關系，作為雇傭關系而以民事法律規范處理其中發生的傷亡賠償問題。這種司法處理方式，在實務操作上落實了對弱勢群體的特殊保護，而不是在外在形式上、觀念上表達對弱勢群體的特殊保護?！蹲罡呷嗣穹ㄔ宏P于審理人身損害賠償案件適用法律若干問題的解釋》（以下簡稱《人身損害賠償解釋》）第十一條“雇員在從事雇傭活動中遭受人身損害，雇主應當承擔賠償責任……”明確規定了雇傭關系中的人身損害賠償責任制度，這體現了對審理前述案件審判經驗的司法總結。但是，該《人身損害賠償解釋》第十二條第一款規定“依法應當參加工傷保險統籌的用人單位的勞動者，因工傷事故遭受人身損害，勞動者或者其近親屬向人民法院起訴請求用人單位承擔民事賠償責任的，告知其按《工傷保險條例》的規定處理”，該規定的內容與我國勞動法將那些雖具有勞動因素但實為雇傭的關系也納入勞動法進行調整和保護的政策相一致。但是，如果嚴格執行該規定，則最高人民法院公布的前述案件就應當按勞動爭議處理，即應當經仲裁前置程序和工傷認定程序，而不能作為人身損害賠償案件由人民法院直接受理。因此，對該規定可以理解為，是為與我國勞動保護政策保持一致的一種政策性宣示，在審判實務中應當靈活掌握。

（二）工傷認定問題。

我國對工傷保險實行的是無責任補償原則，并建立工傷保險基金，實行社會統籌，用人單位承擔全部保險費，職工個人不交費。在工傷事故發生后，工傷保險待遇不僅體現為工傷保險賠償金的支付，而且還包括其他一系列工傷保險待遇。工傷待遇體現了國家對勞動者的特別保護，但是勞動者要享受工傷待遇，必須經由特殊的工傷認定程序。無論是過去的《工傷保險試行辦法》還是現行的《工傷保險條例》，均規定工傷認定是勞動行政部門的職權行為。同時，有關勞動法及司法解釋規定，當事人對工傷認定不服，還可以提起行政復議以及行政訴訟。以上說明，工傷概念及工傷認定的規定，淵源來自于勞動法，在民法中不存在有關工傷的規定，即“工傷”概念及其相關制度是勞動法背境下的特定事物。因而，對工傷認定問題必須依從勞動法的規定，人民法院審理勞動爭議案件不得違背相關規定而對是否構成工傷的問題逕行作出自己的認定。

在審理工傷賠償案件中，時常發現未經工傷認定的情形，其中有的案件完全缺乏工傷認定材料，有的案件則是由勞動能力鑒定委員會作出“工傷×級”的鑒定結論，而當事人將此結論錯誤地作為工傷認定的結論，甚至有的審判人員也作如是認識。筆者認為，對于未經工傷認定，且當事人是對否構成工傷有爭議的案件，人民法院不能逕行作出工傷賠償的判決，對這類案件的處理，可有兩種方法：一是按民事訴訟法的相關規定中止對案件的審理，告知當事人向勞動行政機關申請工傷認定；二是以工傷認定是勞動行政機關的職權為由，駁回當事人的起訴。

有觀點認為，對于用人單位對勞動者構成工傷無異議的案件，可不必經由勞動行政機關的工傷認定，可由人民法院直接作出已構成工傷的認識判斷，從而判決工傷賠償。筆者認為，這種觀點值得商榷。第一、是否構成工傷的問題與是否按工傷賠償標準進行賠償的問題是兩回事，對于雖未經工傷認定但當事人協商同意按工傷標準進行賠償的，當然可從其自愿，但是人民法院不宜因當事人認可構成工傷而作出是已構成工傷的確認判斷；第二、對于已參加工傷保險的，工傷保險賠償金由兩部分組成，一是由社會保險經辦機構支付的部分，二是由用人單位支付的部分，對其中應由用人單位支付的賠償金部分自然可以依從當事人的意思自治，但對于應由社會保險經辦機構支付的部分，則必須依賴于勞動行政機關的工傷認定才能支付，在這種情況下，如果人民法院自行作出是否構成工傷的確認，則有可能與勞動行政機關依職權作出的工傷認定結論相矛盾。

（三）工傷保險賠償與人身損害賠償的競合。

工傷保險賠償與人身損害賠償的競合，主要有兩種情形：第一、因用人單位以外的第三人侵權造成勞動者人身損害同時又構成工傷的；第二、用人單位構成人身損害賠償侵權致勞動者人身損害同時又構成工傷的。對于前者，已失效的《企業工傷保險試行辦法》第二十八條，不久前生效的《人身損害賠償解釋》第十二條第二款，均明確規定勞動者可向第三人請求賠償；對于后者，根據《人身損害賠償解釋》第十二條第一款的規定，只能按工傷賠償程序處理。

篇10

關鍵詞：暗紋東方鲀（Takifugu obscurus）；維氏氣單胞菌（Aeromonas veronii）；致病性；分離；鑒定

中圖分類號：S941.42 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）03-0629-04

2010年10月，江蘇某特種水產養殖場養殖的暗紋東方鲀（Takifugu obscurus）發生死亡。病魚主要表現為腹部極度膨大，紅腫，體表及胸鰭、腹鰭和臀鰭殘缺，鰭條基部充血、出血。解剖發現腹腔內有大量淡黃色帶血的腹水流出；肝臟腫大，呈土黃色，有大小不一的出血斑塊；膽囊膨大；腸道無食，充滿泡沫狀黏液，腸黏膜出血。取癥狀典型的瀕死暗紋東方鲀心臟、肝臟病灶進行細菌分離培養，獲得一株優勢菌株。本研究通過對分離菌進行形態觀察、生理生化試驗、16 S rDNA序列分析，初步鑒定該菌為維氏氣單胞菌（Aeromonas veronii），命名為NT-HV，同時對其毒力及藥物敏感性進行試驗，旨在分析該菌的分類地位、致病因素、篩選敏感藥物，為有效防治暗紋東方鲀維氏氣單胞菌病提供依據。

1 材料與方法

1.1 病料

病料取自江蘇某特種水產養殖場，瀕死暗紋東方鲀體表出血，鰭條缺失、出血，紅腫、突出。解剖后發現，腹腔極度積水，肝臟腫大、出血。

1.2 實驗動物

清潔級6周齡成年雄性ICR小鼠，體重（25±2） g，由南通大學實驗動物中心提供。暗紋東方鲀購自水產市場，每尾重80～100 g，試驗前在持續流水的水泥池（500 L）中馴養2周，證實健康無病后用于試驗。試驗期間水溫控制在25 ℃左右，投喂暗紋東方鲀專用配合飼料。

1.3 試劑

Taq DNA酶和DNA Marker（DL 2000）購自TaKaRa公司；細菌微量生化鑒定管、藥敏試紙購于杭州天和微生物試劑有限公司，小量細菌基因組DNA抽提試劑盒購自生工生物工程（上海）股份有限公司（批號SK8255），其他試劑均為分析純。

1.4 病原分離

選擇具有典型癥狀、瀕死的暗紋東方鲀，無菌操作取其心臟、肝臟，大豆酪蛋白瓊脂培養基（Tryptose soya agar，TSA）平板劃線分離細菌，30 ℃培養24 h，選取優勢菌在TSA平板上純培養，挑取單個菌落進行革蘭氏染色，光學顯微鏡下觀察。將分離菌株用斜面保存。

1.5 生化試驗

取斜面保藏菌株進行動力試驗及微量生化管試驗。動力試驗用半固體營養瓊脂穿刺培養。微量生化管試驗按產品使用說明操作。

1.6 溶血活性檢測

將分離菌接種至血液瓊脂（含7%家兔脫纖血的營養瓊脂）培養基，30 ℃培養24 h，觀察菌落周圍是否出現溶血圈。

1.7 毒力試驗

將分離菌接種至胰酪胨大豆肉湯（TSB）培養基，30 ℃ 靜置培養36 h，5 000 r/min離心10 min，收集菌體，0.15 mol/L NaCl稀釋菌體，用活菌計數法[1]測定菌液濃度，并將菌液稀釋為1.8×108、0.9×108、1.8 ×107、0.9×107、1.8 ×106、0.9×106、1.8 ×105、0.9×105 CFU/mL共8個濃度梯度，每個濃度接種6只ICR小鼠（腹腔注射，0.2 mL/只）和10尾健康暗紋東方鲀（鰭背注射，0.2 mL/只），對照組注射等量的無菌生理鹽水。連續觀察7 d并記錄小鼠和暗紋東方鲀的死亡時間和數量。按Reed-Muench法計算分離菌的半數致死量（LD50）。

1.8 16 S rDNA基因序列測定與系統發育學分析

1）PCR模板DNA的制備。將分離菌株接種于TSB培養基，30 ℃ 培養16 h，小量細菌基因組DNA抽提試劑盒提取菌體DNA作為PCR模板。

2）16 S rDNA基因序列的PCR擴增與測序。設計16 S rDNA基因的2條通用引物：27F（正向引物）：5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′；1492R（反向引物）：5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′，引物由上海英俊生物技術有限公司合成，-20 ℃保存備用。50 μL反應體系：無菌超純水36 μL，10×PCR Buffer 5 μL，1.5 mmol/L MgCl2 4 μL，4×dNTPs 1.0 μL，引物各0.5 μL ，2.5 U/μL 的Taq DNA聚合酶1.0 μL，模板DNA 1 μL。PCR反應條件為：95 ℃預變性3 min；94 ℃變性1 min，55 ℃復性1 min，72 ℃延伸2 min，30個循環；72 ℃溫育6 min。PCR擴增產物由生工生物工程（上海）股份有限公司進行基因序列測定。

3）16 S rDNA基因序列同源性分析及系統發育樹構建。通過NCBI的BLAST檢索系統（http：//ncbi.nlm.nih.gov/Blast/）對供試菌株的16 S rDNA基因序列進行同源性分析后，從結果中獲取相似的23種氣單胞菌菌株16 S rDNA基因序列，并利用Mega 4軟件構建系統發育樹。

1.9 藥敏試驗

根據第一批正式轉為國家標準的漁藥目錄[2]，選取復方新諾明、新霉素、氟苯尼考、氧哌嗪青霉素、四環素、強力霉素、羧芐青霉素、氨芐青霉素藥敏試紙，按試紙說明進行試驗，并用保藏的Escherichia coil BL21作為對照菌，30 ℃培養16 h觀察結果。

2 結果與分析

2.1 分離菌的形態及培養特性

光學顯微鏡下觀察，分離菌為革蘭氏染色陰性、散在、兩端鈍圓、無芽孢的小桿菌。經30 ℃培養24 h，菌落在TSA平板上為不透明、表面光滑、略凸、直徑3～4 mm、邊緣整齊的乳白色菌落；在血液瓊脂培養基上（含7%家免脫纖血的營養瓊脂）培養24 h呈β-溶血。

2.2 分離菌的生理生化特性

取斜面保藏菌株進行動力試驗及微量生化管試驗，結果顯示該菌具有動力性，不發酵木糖、鼠李糖、山梨醇等，不產硫化氫，尿素試驗陰性，半乳糖和枸櫞酸鹽試驗陽性，其他生化特性見表1。通過細菌生化試驗，初步確認該菌為維氏氣單胞菌，命名為NT-HV。

2.3 毒力試驗結果

用不同濃度的分離菌NT-HV菌液分別接種ICR小鼠和健康暗紋東方鲀，小鼠每組6只，暗紋東方鲀每組10尾，接種后觀察并記錄每組的死亡情況，結果如表2所示。分離菌NT-HV對小鼠和暗紋東方鲀均具毒力。按Reed-Muench法計算該菌對小鼠和暗紋東方鲀的LD50分別為2.26×106 CFU/mL、5.96×104 CFU/mL。小鼠人工感染后主要臨床癥狀為精神萎靡，食欲不振，腳趾、鼻尖出血；解剖癥狀為腹膜充血，肝臟壞死，腸道臌氣，脾腫大。暗紋東方鲀人工感染后主要臨床癥狀為紅腫，體表及胸鰭、腹鰭和臀鰭基部充血、出血；解剖發現其肝臟腫大，有大小不一的出血斑塊，腸黏膜出血。

2.4 16 S rDNA基因的測定及分析

以菌株NT-HV的基因組DNA為模板，PCR擴增16 S rDNA 片段，測序結果顯示克隆片段長1 444 bp。將其基因序列用BLAST進行同源性比較，依據同源性檢索結果，選取不同氣單胞菌種屬的代表株構建系統發育樹，其與維氏氣單胞菌16 S rDNA基因序列相似性為99%（圖3）。因而，從分子水平上進一步證實分離菌株NT-HV為維氏氣單胞菌。

2.5 藥敏試驗結果

藥敏試驗結果顯示氟苯尼考、復方新諾明、新霉素、氧哌嗪青霉素為該菌的敏感藥物，四環素、強力霉素、羧芐青霉素、氨芐青霉素對該菌無作用，對照菌E. coil BL21對上述藥物均有敏感性。

3 討論

維氏氣單胞菌又稱凡隆氣單胞菌、維羅納氣單胞菌，1983年美國疾病預防與控制中心為紀念法國微生物學家Veron在弧菌和氣單胞菌研究中的貢獻而命名。該菌普遍存在于淡水、污水、土壤乃至海水中，其中一部分菌株在微生態環境中正常存在，而另一些菌株具有致病性，主要感染變溫動物，如中華絨螯蟹、框鏡鯉、中國大鯢、錦鯉、西伯利亞鱘等[3-7]，可引起大量死亡；維氏氣單胞菌對恒溫動物是一種條件致病菌，但有人認為免疫功能健全者也可被感染[8]，通?；颊甙l生急性腹瀉，也可能引起菌血癥、腦膜炎和心內膜炎等[9，10]。近年來，日益增多的病例表明維氏氣單胞菌已成為一種重要的人-魚共患致病菌，在食品安全上有重要的研究意義，部分國家已經將其規定為食品安全的檢疫對象。

暗紋東方鲀俗稱河豚，是具有極高經濟價值的特種水產養殖對象，隨著暗紋東方鲀人工繁殖、營養及無毒人工養殖等綜合養殖技術的不斷完善，暗紋東方鲀高密度、集約化養殖規模不斷擴大，病害已成為制約該行業發展的主要因素之一。維氏氣單胞菌引起的暗紋東方鲀疾病在生產實踐中已經出現并在同一養殖場連年發生，造成一定的經濟損失。本研究對暗紋東方鲀病變組織進行細菌分離純化，獲得一株致病性維氏氣單胞菌，在國內外首次報道暗紋東方鲀相關疾病，為暗紋東方鲀維氏氣單胞菌病的防控提供參考。

本研究將分離菌株NT-HV分別人工感染ICR小鼠和健康暗紋東方鲀，引起小鼠和暗紋東方鲀發生死亡，半數致死量都很小，證實分離株具有較強的致病性，這一結果和Sung等[11]報道的對蝦的半數致死量相當。通過三個養殖周期的記錄分析，每年10月份氣溫逐漸下降，露天養殖的暗紋東方鲀進入溫室，環境變化、魚體在轉運過程中的應激反應等因素是導致疾病發生的原因，在該種疾病的防治過程中應引起重視。

抗菌藥物的使用是動物生產和疫病防治的重要措施，但抗菌藥物的不科學使用，致使藥物殘留、環境污染和細菌耐藥已經成為一個世界關注的獸醫公共衛生問題。本研究藥敏試驗選取的藥物是中國水產養殖中允許使用的常用藥物，其中四環類素藥物耐藥性的產生原因值得關注，通過對養殖現場的調研發現土霉素是該場常用藥，這可能是產生耐藥性的主要原因之一，同時提示在藥物的使用中應注意藥物的濃度和合理輪換。雖然本研究選取敏感藥物有效控制了暗紋東方鲀的發病，但該菌的耐藥性正逐漸形成，應予以高度重視。

參考文獻：

[1] 曹澍澤，郭玉璞，董國雄，等.獸醫微生物學及免疫學技術[M].北京：北京農業大學出版社，1992.199-251.

[2] 王玉堂，呂永輝.第一批正式轉為國家標準的漁藥（概述）[J].中國水產，2011（8）：34-36.

[3] 房 海，陳翠珍，張曉君，等.中華絨螯蟹病原維氏氣單胞菌的檢驗[J].中國共患病學報，2008，24（1）：45-50.

[4] 龔 倩，高淑琴，單曉楓，等.框鏡鯉致病性維氏氣單胞菌的分離鑒定[J].中國預防獸醫學報，2010，32（12）：981-983.

[5] 王 旭，顏其貴，雷 燕，等.中國大鯢腐皮病病原菌的分離與鑒定[J]. 中國共患病學報，2010，26（10）：944-948.

[6] 秦國民，張曉君，陳翠珍，等.錦鯉維氏氣單胞菌感染癥及其病原生物學特性研究[J]. 安徽農業科學，2008，36（19）：8115-8117.

[7] 馬志宏，楊 慧，李鐵梁，等. 西伯利亞鱘（Acipenser baerii）致病性維氏氣單胞菌的分離鑒定[J]. 微生物學報，2009，49（10）：1289-1294.

[8] WU C J， WU J J， RAN J J， et a1. Clinical significance and distribution of putative virulence markers of 116 consecutive clinical Aeromonas isolates in southern Taiwan[J]. Journal of Infection，2007，54（2）：151-158.

[9] CHIM H， SONG C. Aeromonas infection in critically ill burn patients[J]. Burns，2007，33（6）：756-759.