導語：如何才能寫好一篇青春之火，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

篇1

你們好！

我是190班的，我給大家演講的題目是《點燃青春之火，成就輝煌人生》

同學們，青春無限好，只因沒拼搏。只有釋放青春的激情，才有輝煌的明天。讓青春烈火燃燒永恒，讓生命閃電劃過天邊，用所有熱情換回時間，讓年輕的夢沒有終點！

青春，是我們一生中最美麗的季節，她孕育著早春的生機，展現著盛夏的熱烈，暗藏著金秋的碩實，昭示著寒冬的希望，充滿詩意而不缺乏拼搏的激情，時尚浪漫而又飽含著奮斗的艱辛。當一個人的青春融匯到一個時代、一份事業中，這樣的青春就不會遠去，而這份事業也必將在歲月的歷練中折射出耀眼的光芒。

說到這里，我想起了這樣一句話：“有的人活著，他已經死了；有的人死了，他還活著。”生命的意義在于活著，那么活著的意義又是什么呢？當然不是為了活著而活著，答案只有兩個詞，堅持與拼搏！我們可以設想一下，不付出、不創造、不追求，這樣的青春必然在似水年華中漸漸老去，回首過往，沒有痕跡，沒有追憶，人生四處彌漫著嘆息。我想，這絕對不是我們存在的意義。

古往今來，有無數能人志士通過堅持與拼搏成就了不朽的人生：司馬遷受宮刑后寫成《史記》，姜子牙年邁助武王伐紂，蒲松齡晚年鑄就《聊齋志異》。這些能人志士的成功是與堅持分不開的。

篇2

大家好，我演講的題目是《收獲的青春，是奮進的號角》 。青春，是我們一生中最美麗的季節，它孕育著早春的生機，展現著盛夏的熱烈，暗藏著金秋的碩實，昭示著寒冬的希望!充滿詩意而不缺乏拼搏的激情，時尚浪漫而又飽含著奮斗的艱辛!

我曾經聽過這樣一段話“青春，永遠是美好的，可是真正的青春只屬于那些永遠忘我勞動，永遠謙虛，永遠力爭上游的人。” 當我來到華潤的第一天，我就默默記下了這樣一句話：與您攜手，改變生活。雖然只是幾個簡單的詞語，但卻蘊藏著每一個年輕人一生的追求。

“對酒當歌，人生幾何”作為一個80后的年輕人，心中閃爍著夢想，現在就是我們努力實現夢想的時候，當前我們華潤正處于一個繼往開來，高速發展的關鍵時刻，于是就有了這樣一些人，他們把青春書寫在繁忙的工地，他們讓汗水揮灑在偏僻的鄉間，無論是在怎樣平凡的崗位上，他們實踐著華潤人的簡單、坦誠、陽光，為地方社會經濟的發展傳遞著一個又一個準確而明了的信號，也傳送著他們對事業的無限執著和忠誠。

當一個人把自己的青春融入到事業當中的時候，那么他的青春不會流失，他的事業也必將在歲月的歷練中折射出耀眼的光芒!如果我們不付出，不創造，不奉獻，不去追求自己的事業，那這樣的青春必然會稍縱即逝。如果回首過去，沒有追憶，人生渺茫，這絕對不是我們所渴望青春的意義。

我們選擇了華潤，從某種意義上來說，就已經選擇了奉獻。無論我們將來是在繁華都市，還是在偏僻的鄉村，無論是在肅靜的辦公室、還是在喧囂的工地，激揚的青想最終都將沉淀成感恩的心情在這里駐足，扎根。來到華潤我們不去考慮我們失去了什么，我們得到的將是最為寶貴的信仰，我們沒有辜負自己的青春，因為我們正用汗水見證著成長，用奉獻丈量著價值，擁有青春的華潤人在這片我們無限熱愛的土地上上創造著人生的奇跡，抒寫著青春的樂章。

讓平凡的人成為優秀的人、讓優秀的成為卓越的人。在這里，各位先輩們滿懷工作的熱情，年輕人們都擁有遠大的理想，我們是滿懷青想的一代，雖然我們來自于五湖四海不同的地方，將來工作在不同的崗位上，但我們擁有一個共同的向往，將自己的青春揮灑在這篇熱土上。在這里，我們恪守著同樣的信仰，寫下同樣的承諾，懷揣著同樣的夢想，擁有同樣的青春。縱使我們的一生平淡無華，也無關緊要，因為只有我們自己最清楚，華潤需要我們傾心的付出，而這些付出就是一種奉獻，它不分大小，不分多少，不分先后。讓我們悄悄地奉獻，因為我們的青春會因為奉獻而變得充實美麗。

擁有青春的人們，讓我們拿出年輕人開拓的精神，創新的激情，展現青春的風采，調和生命的油彩，秀出激昂的主旋律!

篇3

為幫助高中學生提前了解高校學習環境，提高他們將對大學生活的適應性，同時進一步引導我校學生深入參加社會實踐，鍛煉成長，提升xx大學的社會知名度、美譽度，決定將于20××年寒假組織優秀在校大學生回高中母校開展青春分享匯報交流的志愿者活動。活動具體安排如下：

一、活動主題

感恩高中母校，分享石大青春

二、活動對象

xx大學全日制在讀本科生、研究生

三、活動內容

組織優秀在校大學生利用寒假，返回高中母校拜會恩師，向同學、老師分享在xx大學的成長故事、生活體驗以及高考經驗，匯報個人成長情況，展示xx大學魅力風采，普及生涯規劃知識，并通過中學微信、微博、網站和中學本地新聞媒體對活動進行廣發宣傳。同時，按要求完成相關調研活動。

四、活動安排

（一）報名推薦（20××年11月1日-11月26日）

此次活動采用個人報名形式，報名結束后，工作人員將按照報名人員所屬中學或所屬中學所在地進行統一分組分配。具體報名條和方式如下：

1、報名條：熱愛學校，關心關注學校的建設和發展；有較強的責任心，具有一定的宣傳組織能力和口頭表達能力；成績良好；有較強的安全意識，遵紀守法，身體健康；有較強的團隊精神和執行力；能夠參加學校、學院寒假前組織的專門培訓。

2、報名方式：

（1）獲得學院推薦。關注微信公眾平臺“xx大學招生就業”，點擊下拉菜單“青春分享”，下載填寫《xx大學20××年（第三屆）“感恩高中母校，分享石大青春”寒假青春分享志愿者報名表》，交學院輔導員審核蓋，獲得學院推薦。

（2）提交報名材料。獲得學院推薦后，再次進入微信公眾平臺點擊下拉菜單“青春分享”進入線上報名平臺，按要求字段完成線上報名，同時將通過輔導員審核蓋的報名表拍照上傳至線上報名平臺，線上提交報名材料截止時間20××年11月26日24:00。紙質檔報名材料學生自己留存，后期和其他材料統一上交備案。

(二)培訓考核（20××年11月27日-12月1日）

1、培訓安排：此次活動分為校院兩級培訓。報名完成后，招生就業處將根據參與同學宣講中學或宣講中學所在地的情況，對通過線上報名的同學進行分組（團隊或個人），并統一組織開展校史校情、生涯知識及生涯故事分享技巧、學校招生概況及志愿填報技巧等相關培訓。培訓期間實行考核制，缺席2次及以上取消該同學活動參與資格。培訓時間初定為20××年11月27日-12月8日，具體時間將另行通知。

同時，此期間建議學院自行組織通過本院推薦的同學開展針對學院宣傳的培訓以及活動相關注意事項，以便本院學生能夠更好的展現自我風采、學院風采，回答本院相關問題。

2、資格認定：為進一步提高活動質量，提升活動效果。招生就業處將對團隊或個人進行考核，考核方式為宣講試講，試講過程需配套使用ppT展示，時間控制在6-8in，各學院試講評審團由各學院指定專人負責，通過試講的組別，其成員將獲得培訓結業證書。考核時間初定為20××年12月11日-1日，具體時間另行通知。

同時，培訓考核期間各團隊或個人還需完成聯系中學的任務，通過宣講試講并取得宣講中學接收回執的團隊或個人將正式獲得分赴實踐活動的志愿者資格。

（三）出征儀式（20××年12月末-20××年1月初）

組織志愿者舉行出征儀式，儀式結束后組織志愿者領取相關宣講物資，并為正式獲得分赴實踐活動資格的同學統一購買保險。

（四）活動開展（20××年1月中旬-20××年2月末）

志愿者分赴各中學開展青春分享志愿者活動，完成活動相關任務。請志愿者在開展活動的過程中，做好相關的宣傳記錄，注意留存宣傳場面的照片或視頻等影像資料，并做好在學校平臺、高中學校網絡媒體以及當地新聞媒體的宣傳報道工作。

（五）總結表彰（20××年月上旬）

1、活動總結：20××年春季學期開學兩個星期內，所有志愿者團隊或個人需提交活動總結材料。提交材料包括：

（1）回中學開展招生宣傳的影像資料，包括參加活動的合影、場面照片、活動視頻等。

（2）活動總結，包括活動整個流程、效果的介紹、母校聯系人及聯系方式、此次活動的收獲以及遇到的困難，對xx大學招生宣傳活動的建議和意見等。分組為團隊的需提交一份團隊總結和各個成員的個人總結，分組為個人的提交個人總結即可。

（3）其他相關工作反饋信息。具體提交方式和交還相關宣傳物資的方式將另行通知。

按照要求提供活動總結材料的志愿者團隊和個人，將獲得此次活動的志愿者證書和紀念品。憑借志愿者證書，志愿者在參照相關學校社會實踐學分認定辦法進行學分認定時，招生就業處可向志愿者出具相關認定證明。

2、評優表彰：20××年春季學期，將通過自愿申報、組織答辯的方式對此次活動的團隊和個人進行評優表彰，最終將評出優秀團隊、優秀個人若干，并頒發獲獎證書。同時，將根據此次活動的情況對各學院評出此次活動的優秀組織獎，并頒發獎牌。具體評優表彰辦法另行通知。

五、注意事項

篇4

（一）活動主題：用青春鑄造生命之梯

（二）活動形式及目的

1、形式：以講座的形式在室內播放ppt,并讓同學們分組討論由主題題材引出的問題。

2、目的：充分調動同學們的積極性,使同學們全心全意加入到整個活動中來;教育同學們,生命的價值所在,并鼓勵他們做有意義的事情,來證明我們90后的大學生不會是玩物喪志的一代;進一步發揚見義勇為的精神,將中國人的傳統美德發揚并傳承下來。

（三）活動時間及地點

1、時間： 2010年11月24日上午10：00-11：10﹙選擇在這一天是因為今天距離三位英雄大學生死之日剛好是一個月﹚

2、地點：文瀾105

（四）參加人員：商務英語0903班全體同學

二、活動流程

（一）準備工作

1、由班長劉瑞準備材料并制作ppt;

2、由生活委員柯玲昌負責借教室;

3、班長劉瑞和團支書姚丹對提出討論的問題作出了深刻地探討

（二）活動過程

本次活動由團支書姚丹主持,活動的第一個步驟是觀看“長江大學的大學生勇救落水兒童”事件的有關新聞報道。視頻結束后,團支書詢問“有誰記住了這三位英勇犧牲的大學生的名字”的問題,同學朱曉林積極地站起來,并作出了正確的回答。然后,團支書又組織大家為三位英雄作十秒鐘的默哀。接下來，針對該事件提出問題——三位大學生因救兩名落水兒童而犧牲到底值不值得，同學們對此進行了分組討論。全班總分成五組，現場討論氣氛極為熱烈，討論時間長達四十分鐘之久，最后由每組派出代表進行發言。每個小組的代表都作出了積極而深刻的回答，這五位代表分別是李悅蓉同學、蒙濛同學、田卓然同學、何凱同學、柯玲昌同學和邱戈同學。

蒙濛同學說，生命的價值是不能用天平來衡量的，是不能用數量去比較的；田卓然說，生命是無價的，重要的是人們在乎它，珍惜它，就如電影《拯救大兵瑞恩》中，用一支部隊來拯救一個戰士，這是珍惜生命的最好的體現；柯玲昌說，在現代的教育模式下，這樣做已經成為我們大學生的本能。作為一個人，特別是作為一個有知識、有道德的人，我們有責任、有義務這樣做。簡而言之，這是我們應該做的。

………

聽，一句句簡短有力的話語，無不體現出90后大學生的正義之心，無不顯示出新一代大學生崇高而偉大的思想境界。同學們說，假如是他們在現場的話，也會毫不猶豫地投入到拯救生命的行列中去。這也正說明我國的素質教育正在蓬勃向上地發展，舍己為人的精神已經深深地嵌 入了大家心中。

同學普遍認為，大學生的英勇行為給社會帶來了一股暖流，期待這種精神能被發揚光大。還有同學說，三個年輕美麗的生命譜寫出壯美的仁愛之歌，舍己救人的精神在我們90后身上放出奪目的光芒！他們青春的光芒照亮了很多人的心！之后又播放了一段中央電視臺《新聞1+1》欄目關于此事的報道，主持人評論90后是值得前人欽佩的一代，90后的大學生沒有拋棄自己應該繼承的優良品質。這極大地激勵了所有90后的大學生發揚優良品質的積極性。

最后，本次團日活動在歌曲《生命》低沉而動聽的歌聲中結束。

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國泰君安分析師高輝認為，按照光線的投資比例估算，票房5.2億元的話，光線應該能收入6200萬元，刨去成本，能獲得凈收入4300萬元。他在研報中表示：“《致青春》雖面臨《鋼鐵俠3》、《被解救的姜戈》等影片的挑戰，但競爭影片與《致青春》題材的差異性反而可能有助于其票房表現，因此我們上調《致青春》票房預測至7.5億元，預計公司獲得凈收入6507萬元。”

西南合成更名北大醫藥

5月8日，方正集團與北京大學醫學部簽署戰略合作協議，雙方將在學科建設、人才引進、學術交流、醫療管理、品牌聯合等方面展開深度合作。

雙方將著力打造北大國際醫院，建成鼓勵社會機構舉辦醫療機構的典型，并實現領跑醫療體制改革的目標。西南合成成為最先受益的公司，按照戰略合作協議，北大醫學部支持北大方正集團醫藥產業板塊使用“北大醫藥”品牌。西南合成公告，公司證券簡稱9日起更名“北大醫藥”。

方正集團旗下共有兩家A股上市公司，更名后的北大醫藥是其醫藥板塊產業唯一的整合平臺。借助資本市場平臺，北大醫藥將逐步實現從原料藥、制劑、醫藥流通到醫藥研發、醫療服務等全產業的整合。

央企國企包攬巨虧榜

曾經貴為“天之驕子”的上市央企和地方國企，包攬了2012年上市公司巨虧榜前十位。十大巨頭去年虧損近500億元。

其中，中國遠洋繼2011年凈虧104億元后，2012年再度虧損95億元，蟬聯虧損冠軍。緊隨其后的中國鋁業、中國中冶、*ST鞍鋼、馬鋼股份、山東鋼鐵、安陽鋼鐵、*ST鋅業、華菱鋼鐵、*ST二重中，也有不少在今年“披星戴帽”。

統計顯示，88家ST公司中，有20家公司連續兩年虧損，按規定“披星戴帽”實施退市風險警示。在這20家公司中，央企上市公司居然有13家，占比高達65%。

今年來上市公司再融資翻番

據上證資訊統計，截至5月8日，A股共有95家上市公司完成實施再融資，合計募集資金1516.82億元，而去年同期內則僅有36家上市公司實施再融資，合計募集資金778.86億元，今年兩項數據分別同比增長163%與94%。在剔除了單獨向控股股東定向增發的資產注入型再融資外，今年以來共有85家上市公司完成增發，合計募集資金1316.84億元，同比也分別上升174%與107%。

今年一季度市場整體回暖的跡象十分明顯，這或許成為今年上市公司再融資規模倍增的重要原因。

一天內13家公司公告重組

IPO遲遲未能重啟，上市公司開始集中宣布重組。僅5月6日一天，便有13家上市公司同時有關重組的公告。

上市公司公告顯示，13家相關重組公告的公司中，武昌魚、大商股份、天業股份、大連熱電、襄陽軸承、遠興能源、中航電測、吉艾科技等8家公司了重大重組進展公告，公司因重組事宜繼續停牌。山鷹紙業、珠峰2家了公司重大重組獲得中國證監會可申請受理的公告，武漢控股收到證監會關于重大重組事項恢復審核的公告。*ST太光、ST成霖2家則是因重大重組事宜而停牌的公告。

407家公司一季報虧損

Wind統計顯示，在2013年一季度中，共有407家上市公司宣布不同程度出現虧損，而對比這些公司的2012年年報情況則可以看出，這407家公司中有269家公司在2012年以盈利的狀態出現在投資者面前。這些公司中，虧損額度超過億元的共有15家。其中，ST傳媒一季報業績同期下滑了107.81倍，而年報同期上漲104.55%。

從這269家2013年一季度虧損而2012年年度盈利的公司的情況來看，269家公司中一季度虧損額度最高者為中海集運，約虧損6.9億元；其次是中海發展、重慶鋼鐵等公司。虧損額度最小的是科冕木業。

變臉上市公司中有近一半被ST股占據。這些公司中，2012年度利潤最高者有6402萬元，而最少者也有107萬元的凈利潤，但在2013年一季度，這20家公司中凈利潤虧損最高者有8155.7萬元的虧損，最少者也有36萬元的虧損。

華爾街英語全新品牌標識

華爾街英語（中國）5月7日在北京正式對外全球全新logo及其蘊含的一系列創新理念。發展至今，華爾街英語已在全球 27 個國家和地區擁有了超過450家的學習中心，此次改變創新的核心理念是讓華爾街英語全球形象一體化，同樣的標識，同樣的學習模式，同樣的環境和氛圍，明確樹立起它全球化的品牌形象。

此外，華爾街英語還特邀國際知名建筑設計師Fabio Novembre（法比奧？諾文布雷）親自操刀設計全新概念的學習中心。設計完成后，華爾街英語將率先在中國推出全球首家概念店。

陽光城廈門熱銷11億創紀錄

4月26日，陽光城廈門翡麗灣項目公寓房源首次開盤，當天實現認購1115套、總銷售面積99492平方米、總認購金額11.08億元。這一紀錄不僅刷新了陽光城集團歷史上最大規模的開盤紀錄，更創造了廈門房地產史上單次推盤量和單次開盤成交量最高紀錄。

陽光城？翡麗灣位于廈門重點發展的翔安南部新城首期開發區。作為陽光城闊別16年后在廈門再度開發的首個項目，本次推出的公寓房源主要包含70～90平方米的兩房、三房，及110～120多平方米的三房或四房，成熟的產品和瞄準剛需、改善型自住需求的準確定位獲得市場的熱烈反饋。

精準的投資策略、高速高效的運營體系、適銷對路的產品結構，陽光城集團著力打造的三大核心競爭能力，在廈門翡麗灣項目的運轉中一一凸顯。而本次銷售紀錄的刷新，更是陽光城集團響應客戶主流需求，響應國家樓市政策調控的積極舉措。企業主動調整產品結構和形式，以適銷對路的剛需產品最終贏得了市場的肯定。

分區域情況顯示，陽光城此前已推進的“區域聚焦、深耕發展”的戰略布局收獲實效。除福州、廈門外，一季度陽光城集團在西安、蘭州等地，其項目也相繼推盤成為當地樓市熱銷產品，其中西安林隱天下和蘭州林隱天下項目分別以2.8億元、2.1億元簽約銷售額排名當地樓市前列，陽光城也成為當地市場排名第6、第4位的主要房企。

篇6

或許我們注定平凡甚至卑微，但即使最卑微的花朵也有屬于她的絢麗的春天。面對生命中那數不盡的挫折失敗與苦難，年輕的朋友啊，不要因此而意志消沉喪失挑戰人生的信心與勇氣，須知人生必是在經歷無數次磨難之后，才會綻放出它奪目的光芒。做一個胸中有夢的人吧，在

逆境中挑戰自我超越自我，展開理想的翅膀向著你人生的光輝彼岸縱情飛翔，用火熱的青春去

奏響那壯麗的人生樂章，青春的焰火必會繁花一樣在生命的枝頭迎風怒放。

我知道生活不會是鋪滿鮮花的坦途，隨波逐流茍且偷生者的流言、誹謗、中傷難以迷失我前進的方向。

在困厄苦難中學會仰望，在孤獨寒冷的冬夜燃一枝耀眼的火炬高舉在黑暗中央----把我高貴如黃金的傲骨做一面驚世的旗幟獵獵飛揚，胸懷似火的激情即使命運的重重鎖鏈也不能令我軟弱、投降。沒有任何力量能夠摧毀壓彎我筆直的脊梁。

飛翔----向著光明，飛翔。是我今生矢志不渝的夢與信仰。

生活更像是一只巨大的沙漏，我愿不停的搬運，不讓它空著。

‘寶劍鋒從磨礪出，梅花香自苦寒來。生命的意義本就在于從不停的奮斗、不懈的探索、艱苦的錘煉中得到升華，我們承受傷痛更收獲快樂。

路漫漫其修遠兮，吾將上下而求索。詩人是用一腔熱血譜寫了他不朽的傳奇，他是我前進的動力與榜樣。

一朵沙漠中卑微的小花

腳踏酷暑頭頂烈日

依然

艱苦卓絕的開放

----那是我向穿行于暴風中的山鷹

篇7

二、活動背景：作為21世紀的青年，大學生是社會中最積極、最活躍、最有生氣的力量。新學期伊始，為了給同學們注入一股新的能量，樹立文明風尚，引導同學直面青春，激勵班級“要志存高遠，增長知識，錘煉意志，讓青春在時代進步中煥發出絢麗的光彩”。 同時也能夠加強我班的建設，增強我班的凝聚力、創造力，全面提升我班學生的綜合素質，豐富我們的大學生活。在此，國商2團支部響應分團委的號召，特舉辦“樹國商文明風，筑青春正能量”的主題團課活動。

三、活動意義：本次活動將引導廣大團員青年正確理解青與文明風的深刻內涵，引導團員青年明確個人的青想，并采取實際行動，將夢想落實到學習生活中去，落實到刻苦成才的實踐中去，并在學習生活中養成文明習慣，成為一個有夢想，有素質的大學生。

四、活動時間：XX年10月20日

五、活動地點：至善401

六、活動對象：國商2團支部全體成員

七、活動流程策劃

1、主持人宣布團課正式開始。

2、開場舞《浪漫櫻花》

3、歌曲：《搶不走的夢想》

4、視頻：《開講啦》

5、互動：感悟青春正能量

6、小品：《掃地》

7、朗誦：《青春中國》

8、團支書總結

9、合影留念

八、活動安排

1、 活動前期準備

(1)：班委召開班會，討論活動舉辦過程，分配各自的任務。

(2)：教室申請、設備租借及現場人員安排。

(3)：文娛委員負責節目的策劃及表演的安排。

(4)：宣傳委員負責將有關本次活動的事項告知班級同學并讓同學們做好準備，安排班級所需要的宣傳物品。

(5)：會場布置

2、活動中期

(1)：主持好晚會的開展。

(2)：維持現次序不要影響同學的表演。

(3)： 觀看同學的表演，積極鼓掌。

3、活動后期

生勞委員安排同學進行班級打掃及物品的歸還，宣傳委員負責團課記錄，安全委員安排同學有序離場。

九、注意事項

1、 活動每個環節派出負責的同學，維持活動秩序。

2、 做好同學的請假工作。

3、 活動現場要指揮有序，文明進行。

4、 注意現場的安全。

5、 教室設備保護和檢查。

6、 活動期間若麥克風、音響等儀器失靈，則場控人員要控制好同學們的情緒。

7、 打掃好班級衛生。

十、緊急處理：在活動中若多媒體設備不能用，自備小音箱。

十一、經費預算

活動材料打印：10元

會場布置：50

設備租借：60

總計：120元

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【摘要】 目的 觀察滅活的雙歧桿菌對菌群失調及免疫功能低下致小鼠腸源性感染的治療作用。方法 70只昆明種小鼠隨機分為7組，除正常對照組，菌群失調小鼠與免疫功能低下小鼠兩種動物模型各設活菌組、死菌組、自然恢復組，每組10只，灌胃治療后檢測臨床血清學指標。結果 活菌組、死菌組同自然恢復組相比，臨床血清學指標恢復至正常對照組水平。結論 雙歧桿菌滅活菌懸液具有與活菌懸液相同的治療小鼠腸源性感染作用。

【關鍵詞】雙歧桿菌 腸源性感染 血清學

Serology analysis on heat-killed Bifidobacterium adolescentis curing enterogenic infection in mice

SUN Jie1, LUO Yuan2, QIAO Dan2, WANG Min2, MA Xiao-Wan2, LUN Yong-Zhi2

【Abstract】 Objective To observe the curing effect of heat-killed bifidobacterium to mice with enterogenic infection caused by dysbacteriosis and immunocom promise. Methods A total of 70 mice were randomly divided into 7 groups. The animal models of dysbacteria mice and immunocom promise mice set up living bacterium group, heat-killed bacterium group, spontaneous recovery group respectively, and normal control group (10 of each). After intragastric administration therapy, the serum indexes were detected. Results Versus spontaneous recovery group, all indexes of live strains group and heat-killed strains group recuperated to normal control level. Conclusion The heat-killed bifidobactera are effective in the treatment of enterogenic infection in mice, and the effect is the same as that of the living bifidobactera.

【Key Words】 Bifidobacterium；Enterogenic infection；Serology

腸源性感染即腸道中致病菌或條件致病菌通過腸黏膜侵入血循環和/或其它臟器引發的感染。目前腸源性感染已成為醫院內感染的主要來源，其病死率超過30%［1］。正常情況下，包括雙歧桿菌、乳桿菌在內的正常菌群黏附于腸黏膜，形成空間位阻，抵抗外來菌的入侵。目前已有雙歧桿菌制劑研制成功并投放市場，成為防治腸源性感染的首選藥物。但國內外開發的制劑均是活菌，其有效期不過一年，這使其應用范圍與條件受到很大的限制。已有研究表明滅活的雙歧桿菌制劑可能具有與活菌相同的防治腸源性感染的功效［2］。

本文通過檢測實驗小鼠的臨床血清學指標，初步研究了滅活的雙歧桿菌對菌群失調與免疫功能低下致小鼠腸源性感染的治療作用，為進一步研制雙歧桿菌滅活制劑打下扎實基礎。

材料與方法

一 材料

1 菌株：雙歧桿菌DM8504菌株引自大連醫科大學微生態學研究所，經中國科學院微生物研究所鑒定，該菌株為青春雙歧桿菌（Bifidobacterium adolescentis）。

2 實驗動物：健康昆明種小鼠70只，雌雄各半，鼠齡6-8周齡，體重為20±2g，購自大連大學實驗動物中心。

二 方法

1 雙歧桿菌菌懸液的制備［2］：將雙歧桿菌接種至BS肉湯培養基中，37℃厭氧培養48h，菌懸液4000r/min離心10min，分離得到SCS。用生理鹽水（Normal Sodium，NS）重懸細菌，所得菌懸液分為活菌組和死菌組。其中死菌組水浴滅活處理（經BS肉湯檢菌，證明滅活菌存在，并且仍保持正常細菌形態）。將活、死兩組菌懸液用NS洗3次，離心棄上清，SCS重懸活、死雙歧桿菌沉淀，使菌懸液濃度均達到1×1011 CFU/mL。

2 實驗動物分組與造模：將昆明種實驗小鼠隨機分為10組，具體分組見表1。用9g/L NS配制成濃度為200g/L青霉素（大連美羅藥業股份有限公司生產，100萬單位青霉素鈉/1.0g/瓶）溶液，3組小鼠進行青霉素液腹腔注射，0.2ml/只/d，連續3d，造成菌群失調動物模型。用9g/L NS配制成濃度為5mg/mL環磷酰胺（江蘇恒瑞醫藥股份有限公司）溶液，3組小鼠進行環磷酰胺液腹腔注射，0.3mL/只/d，連續3d，造成免疫功能低下動物模型。從第4d開始，活菌組采用雙歧桿菌活菌懸液灌胃；死菌組采用雙歧桿菌滅活菌懸液灌胃；自然恢復組小鼠采用NS灌胃，均為0.4ml/只/d，連續3d。

3 臨床血清學指標檢測：實驗小鼠分別摘眼球采血處死，利用日本Olypus-AU400全自動生化儀對γ-谷氨酰氨轉肽酶（GGT）、血清尿素氮（BUN）、乳酸脫氫酶（LDH）和血肌酐（CRE）進行測定．所有數據經SPSS 12.0統計軟件進行兩獨立樣本的t檢驗分析．

結果

實驗組小鼠經雙歧桿菌活菌懸液、滅活菌懸液以及NS灌胃治療后，檢測包括正常對照組小鼠在內的臨床血清學指標，見表2。菌群失調小鼠中的活菌組、死菌組各死亡1只，自然恢復組死亡2只；免疫功能低下小鼠中的活菌組死亡2只，死菌組和自然恢復組各死亡3只；正常對照組死亡1只小鼠。

兩種實驗小鼠中死菌組與活菌組、正常對照組比較，GGT、BUN無明顯差異，LDH則明顯下降；死菌組與自然恢復組比較，GGT、BUN顯著下降。死菌組與活菌組、正常對照組、自然恢復組比較，CRE無明顯差異，但雙歧桿菌菌懸液治療效果較明顯，其中活菌組小鼠血清中CRE水平比死菌組小鼠更加接近正常值。

菌群失調實驗小鼠中死菌組與自然恢復組比較，LDH雖無明顯差異，但死菌組小鼠血清中LDH水平比自然恢復組小鼠接近正常值；而免疫功能低下實驗小鼠中死菌組與自然恢復組比較，LDH水平顯著升高且接近正常值。

討論

現已明確以雙歧桿菌為主的專性厭氧菌定植于腸黏膜上皮，能阻止條件致病菌（多為G-桿菌與球菌）對腸黏膜的黏附和定植，具備所謂的定植抗力，是防止細菌或（和）內毒素移位進而發生腸源性感染的重要因素［4］。臨床上由于抗生素濫用、燒傷或創傷、應用免疫抑制劑等會引起腸道內條件致病菌過度繁殖、全身和腸道的黏膜屏障損傷及免疫功能障礙，從而導致腸道菌群失調，損害腸道益生菌的定植抗力，是致病菌和（或）內毒素橫向經腸黏膜逸出腸腔并形成腸源性感染的重要誘因［5-7］。

目前認為雙歧桿菌一方面通過代謝產生大量的乳酸和乙酸，降低腸道的pH及Eh值，改善局部微環境，促進腸菌群失調的恢復［1］；另一方面移位進入血循環，從而激活單核巨噬細胞系統的吞噬和殺菌功能，并促進應激狀態下腸黏膜損傷的修復，維護腸黏膜屏障結構和功能的完整性，從而減少腸道細菌和（或）內毒素移位；再者雙歧桿菌直接刺激腸道免疫系統誘生sIgA，特別是其中的胃腸道相關淋巴組織（gut-associated lymphoid tissue，GALT），而sIgA可以有效地包被革蘭氏陰性桿菌，封閉細菌表面與腸黏膜上皮細胞結合的特異性位點，使對機體有害的細菌代謝產物釋放受抑，細菌對腸黏膜上皮侵襲力因而減弱，并對腸道條件致病菌直接起殺菌作用，減少腸道細菌移位的數量［1,3］。

但活菌制劑普遍存在保藏及運輸不易等缺點，而滅活的死菌制劑，具有細菌濃度穩定，不會隨時間的延長而出現遞減的可能；不會經腸道轉移造成二度感染；沒有抗藥基因轉移，不會出現增加病原菌抗藥性的危險；不易受胃酸屏障的影響；可與抗生素合用等諸多優點。

研究表明雙歧桿菌無論是否滅活，均可黏附于腸黏膜上皮細胞，而且雙歧桿菌滅活菌懸液具有與活菌相似的生態效應，因此對腸道生理菌群具有一定的調節作用，并進而通過與其它厭氧菌一起占據腸黏膜表面，形成生物學屏障，阻止病原菌及條件致病菌的定植和入侵，從而阻止腸源性感染的發生［2,8］。

由于腸源性感染與血液和（或）臟器感染直接相關，因此可以通過檢測某些臨床血清學指標的變化來監控其發生與發展，甚至預后。其中，BUN與GGT水平的增高分別與急慢性腎病和肝病相關，LDH水平直接反映機體心腎功能，CRE水平的增高則表明發生嚴重腎實質性損害。

從臨床血清學檢測結果可知，與正常對照組及自然恢復組相比，通過對腸源性感染小鼠進行雙歧桿菌死活菌懸液灌胃治療，所有檢測指標均有明顯改善，除LDH水平外，其它指標均恢復至正常水平。此外，通過雙歧桿菌死活菌懸液兩者之間的相互比較，可以發現活菌組小鼠臨床血清學指標恢復狀況優于死菌組小鼠，即活菌懸液的短期治療效果仍然優于滅活菌懸液，但除LDH水平外兩者之間無顯著性差異。動物實驗證實了雙歧桿菌滅活菌懸液具有與活菌懸液相同的抗菌群失調致小鼠腸源性感染作用，進而表明雙歧桿菌滅活菌懸液具有與活菌相似的生理效應，一方面恢復腸道生理菌群的生態平衡，保護并修復腸道黏膜，另一方面促進腸道益生菌增殖，從而在防治腸源性感染中起到了良好的治療效果，并在一定程度上替代抗生素．

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篇9

為全面貫徹落實全省村莊清潔行動春季戰役“凈美三秦”攻堅戰視頻會議的要求，進一步改善我鎮農村人居環境和發展環境，促進城鄉協調發展，增強農民群眾的幸福感和獲得感，按照扎實開展“八清一改”，確保做到“八不八保”標準的總體要求，推進農村環境綜合整治，我鎮開展如下工作：

一、建立班子，強化組織領導

***鎮加大了組織領導力度，成立了由***鎮黨委書記***任組長、***鎮鎮長***任副組長、其他干部為成員的領導小組，做到分工明確、各司其職，從而使環境整治工作在組織上得到了保證，工作得以有序順利的開展。

二、目標任務

（一）近期工作。全面開展農***鎮“八清一改”（清理農村生活垃圾、清理村內塘溝、清理畜禽養殖糞污等農業生產廢棄物，以及清理室內外衛生、清理亂堆亂放亂搭建、清理廢棄房屋和殘垣斷壁、清理農村河道衛生、清理農村道路沿線衛生、改變影響農村人居環境的不良習慣）

1、清理農村生活垃圾。目前針對農民文化廣場環境問題，***鎮組織各村黨員干部定時定點清理，帶動群眾自覺維護各村的環境衛生。***鎮**村現正在建垃圾填埋場1處。 

2、道路清潔。近幾個月，***鎮主要干道和通組道路己經基本完善，并聘用了15名保潔人員負責各村主要干道的打掃和境圾的清運工作，通組道路的衛生由各組組長定期組治檢查。 

3、清理蓄禽養殖糞污等農業生產廢物

***等村有養殖戶，畜牧上定期給檢查打針，部分農戶自建了糞池凈化處理，能夠很好的處理畜禽養殖糞污。

4、清理農村河道衛生。對沿河的村莊進行定期的河道清理。*

5、清理室內外衛生。各村每個月定期檢查農戶衛生，打掃好的評優秀，打掃不好的評差，來督促農戶養成打掃環境的好習慣。

6、清理亂堆亂放亂堆建。庭院環境治理的監督管理，拆除違法建筑，清除亂堆亂放、亂貼亂畫現象，保持村莊內道路通暢，房前屋后整潔衛生，建立村莊容貌管理制度。會同農林、衛生部門，指導無公害、綠色、有機食品基地建設，宅旁、路邊植樹綠化，人畜糞便和農業廢物的污染防治和綜合利用工作，結合宣傳發動，爭取群眾支持。

7、清理農村道路沿線衛生。各行政村道路安排公益性崗位人員定期打掃衛生，清理道路。

    （二）長期目標。在鞏固近期目標的基礎上，健全完善農村環境綜合整治長效管理機制，確保***鎮環境綜合整治長抓不懈。通過整治，達到村容村貌整潔、環境舒適優美、特色鮮明、公共服務設施配套。到2019年春，建成“美麗鄉鎮***”省級示范點6個,到2020年底，建成“美麗鄉鎮***”省級示范點9個，力爭全面實現農***鎮垃圾規范化處理，***鎮生活垃圾清運處理率達到100%。

三、下一步工作

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【關鍵詞】脫氫酶：制備：純化：活性檢測：藥物篩選

doi：10.3969j.issn.1004-7484（x.2013.10.654文章編號：1004-7484（2013-10-6104-02

生物體內的化學反應稱為新陳代謝，簡稱代謝。生命的特征之一是不斷地進行新陳代謝，包括物質代謝和能量代謝。雖然生物體內的代謝條件十分溫和，但所有代謝都進行得極為順利和迅速，因為它們幾乎都是在生物催化劑（biocatalyst的催化作用下進行的。迄今為止，人們已經發現了兩類生物催化劑：酶與核酶。酶（enzyme是由活細胞合成的、具有催化作用的蛋白質。核酶（ribozyme是由活細胞合成的、具有催化作用的核酸。

根據酶促反應的性質可將酶分為六大類：氧化還原酶類、轉移酶類、水解酶類、裂解酶類、異構酶類和合成酶類。其中，氧化還原酶類是催化氧化還原反應的酶，又可分為氧化酶和脫氫酶兩類。[1]脫氫酶類即需要輔酶Ⅰ（NA+或輔酶Ⅱ（NAP+作為受氫體，催化底物氫化脫氫反應的酶。

AH2+NA（P+A+NA（PH+H+

脫氫酶（dehydrogenase是廣泛存在于生物體內的一類代謝關鍵酶，在生物體內的氧化產能、解毒等生理活動中[1]起重要作用，是已知酶中種類最多的一類。如糖代謝過程中的3-磷酸甘油醛脫氫酶、乳酸脫氫酶（糖酵解途徑[2]，丙酮酸脫氫酶、二氫硫辛酸脫氫酶、異檸檬酸脫氫酶、α-酮戊二酸脫氫酶、琥珀酸脫氫酶、蘋果酸脫氫酶（有氧氧化途徑，6-磷酸葡萄糖脫氫酶（磷酸戊糖途徑等；脂肪代謝過程中的3-磷酸甘油脫氫酶、脂酰CoA脫氫酶、β-羥脂酰CoA脫氫酶、β-羥丁酸脫氫酶等；氨基酸代謝過程中的L-谷氨酸脫氫酶以及酒精代謝過程中的乙醇脫氫酶、乙醛脫氫酶等。[1]目前，國內外不少學者對其進行了相關研究，本文將對其制備純化、活性檢測方法及在藥物篩選中的應用進行介紹。

1脫氫酶的制備純化

現在采用的純化方法都是以脫氫酶與雜蛋白在理化性質和穩定性上的差別以及脫氫酶的生物學特性為依據。[3]①溶解度不同：有機溶劑沉淀法、鹽析法、共沉淀法、選擇性沉淀法、等電點沉淀法及雙水相分離法。②根據酶和底物、輔助因子以及抑制劑間具有專一親和作用特點的親和分離法等。③根據電學性質、解離性質：吸附層析法、離子交換層析法、電泳法及聚焦層析法等。④根據分子大小的差別：凝膠過濾層析法、超濾法及超離心法等。⑤按穩定性不同：酸堿變性、法熱變性法、表面活性劑變性法等。通常先運用非特異、低分辨率的操作單元，如沉淀、超濾和吸附等，這一階段的主要目的是盡快縮小樣品體積，提高產物濃度，除去最主要的雜質；然后是高分辨率的操作單元，如具有高效選擇性的離子交換色譜和親和層析，而將凝膠過濾層析這類分離規模小、分離速度慢的單元放在最后。

武愛民等[4]采用弱陰離子樹脂EAE-52和藍色瓊脂糖凝膠FF層析對枯草芽孢桿菌產生的胞外二氫硫辛酰胺脫氫酶的粗酶液進行2步純化，得到電泳純的二氫硫辛酰胺脫氫酶，純化倍數為59.7，收率為46.9%。

夏玉鳳等[5]以玉米黃化苗為生物材料，將其搗碎后，通過差速離心獲得線粒體，使用超聲波將其破碎，用2%TritonX-100溶膜，超速離心，硫酸銨沉淀，EAE-C32層析純化琥珀酸脫氫酶，純化倍數為12倍。電泳圖譜顯示一條帶。

李洪山等[6]采用差速離心法、硫酸銨分級沉淀，EAE纖維素和半瓊脂糖柱層析方法，從早生植物梭梭體內分離出純化104倍的蘋果酸脫氫酶。龔韌等[7]以豬心肌為原料，采用組織破碎、二度硫酸銨鹽析、EAE Sepharose F.F.離子交換層析、Phenyl Sepharose 6F.F.疏水層析及Sephadex G-75 Fine凝膠過濾等方法進行分離純化，蘋果酸脫氫酶比酶活達1212.97Umg，純化倍數達122.64倍，酶活力收率為53.64%。

asayoshi T[8]等用含1%Triton X-100的緩沖液從F.saccharophilum的膜蛋白提取，先用陰離子交換柱EAE-Sephrose CL-6B和陽離子交換柱C-Sephrose CL-6B分離，再用Sephacryl S-300凝膠過濾層析，得到了純化倍數為277的純葡萄糖3-脫氫酶，收率達到32%。

6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶（6-PGAase在自然界中分布很廣，據文獻報道，已從植物、哺乳動物肝臟等中純化出6-PGAase[9]。莫宏春等[10]將枯草芽孢桿菌通過超聲破壁，（NH42SO4分段鹽析，EAE-Sepharose FF離子交換層析，Blue-Sepharose CL-6B親和層析，Sephadex G-200凝膠過濾等純化步驟，分離出6-磷酸葡萄糖脫氫酶。

谷氨酸脫氫酶（glutamate dehydrogenase，GH是生物體內谷氨酸生物合成的一種重要酶，自20世紀60年代以來已經有不同來源的GH得到分離純化和研究。[11]朱鴻等[12]以鴨肝為原料，采用丙酮脫脂、重金屬離子沉淀、硫酸銨分級沉淀、EAE-Sepharose離子交換層析和Sephacryl S-200凝膠層析方法，分離純化得到谷氨酸脫氫酶。

乙醇脫氫酶（AH能夠催化乙醇氧化生成乙醛。.C.adhusudhan等[13]采用硫酸銨及雙水相法共同沉淀蛋白質來純化AH。N.A.Willoughby等[14]采用膨脹床金屬親和層析來純化AH。Chuanul hidayat等[15]使用染料―亞氨基二酸做配體，純化AH。

2脫氫酶的活性檢測

脫氫酶由活的生物體所產生，是一種氧化還原酶，在生物細胞內催化有機物氧化脫氫，并將其傳遞給最終受氫體。它能夠催化氫從被氧化的物體（基質AH上轉移到另一個物體（受氫體B上：AH+BA+BH，即酶促有機物質脫氫的作用。因此，脫氫酶活性可以通過加入人工受氫體，采用分光光度法、熒光法、同位素法和電化學法等測定方法進行檢測。

通常用于檢測脫氫酶活性的人工受氫體包括TTC（2，3，5-氯化三苯基四氮唑[16]、刃天青[17]以及INT（碘硝基四唑紫[18]等，其中研究和應用最廣的是TTC。

姚莉麗等[19]采用可見分光光度法（利用2，4-二硝基苯肼和丙酮酸作用，生成丙酮酸二硝基苯腙，在堿性溶液中呈棕色，最大吸收波長為520nm檢測了乳酸脫氫酶的活性。

陳立華等[20]采用紫外分光光度法測定了紅細胞葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性。紫外分光光度法測定G-6-P酶活性，采用測定NAPH生成量的吸光度變化量來反映酶活性高低，是一種酶活性的動力學檢測方法，故可對G-6-P活性定量測定。

曹偉峰等[21]用定量熒光法檢測新生兒篩查濾紙干血斑標本葡萄糖-6-磷酸脫氫酶G6P活性。

陳麗麗等[22]應用PCR技術擴增出了納豆芽孢桿菌谷氨酸脫氫酶編碼基因，構建表達載體對其進行體外表達，并采用分光光度法對表達的蛋白谷氨酸脫氫酶酶活性進行了分析。

3脫氫酶在藥物篩選中的應用

在當代藥物開發過程中，發現和選擇合適的藥物靶點是藥物開的第一步，也是藥物篩選及藥物定向合成的關鍵因素之一。[23]而酶是一類重要的藥物靶點。

隨著細胞及分子生物學的發展，新技術方法越來越多地用于新靶點建立和藥物篩選研究，高通量篩選是20世紀80年代后期形成的尋找新藥的高新技術，是以藥物作用靶點為主要對象的細胞和分子水平的篩選模型，作為一種高度集成化的分析方式，芯片技術在藥物的高通量篩選中具有巨大的優勢，如酶芯片，其理論基礎之一便是對酶活性的影響，如在以酶抑制劑為篩選目標篩選時，可采用酶活性作為指標，說明藥物的作用，[24]可將酶芯片應用于酶抑制作用的篩選。

脫氫酶作為種類最多的一類代謝關鍵酶，雖然其在藥物篩選方面仍處于起步階段，但隨著各種脫氫酶與疾病密切關系的闡明，在不遠的未來，其一定會成為藥物發現中的重要武器。

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